紫檀芪通過促進(jìn)Nrf2核轉(zhuǎn)移在調(diào)節(jié)髓核細(xì)胞炎癥反應(yīng)中的作用
本文關(guān)鍵詞:紫檀芪通過促進(jìn)Nrf2核轉(zhuǎn)移在調(diào)節(jié)髓核細(xì)胞炎癥反應(yīng)中的作用 出處:《中國(guó)細(xì)胞生物學(xué)學(xué)報(bào)》2016年10期 論文類型:期刊論文
更多相關(guān)文章: 髓核細(xì)胞 紫檀芪 NF-E相關(guān)因子 炎癥反應(yīng)
【摘要】:紫檀芪(pterostilbene,PTE)是一種有效的抗炎抗氧化應(yīng)激的天然藥物,但是其對(duì)椎間盤髓核細(xì)胞(nucleus pulposus cells,NPCs)的作用以及機(jī)制未知。該文培養(yǎng)SD大鼠原代NPCs,采用CCK-8分析PTE的細(xì)胞毒性,ELISA、Real-time PCR和Griess方法分析PTE對(duì)IL-1β誘導(dǎo)的髓核細(xì)胞炎癥反應(yīng)的影響,Western blot、免疫熒光、NF-E2相關(guān)因子2(nuclear factor erythroid 2-related factor 2,Nrf2)si RNA轉(zhuǎn)染等方法分析Nrf2在PTE抗炎中的作用。結(jié)果顯示,20μmol/L PTE作用24 h對(duì)NPCs活力沒有影響,PTE可以明顯抑制IL-1β誘導(dǎo)產(chǎn)生的炎癥介質(zhì)一氧化氮(nitric oxide,NO)和前列腺素E2(prostaglandin E2,PGE2)的含量,并抑制環(huán)氧酶-2(cyclooxygenase-2,COX-2)和誘導(dǎo)型一氧化氮合酶(inducible nitric oxide synthase,i NOS)m RNA的水平(P0.05)。Western blot結(jié)果顯示,PTE促進(jìn)細(xì)胞核中Nrf2的升高,卻導(dǎo)致胞質(zhì)中Nrf2的降低(P0.05)。免疫熒光亦顯示,Nrf2從細(xì)胞質(zhì)轉(zhuǎn)移到細(xì)胞核。轉(zhuǎn)染Nrf2 si RNA后,Western blot證實(shí)細(xì)胞核中Nrf2的下調(diào)。Nrf2下調(diào)后的NPCs中,PTE作用下分泌的NO和PGE2的含量以及COX-2和i NOS m RNA的水平相對(duì)正常細(xì)胞明顯升高(P0.05)。該研究結(jié)果提示,PTE可能通過促進(jìn)NPCs中的Nrf2發(fā)生核轉(zhuǎn)移導(dǎo)致下游一系列抗氧化應(yīng)激基因的轉(zhuǎn)錄,進(jìn)而抑制IL-1β誘導(dǎo)的炎癥反應(yīng)。
[Abstract]:Pterostilbene (PTE) is an effective natural antioxidant for anti-inflammatory and anti oxidative stress, but its effect on the nucleus pulposus cells (NPCs) is unknown. The culture of SD rat NPCs, the cytotoxicity of CCK-8 analysis of PTE, ELISA, Real-time, PCR and Griess influence analysis of nucleus pulposus cells PTE on inflammatory reaction induced by beta IL-1, Western blot, immunofluorescence and NF-E2 related factor 2 (nuclear factor erythroid 2-related factor 2, Nrf2) Nrf2 in PTE inflammation analysis on the effect of Si RNA transfection method. The results showed that 20 mol/L PTE 24 h had no effect on the activity of NPCs, inflammatory mediators nitric oxide PTE can significantly inhibit IL-1 induced by beta (nitric oxide NO) and E2 (prostaglandin E2, prostaglandin PGE2) content, and inhibit cyclooxygenase -2 (cyclooxygenase-2, COX-2) and inducible nitric oxide synthase (inducible nitric oxide synthase, I NOS) m RNA level (P0.05). The results of Western blot showed that PTE promoted the increase of Nrf2 in the nucleus, but resulted in the decrease of Nrf2 in the cytoplasm (P0.05). Immunofluorescence also showed that Nrf2 was transferred from cytoplasm to nucleus. After transfection of Nrf2 Si RNA, Western blot confirmed the downregulation of Nrf2 in the nucleus. The levels of NO and PGE2 secreted by PTE and the level of COX-2 and I NOS m RNA increased significantly (P0.05) in NPCs after the downregulation of Nrf2. The results suggest that PTE may promote the transcription of downstream antioxidative stress genes by promoting the nuclear transfer of Nrf2 in NPCs, thereby inhibiting IL-1 beta induced inflammatory response.
【作者單位】: 寧波大學(xué)醫(yī)學(xué)院寧波市第二醫(yī)院骨二科;
【基金】:寧波市科技惠民項(xiàng)目(批準(zhǔn)號(hào):2016C51003)資助的課題~~
【分類號(hào)】:R681.53
【正文快照】: 寧波市科技惠民項(xiàng)目(批準(zhǔn)號(hào):2016C51003)資助的課題網(wǎng)絡(luò)出版時(shí)間:2016-10-27 16:42:36 URL:http://www.cnki.net/kcms/detail/31.2035.Q.20161027.1642.004.html椎間盤退變(intervertebral disc degeneration,IDD)是腰椎間盤(intervertebral disc,IVD)突出癥、椎管狹窄、腰椎
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,本文編號(hào):1342009
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