本文關(guān)鍵詞： 髓核間充質(zhì)干細(xì)胞 低密度接種傳代 免疫表型 大鼠　出處：《中國(guó)矯形外科雜志》2017年11期 　論文類型：期刊論文

【摘要】：[目的]比較不同細(xì)胞接種密度傳代培養(yǎng)大鼠髓核間充質(zhì)干細(xì)胞(nucleus pulposus-derived mesenchymal stem cells,NPMSCs)對(duì)NPMSCs的形態(tài)及表面標(biāo)志物的影響。[方法]取12周齡SD大鼠椎間盤髓核組織體外消化獲得原代細(xì)胞,待達(dá)到60%~70%融合時(shí)消化,并按接種密度分為三組,分別為低密度組(5個(gè)細(xì)胞/cm~2)、中密度組(100個(gè)細(xì)胞/cm~2)、正常密度組(10 000個(gè)細(xì)胞/cm~2)。培養(yǎng)至達(dá)到傳代條件后,各組細(xì)胞均按10 000個(gè)細(xì)胞/cm~2在體外進(jìn)行傳代接種,進(jìn)行形態(tài)學(xué)觀察并檢測(cè)干細(xì)胞的特征性表面標(biāo)志(CD29、CD34、CD44、CD45、CD90)的表達(dá)情況。[結(jié)果]在細(xì)胞形態(tài)學(xué)方面,各接種密度組細(xì)胞均可呈旋渦狀貼壁生長(zhǎng),但低密度組以集落樣生長(zhǎng),細(xì)胞多呈長(zhǎng)梭形,形態(tài)一致;中密度組和高密度組細(xì)胞中類圓形、多邊形細(xì)胞增多,大量細(xì)胞出現(xiàn)形態(tài)不規(guī)則、細(xì)胞寬大扁平、折光性差。在細(xì)胞表面標(biāo)志物方面,低密度組CD44、CD90的表達(dá)率明顯高于中密度組和高密度組(P0.05),而CD29、CD34、CD45差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。[結(jié)論]低密度接種法可提高大鼠NPMSCs CD44及CD90的陽(yáng)性率,純化NPMSCs。
[Abstract]:[Objective] to compare the subculture of rat nucleus pulposus mesenchymal stem cells (MSCs) with different cell densities. Nucleus pulposus-derived mesenchymal stem cells. The effect of NPMSCs on the morphology and surface markers of NPMSCs. [Methods the primary cells were digested from the nucleus pulposus of SD rats at 12 weeks of age in vitro and digested by 70% fusion and divided into three groups according to the density of inoculation. They were divided into low density group (5 cells / cm ~ (2)), medium density group (100 cells / cm ~ (2)) and normal density group (10 000 cells / cm ~ (2)). All the cells in each group were inoculated in vitro according to 10 000 cells / cm ~ (2) to observe the morphology and to detect the characteristic surface marker of stem cells: CD29, CD34 and CD44. Expression of CD45 + CD90). [Results: in the aspect of cell morphology, the cells in each inoculation density group all showed vortex adherent growth, but in the low density group, the cells grew like colony, and most of the cells were spindle-shaped, and the morphology was the same. In the medium density group and high density group, the cells were round, polygonal cells increased, a large number of cells appeared irregular, the cells were broad and flat, and the refractive index was poor. In terms of cell surface markers, low density group CD44. The expression rate of CD90 was significantly higher than that of middle density group and high density group, but the difference of CD29 CD34 and CD45 was not statistically significant. [Conclusion: low density inoculation can increase the positive rate of NPMSCs CD44 and CD90 in rats.
【作者單位】： 南方醫(yī)科大學(xué)第三臨床醫(yī)學(xué)院;海軍總醫(yī)院骨科;解放軍第306醫(yī)院航天城臨床部;
【基金】：國(guó)家自然科學(xué)基金資助項(xiàng)目(編號(hào):81470102;81171740)
【分類號(hào)】：R681.5
【正文快照】： 椎間盤退變是譬如椎間盤突出等脊柱退行性疾病的病理學(xué)基礎(chǔ)。但是目前仍不明確椎間盤退變的相關(guān)機(jī)制。近年來(lái),在機(jī)體的大多數(shù)組織及器官中,均發(fā)現(xiàn)了維持組織內(nèi)穩(wěn)態(tài)的重要組成部分——內(nèi)源性干細(xì)胞,目前認(rèn)為這些干細(xì)胞是組織或器官是否產(chǎn)生疾病的重要原因。最近,髓核組織中也發(fā)

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