發(fā)布時間：2018-02-25 06:42

  本文關鍵詞： 切口痛 瑞芬太尼 痛覺過敏 術后持續(xù)性疼痛 MRSF MOR　出處：《南京大學》2015年碩士論文　論文類型：學位論文

【摘要】：目的 探討在瑞芬太尼痛覺過敏切口痛模型及皮膚／肌肉切口牽拉模型中脊髓神經(jīng)元限制性沉默因子(NRSF)的作用。方法 第一部分：7-8周齡的健康清潔級成年雄性昆明小鼠56只,體重20～25 g,按隨機數(shù)字表法分為7組(n=8)：空白對照組(C組)、切口痛組(I組)、切口+瑞芬太尼組(IR組)、NRSF反義寡核苷酸組(NAS組)、切口+NRSF反義寡核苷酸組(I+NAS組)、切口+瑞芬太尼+NRSF反義寡核苷酸(IR+NAS組)和切口+瑞芬太尼+NRSF錯義寡核苷酸組(IR+NMS組)。各組均在造模前每天同一時間行鞘內(nèi)穿刺給藥,連續(xù)給藥3 d。C組、Ⅰ組和IR組鞘內(nèi)注射人工腦脊液5μl,NAS組、I+NAS組和IR+NAS組鞘內(nèi)注射NRSF反義寡核苷酸10 μg, IR+NMS組鞘內(nèi)注射NRSF錯義寡核苷酸10μg,均為1次/d,連續(xù)3 d。于末次鞘內(nèi)注射后30min時,C組和NAS組皮下輸注生理鹽水0.4 ml,Ⅰ組和I+NAS組制備切口痛模型,同時皮下輸注生理鹽水0.4 ml,IR組、IR+NMS組和IR+NAS組制備切口痛模型,同時皮下輸注瑞芬太尼(0.04 mg/kg),30 min泵完。各組分別于造模前24 h(基礎值)、術后2h、6h、24h和48 h檢測術側熱縮足反射潛伏期(Paw withdrawal thermal latency, PWTL)及機械縮足反射閡值(Paw mechanical withdrawal threshold, PMWT),各組均取3只老鼠斷頭處死,分離L3-5節(jié)段脊髓腰膨大處,Western blot法測定NRSF、MOR的蛋白表達。第二部分：56只雄性SD大鼠,4～6周齡,體重180～200 g,采用隨機數(shù)字表法,分為兩組：假手術組(S組,n=20)和模型組(M組,n=36)。兩組分別于造模前(base)、造模后第4d、7d、10d、14d每天相同時間行痛行為學測試并與相應時點每組各取12只小鼠斷頭處死,分離L3-5脊髓節(jié)段左側腰膨大處,用Western blot法測定NRSF、MOR的蛋白表達。M組剩余24只小鼠隨機分為M1、M2和M3組,每組8只。S組剩余8只老鼠和M1、M2、M3組造模前連續(xù)3 d,每天同一時間行鞘內(nèi)穿刺給藥。S組和M1組小鼠注射人工腦脊液,M2組小鼠注射濃度為10 μg/pl的NRSF錯義寡核苷酸,M3組小鼠注射濃度為10 μg/μl的NRSF反義寡核苷酸,注藥容積為10μl,每天給藥1次。S、M1、M2和M3組在造模前(base)和造模后第4d、7d、14d行痛行為學測試并在造模后第14d再次測定脊髓水平NRSF、MOR的蛋白含量。結果第一部分：與C組比較,I組、IR組、I+NAS組、IR+NMS組和IR+NAS組術后2 h、6 h、24 h和48 h時PWMT和PWTL降低(P0.05), NAS組各時點PWMT和PWTL差異無統(tǒng)計學意義(P0.05)；與I組比較,IR組和IR+NMS組術后2 h、6 h、24 h和48 h時PWMT和PWTL降低(P0.05), I+NAS組各時點PWMT和PWTL差異無統(tǒng)計學意義(P0.05)；與IR組比較,IR+NMS組各時點PWMT和PWTL差異無統(tǒng)計學意義(P0.05),IR+NAS組術后2 h、6 h、24 h和48 h時PWMT和PWTL升高(P0.05)。第二部分：與S組相比,M組大鼠術后4d、7d、10 d、14d時點痛行為學指標機械縮足閾值(PWMT)明顯降低(P0.05)；M組脊髓背角NRSF蛋白表達水平明顯增高(P0.05),MOR蛋白表達水平逐漸降低(P0.05)。與M1組和M2相比,給藥期間M3組大鼠機械縮足閾值升高(P0.05)。鞘內(nèi)給藥后,M3組大鼠脊髓水平NRSF蛋白表達減少(P0.05), MOR蛋白表達增多(P0.05)。鞘內(nèi)注射人工腦脊液對大鼠疼痛行為學無明顯影響(P0.05)。結論鞘內(nèi)預先注入NRSF反義寡核苷酸能夠明顯改善瑞芬痛敏小鼠和SMIR大鼠的痛行為；脊髓水平NRSF及MOR蛋白表達在瑞芬痛敏小鼠沒有明顯差異,在SMIR大鼠表達明顯。
[Abstract]:Objective to investigate the remifentanil hyperalgesia model of incisional pain and skin incision / muscle stretch spinal cord neuron restrictive silencer factor model (NRSF) function. Methods: in the first part, healthy 7-8 week old adult male 56 Kunming mice, weighing 20~25 g, according to the random number table method divided into 7 groups (n=8): control group (group C), incisional pain group (I group), incision + remifentanil group (IR group), NRSF antisense oligonucleotide group (NAS group), incision +NRSF antisense oligonucleotide group (I+NAS group), remifentanil incision + +NRSF antisense oligonucleotide (IR+NAS group) and incision + remifentanil +NRSF missense oligonucleotides group (IR+NMS group). Each group before modeling every day at the same time puncture intrathecal administration, continuous administration of 3 d.C group, group I and group IR intrathecal injection of artificial cerebrospinal fluid 5 L, NAS group, I+NAS group and IR+NAS group, intrathecal injection of NRSF antisense oligonucleotides 10 g, IR+NMS group 闉樺唴娉ㄥ皠NRSF閿欎箟瀵℃牳鑻烽吀10渭g,鍧囦負1嬈，

本文編號：1533411