芪參還五膠囊對大鼠卡壓性坐骨神經(jīng)損傷作用的實(shí)驗(yàn)研究
本文關(guān)鍵詞: 芪參還五膠囊 大鼠 坐骨神經(jīng) 卡壓損傷 運(yùn)動(dòng)終板 出處:《河北醫(yī)科大學(xué)》2015年碩士論文 論文類型:學(xué)位論文
【摘要】:目的:本課題擬通過以芪參還五膠囊藥物灌胃在大鼠坐骨神經(jīng)卡壓損傷模型的應(yīng)用,通過觀察光鏡下卡壓坐骨神經(jīng)組織結(jié)構(gòu)的改變、腓腸肌運(yùn)動(dòng)終板的染色及形態(tài)改變;電鏡下腓腸肌運(yùn)動(dòng)終板的改變、坐骨神經(jīng)切片的超微結(jié)構(gòu)改變,比較實(shí)驗(yàn)組和對照組神經(jīng)退變及修復(fù)再生的差異,以期明確芪參還五膠囊促進(jìn)周圍神經(jīng)修復(fù)再生的作用和效應(yīng)部位及時(shí)間窗,為中西醫(yī)結(jié)合治療周圍神經(jīng)卡壓性疾患提供理論和實(shí)驗(yàn)依據(jù)。方法:選擇雄性Sprague-Dawley大鼠48只,體重230g±20g,清潔級。坐骨神經(jīng)鉗夾法制作大鼠實(shí)驗(yàn)?zāi)P?以1.5%戊巴比妥鈉(0.2ml/100g)作腹腔注射麻醉,麻醉成功后常規(guī)備皮、消毒、鋪巾,于右臀肌間隙分離坐骨神經(jīng),梨狀肌下緣0.8cm處用大止血鉗鉗夾坐骨神經(jīng),壓滿3扣,擠壓5秒后松開10秒,反復(fù)3次,關(guān)閉切口。造模后按隨機(jī)數(shù)字表法平均分為實(shí)驗(yàn)組及對照組,每組24只,分籠喂養(yǎng)。造模后第2日開始喂藥,實(shí)驗(yàn)組:給予芪參還五膠囊藥末鹽水溶液灌胃,3g生藥/ml,1ml/100g體重,1次/日;對照組:給予生理鹽水1ml/100g體重灌胃,1次/日。術(shù)后1、2、4、8周末實(shí)驗(yàn)組和對照組隨機(jī)各取6只進(jìn)行比較。研究內(nèi)容:1實(shí)驗(yàn)大鼠整體及標(biāo)本大體觀察;2光鏡觀察:1)卡壓坐骨神經(jīng)光鏡下觀察:有髓纖維增生情況、髓鞘改變、軸索、血管再生情況。2)腓腸肌運(yùn)動(dòng)終板光鏡觀察:腓腸肌形態(tài)的改變;運(yùn)動(dòng)終板染色情況及結(jié)構(gòu)改變。3電鏡觀察:1)卡壓坐骨神經(jīng)標(biāo)本電鏡觀察:觀察神經(jīng)髓鞘、軸索、雪旺氏細(xì)胞、線粒體、微管等超微結(jié)構(gòu)的變化。2)腓腸肌電鏡觀察:不同時(shí)間段對運(yùn)動(dòng)終板處肌節(jié),軸突,雪旺氏細(xì)胞,初級皺褶,次級皺褶,突觸小泡的改變的影響。結(jié)果:1動(dòng)物整體觀察造模后大鼠飲食正常,跛行,行走拖步,切口愈合良好,無紅腫、潰瘍及感染,無自噬現(xiàn)象。造模后1周右后肢蜷縮,2周小腿肌肉出現(xiàn)不同程度的萎縮,患肢功能受限。從恢復(fù)情況來看,2周內(nèi)兩組未見明顯差異,2周后,實(shí)驗(yàn)組優(yōu)于對照組。4周后隨時(shí)間的延長, 步態(tài)和肌肉逐漸恢復(fù)正常。2大體觀察造模后1、2周實(shí)驗(yàn)組和對照組兩組損傷段坐骨神經(jīng)改變無明顯差異,卡壓處均出現(xiàn)神經(jīng)充血、水腫,卡壓處變細(xì),卡壓遠(yuǎn)端可見神經(jīng)瘤樣改變。損傷神經(jīng)支配之腓腸肌萎縮。4周時(shí)實(shí)驗(yàn)組卡壓神經(jīng)充血水腫已不明顯,卡壓神經(jīng)增粗,腓腸肌增粗;對照組卡壓神經(jīng)充血、水腫較前減輕,減輕程度次于實(shí)驗(yàn)組改變,腓腸肌增粗不明顯。8周時(shí)兩組卡壓神經(jīng)充血、水腫均消失,兩組卡壓處神經(jīng)均明顯增粗,接近于正常。3光鏡觀察3.1卡壓遠(yuǎn)端神經(jīng)造模后1、2周內(nèi)兩組改變無明顯差異,神經(jīng)周圍出現(xiàn)大量的炎性細(xì)胞浸潤,有髓纖維數(shù)少,髓鞘厚薄不均,髓鞘脫失明顯,束間結(jié)締組織明顯,血管較少。4周時(shí)實(shí)驗(yàn)組有髓纖維數(shù)明顯增多,粗大纖維數(shù)目比例增加,髓鞘明顯增厚,髓鞘解體少,未見卵圓體形成,束間結(jié)締組織明顯減少,血管增生明顯,血運(yùn)豐富。對照組有髓纖維數(shù)增多,但以細(xì)小有髓纖維為主,髓鞘較薄,髓鞘解體明顯,可見卵圓體形成,束間結(jié)締組織較多,有血管增生。8周時(shí)實(shí)驗(yàn)組有髓纖維數(shù)增多顯著,粗大纖維數(shù)比例明顯增加,髓鞘增厚,軸索外觀完整,束間未見明顯的結(jié)締組織增生,神經(jīng)纖維間血管壁薄,內(nèi)生細(xì)胞無腫脹,管腔通暢,血運(yùn)豐富,神經(jīng)纖維逐漸發(fā)育成熟。對照組有髓纖維數(shù)出現(xiàn)明顯增多,但粗大纖維比例增加不明顯,髓鞘較前增厚,束間結(jié)締組織減少,神經(jīng)纖維間血管壁厚,內(nèi)皮細(xì)胞腫脹。3.2腓腸肌運(yùn)動(dòng)終板(MEP)改變情況造模后1周實(shí)驗(yàn)組MEP染色呈棕褐色,橢圓形,色澤稍淡,終板邊緣肌細(xì)胞水腫。對照組與實(shí)驗(yàn)組相似。2周時(shí)實(shí)驗(yàn)組MEP染色變淺,不均勻,形態(tài)不一;對照組部分出現(xiàn)染色空白區(qū),終板數(shù)稀少。4周時(shí)實(shí)驗(yàn)組MEP大體形態(tài)存在,光鏡下可辨認(rèn),數(shù)量進(jìn)一步減少;對照組MEP形態(tài)分辨不清,數(shù)量稀少。8周時(shí),兩組MEP大體形態(tài)接近正常,染色均勻,兩組改變無明顯差異。4電鏡觀察4.1卡壓處神經(jīng)電鏡觀察造模后1周時(shí)實(shí)驗(yàn)組髓鞘嚴(yán)重變形,板層結(jié)構(gòu)排列紊亂,髓索變窄,索內(nèi)線粒體消失,可見少量微絲。對照組與實(shí)驗(yàn)組相似。2周時(shí)實(shí)驗(yàn)組髓鞘較前增厚,可見線粒體、微絲、微管,但數(shù)目較少,排列稀疏。對照組髓鞘腫脹,線粒體空化壞死,崩解。4周時(shí)實(shí)驗(yàn)組髓鞘增生明顯,排列不規(guī)律,可見到線粒體。對照組髓鞘變厚變形,軸索變窄,線粒體消失,可見少量微絲。8周時(shí)實(shí)驗(yàn)組再生有髓神經(jīng)纖維增多,髓鞘增厚排列規(guī)則,板層結(jié)構(gòu)清晰,可見線粒體、微絲較前增多,雪旺氏細(xì)胞少。對照組髓鞘顯著增厚,不規(guī)則,線粒體、微絲較少,未見雪旺氏細(xì)胞。4.2腓腸肌運(yùn)動(dòng)終板電鏡觀察造模后1周時(shí)突觸間隙變寬,初級皺褶和次級皺褶變淺,線粒體腫脹,實(shí)驗(yàn)組和對照組改變無明顯差異。2周時(shí)實(shí)驗(yàn)組MEP萎縮,終板突觸后區(qū)域變寬,初級皺褶和次級皺褶變淺,突觸間隙變寬,線粒體腫脹,無空泡變性;對照組MEP改變明顯,初級皺褶和次級皺褶扭曲,線粒體空泡變性。4周時(shí)實(shí)驗(yàn)組MEP萎縮,初級皺褶和次級皺褶扭曲導(dǎo)致次級突觸間隙變寬,線粒體空泡變性;對照組MEP突觸后區(qū)域簡單化,次級皺褶局部消失,突觸間隙繼續(xù)增寬。8周時(shí)實(shí)驗(yàn)組終板突觸間隙正常,初級皺褶和次級皺褶較為清晰,可以分辨。對照組接近于實(shí)驗(yàn)組。結(jié)論:芪參還五膠囊在一定時(shí)限內(nèi)有延緩肌肉萎縮和運(yùn)動(dòng)終板的退行性改變、促進(jìn)神經(jīng)修復(fù)再生的作用,其作用機(jī)制可能為:改善卡壓神經(jīng)局部微環(huán)境,促進(jìn)雪旺細(xì)胞增殖,延緩運(yùn)動(dòng)終板超微結(jié)構(gòu)退變及促進(jìn)其再生速度,同時(shí)改善卡壓神經(jīng)血供,減輕局部炎癥。
[Abstract]:......
【學(xué)位授予單位】:河北醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2015
【分類號】:R651.3
【參考文獻(xiàn)】
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,本文編號:1479481
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