ADAM17-shRNA轉(zhuǎn)染的骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞對(duì)裸鼠乳腺癌移植瘤生長(zhǎng)的影響
本文關(guān)鍵詞: 解聚素-金屬蛋白酶-sh RNA 乳腺癌 MCF-細(xì)胞 骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞 出處:《中國(guó)腫瘤生物治療雜志》2017年10期 論文類(lèi)型:期刊論文
【摘要】:目的:探討轉(zhuǎn)染解聚素-金屬蛋白酶17-shRNA(a disintegrin and metalloprotease 17-shRNA,ADAM17-shRNA)的骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞(bone marrow mesenehymal stem cells,BMMSC)對(duì)乳腺癌MCF-7細(xì)胞裸鼠移植瘤的抑制效果。方法:全骨髓貼壁法分離并培養(yǎng)3周雄性SD大鼠的BMMSC,利用慢病毒介導(dǎo)的ADAM17-shRNA轉(zhuǎn)染BMMSC。30只裸鼠建立MCF-7乳腺癌移植瘤模型,種植腫瘤細(xì)胞14 d后建模成功。按照數(shù)字表法隨機(jī)分成對(duì)照組(注射等量PBS)、BMMSC組(注射1×10~6/ml BMMSC)和轉(zhuǎn)染組(注射1×10~6/ml轉(zhuǎn)染ADAM17-shRNA的BMMSC),每組10只。在種植細(xì)胞第15天開(kāi)始經(jīng)尾靜脈注射BMMSC進(jìn)行抑瘤實(shí)驗(yàn)(0.1 ml/只,每3 d給藥1次,共計(jì)5次),觀察裸小鼠移植瘤的生長(zhǎng)情況;抑瘤實(shí)驗(yàn)16 d后處死裸鼠。利用Real-time PCR法檢測(cè)移植瘤組織ADAM17 mRNA表達(dá),Western blotting法檢測(cè)移植瘤組織ADAM17蛋白表達(dá)。結(jié)果:抑瘤實(shí)驗(yàn)16 d時(shí),對(duì)照組、BMMSC組移植瘤體積明顯高于轉(zhuǎn)染組[(787.15±25.95)、(767.02±28.98)vs(361.89±19.75)mm~3,均P0.01];BMMSC組、轉(zhuǎn)染組抑瘤率明顯高于對(duì)照組(2.57%、53.89%vs 0.00%,均P0.05)。對(duì)照組、BMMSC組ADAM17 mRNA的表達(dá)水平明顯高于轉(zhuǎn)染組(1.00±0.01、0.97±0.08 vs 0.30±0.09,均P0.05);對(duì)照組、BMMSC組ADAM17蛋白表達(dá)水平明顯高于轉(zhuǎn)染組(0.70±0.09、0.68±0.02 vs 0.45±0.05,均P0.05)。結(jié)論:ADAM17-shRNA通過(guò)BMMSC介導(dǎo)可將ADAM17靶向歸巢至裸鼠乳腺癌移植瘤并發(fā)揮抑瘤作用。
[Abstract]:Objective: to investigate the transfection of disintegrin and metalloprotease 17-shRNA into depolymerin-metalloproteinase-17-shRNA. The bone marrow mesenchymal stem cells (marrow mesenehymal stem cells) of ADAM17-shRNAs. Methods: BMMSC of male SD rats was isolated and cultured for 3 weeks by whole bone marrow adherent method. The model of MCF-7 breast cancer transplantation was established in nude mice transfected with BMMSC.30 by lentivirus-mediated ADAM17-shRNA. The tumor cells were successfully established 14 days after implantation and were randomly divided into two groups according to the digital table method: the control group was injected with the same amount of PBSs. BMMSC group (1 脳 10 ~ (-6) / ml BMMSC) and transfection group (1 脳 10 ~ (6) / ml BMMSC-transfected ADAM17-shRNA). 10 mice in each group were injected with BMMSC through caudal vein on the 15th day of implantation for 0.1 ml / mouse tumor inhibition test, once every 3 days, a total of 5 times). The growth of transplanted tumor in nude mice was observed. The nude mice were killed after 16 days of tumor inhibition experiment and the expression of ADAM17 mRNA was detected by Real-time PCR method. Western blotting method was used to detect the expression of ADAM17 protein in transplanted tumor tissue. Results: the volume of transplanted tumor in the control group was significantly higher than that in the transfected group at 16 days after tumor inhibition experiment. [787. 15 鹵25. 95 mil. 767.02 鹵28. 98 m / s ~ 361.89 鹵19. 75 m / m ~ (-1), respectively (P0.01); In the BMMSC group, the tumor inhibition rate in the transfection group was significantly higher than that in the control group (P < 0.05). The expression of ADAM17 mRNA in BMMSC group was significantly higher than that in transfection group (1.00 鹵0.01) 0.97 鹵0.08 vs 0.30 鹵0.09. P0.05; The expression of ADAM17 protein in the control group was significantly higher than that in the transfected group (0.70 鹵0.09 鹵0.68 鹵0.02 vs 0.45 鹵0. 05). Conclusion the ADAM17 targeting homing to breast cancer transplanted into nude mice can be mediated by BMMSC and play a role in tumor inhibition.
【作者單位】: 華北理工大學(xué)附屬醫(yī)院腫瘤外科;華北理工大學(xué)基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)院病理學(xué)系;華北理工大學(xué)冀唐學(xué)院圖書(shū)館;
【基金】:唐山市科學(xué)技術(shù)研究與發(fā)展計(jì)劃資助項(xiàng)目(No.14130256B)~~
【分類(lèi)號(hào)】:R737.9
【正文快照】: [Chin J Cancer Biother,2017,24(10):1088-1092.DOI:10.3872/j.issn.1007-385X.2017.10.008]解聚素-金屬蛋白酶17(adisintegrin and metallo-protease-17,ADAM17)可通過(guò)激活EGFR促進(jìn)乳腺癌的增殖和侵襲[1-2]。骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞(bone marrowmesenehymal stem cells,BMMSC)是來(lái)
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