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腺病毒介導TGF-β1基因體外轉染自體Hamstring腱重建兔ACL術后腱—骨愈合的形態(tài)學觀察

發(fā)布時間:2018-02-10 23:07

  本文關鍵詞: 腺病毒 轉化生長因子β1 前交叉韌帶 腱-骨愈合 出處:《南華大學》2015年碩士論文 論文類型:學位論文


【摘要】:【目的】觀察腺病毒介導TGF-β1基因轉染對自體Hamstring腱重建兔ACL術后腱-骨愈合組織形態(tài)學的影響!痉椒ā啃g前構建攜帶TGF-β1基因的重組腺病毒載體Ad TGFβ1,取新西蘭兔48只,體重2.0±0.4 kg,平均18月齡,隨機分為A、B、C三組,每組16只動物,以兔后肢右膝關節(jié)作為研究對象,自身Hamstring腱作為ACL替代物。A組采用Ad TGFβ1轉染的自體同側Hamstring腱重建ACL,即Ad TGFβ1轉染組(實驗組);B組采用腺病毒空載體Ad GFP轉染的自體同側Hamstring腱重建ACL,即Ad GFP轉染組(空載體對照組);C組采用未經(jīng)處理的自體同側Hamstring腱重建ACL,即DMEM處理組(空白對照組)。每組均在2、4、8、12周四個時間點處死4只實驗動物,初步進行形態(tài)學大體觀察。之后均以石蠟制作成切片行HE、Masson染色進行觀察,并在界面區(qū)行成纖維細胞計數(shù)及對腱-骨愈合情況做半定量Buark評分!窘Y果】1.形態(tài)學大體形態(tài)三組新西蘭兔分別在術后2周、4周、8周、12周各處死4只并取膝關節(jié)觀察,膝關節(jié)周圍無發(fā)熱、紅腫,切口無感染、無裂開跡象,打開關節(jié)腔見滑膜明顯增生,半月板完好,未見明顯磨損及破裂,移植肌腱張力良好,固定牢固,2周時移植腱與股骨、脛骨隧道間仍可見間隙,4周時可見部分瘢痕組織填充于骨隧道內口,8周時骨隧道內口可見大量瘢痕組織填充,外口見部分骨樣組織生長,12周時骨樣組織生長較8周明顯增多,移植肌腱與骨隧道壁緊密粘連。2.HE、Masson染色①A組:術后2周腱-骨愈合界面區(qū)見少量成纖維細胞增生及無序排列的膠原纖維;術后4周界面區(qū)可見軟骨組織形成,部分成纖維細胞和類軟骨細胞參與其中,界面部分粘連;術后8周界面區(qū)組織連接較前緊密,已有軟骨移行帶出現(xiàn),類軟骨細胞排列規(guī)整,Sharpey纖維初步形成;術后12周界面區(qū)見到規(guī)整的Sharpey纖維,有致密結締組織及鈣化軟骨形成,部分區(qū)域組織有直接愈合傾向。②B、C組:術后2周移植肌腱與骨隧道間可見少量成纖維細胞增生,界面區(qū)間隙明顯;術后4周界面區(qū)可見炎性細胞和成纖維細胞,結合較疏松,且有明顯的孔隙,無腱-骨連接;術后8周腱-骨界面區(qū)結合較疏松,但好于4周時,未見明顯Sharpey纖維生成;術后12周界面區(qū)少量Sharpey纖維排列紊亂,見鈣化軟骨形成,腱-骨組織之間連接相對緊密,組織未見直接愈合傾向。3.成纖維細胞計算分別于2、4、8、12周四個時間點對三組HE染色切片采用IPP(Image-Pro Plus)顯微鏡圖像分析軟件進行成纖維細胞計數(shù),并行單向方差分析及SNK法檢驗,結果表明:A組分別與B組、C組在各個時間點比較,A組成纖維細胞數(shù)量均高于B、C組,且差異有統(tǒng)計學意義(P0.05),而B組與C組在各時間點比較,差異均無統(tǒng)計學意義。4.組織形態(tài)學Buark半定量分級分別于2、4、8、12周四個時間點對三組HE染色切片觀察,依據(jù)腱-骨愈合界面中纖維血管組織量行腱-骨愈合Buark半定量分級,通過Kruskal-Wallis H檢驗進行統(tǒng)計學分析,結果表明:12周內A組結果均優(yōu)于B、C組,且差異有統(tǒng)計學意義(P0.01)!窘Y論】腺病毒介導TGF-β1基因轉染對自體Hamstring腱重建兔ACL術后腱-骨愈合有促進作用。
[Abstract]:......
【學位授予單位】:南華大學
【學位級別】:碩士
【學位授予年份】:2015
【分類號】:R687

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本文編號:1501660

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