本文關鍵詞：臭氧水對兔膝骨性關節(jié)炎作用的實驗研究

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【摘要】：研究背景骨性關節(jié)炎(Osteoarthritis,OA)作為中老年人群中發(fā)病率較高的一種慢性、退行性疾病,最常累及膝關節(jié),致殘率高,給患者帶來極大痛苦。其發(fā)病機制相當復雜,由于機械性、生物性等多方面因素的影響,OA以關節(jié)軟骨的病變最為突出。而滑膜炎是OA諸多炎癥反應的主要表現(xiàn)之一,可引起骨性關節(jié)炎早期的臨床癥狀,進而影響關節(jié)軟骨的改變。目前針對膝骨性關節(jié)炎的治療方法多種多樣,臨床上主要應用非阿片類消炎止痛藥或阿片類藥物緩解疼痛,關節(jié)腔內注射玻璃酸鈉或臭氧改善骨關節(jié)炎癥狀,手術治療用于晚期及嚴重疼痛的骨關節(jié)炎患者,其他各種治療方法,包括中醫(yī)療法也常被應用于該疾病。盡管臨床上臭氧水用于膝骨性關節(jié)炎效果明確,但與其相應的實驗研究未見報道。本實驗通過關節(jié)腔注射臭氧水對兔膝骨性關節(jié)炎模型進行干預,對比實驗動物關節(jié)活動度的變化,觀察關節(jié)軟骨及滑膜的病理變化,利用酶聯(lián)免疫吸附測定法檢測各組實驗動物關節(jié)滑膜中IL-6、TNF-α和VEGF的含量,評價臭氧水對兔膝骨性關節(jié)炎的影響,對其作用機制進行探討。目的觀察臭氧水對兔膝關節(jié)軟骨和滑膜的作用,及對滑膜中IL-6、TNF-α和VEGF的影響,分析臭氧水治療膝骨性關節(jié)炎的相關機制。方法1.動物模型建立與干預新西蘭兔32只,雌雄各半,采用隨機數(shù)字表法分為4組,A組:空白對照組,B組:模型對照組,C組:臭氧水對照組,D組:臭氧水治療組,每組8只。A組不予任何處理;B組僅造兔骨關節(jié)炎模型;C組僅關節(jié)腔注射20μg/ml臭氧水2ml,每周1次,共3次;D組造模成功后,臭氧水注射方法同C組。2.軟骨和滑膜標本HE染色觀察軟骨和滑膜標本制作成病理切片,分別在光鏡下觀察軟骨組織學形態(tài)以及滑膜組織有無細胞增生及組織變性、結構是否完整、是否有炎性細胞浸入、有無細胞壞死。3.ELISA法檢測兔膝關節(jié)滑膜中IL-6、TNF-α及VEGF在不同分組中表達含量有無差異。4.統(tǒng)計學處理相關實驗數(shù)據(jù)采用SPSS 17.0統(tǒng)計學軟件處理,檢驗水準α=0.05,P≤0.05表示差異有統(tǒng)計學意義。結果1.膝關節(jié)活動度觀察B、D組造模后關節(jié)活動度均小于A組(P0.05);B組處死時與造模后比較差異無統(tǒng)計學意義(P0.05);D組處死時較B組處死時關節(jié)活動度大(P0.05);D組處死時較造模后關節(jié)活動度增大(P0.05)。2.膝關節(jié)滑膜厚度觀察與A組相比,B、D組滑膜明顯更厚(P0.05);C組與A組差別無統(tǒng)計學意義;D組滑膜較B組薄(P0.05)。3.軟骨和滑膜標本HE染色觀察A組軟骨表面完整,四層結構清晰,細胞排列整齊,潮線完整;B組軟骨表面粗糙不規(guī)則,可見明顯裂隙,軟骨層變薄,細胞數(shù)量減少,排列紊亂;C組軟骨各層結構清晰,軟骨細胞排列較整齊,軟骨纖維細胞未見增多;D組軟骨表面不規(guī)則缺損較B組為輕,軟骨細胞數(shù)量減少,散在分布,結構排列尚整齊。A組滑膜組織未見充血水腫,滑膜細胞無增生現(xiàn)象,滑膜組織結構正常;B組滑膜組織失去正常結構,細胞增生明顯,炎性細胞浸潤嚴重,血管增生充血,滑膜厚度較A組顯著增加;C組滑膜無炎癥表現(xiàn);D組滑膜組織炎癥細胞減少,充血水腫減輕,滑膜厚度較B組明顯降低。4.ELISA法檢測結果與A組相比,C組滑膜組織IL-6、TNF-α和VEGF表達增高不明顯(P0.05),B、D兩組滑膜組織IL-6、TNF-α和VEGF表達增高(P0.05);D組較B組滑膜中IL-6、TNF-α、VEGF表達降低(P0.05)。結論1.關節(jié)腔注射20μg/ml臭氧水2ml,能有效抑制兔膝骨性關節(jié)炎的病理損害及滑膜組織中IL-6、TNF-α、VEGF的表達水平,改善膝關節(jié)活動度;2.20μg/ml臭氧水對兔正常膝關節(jié)組織結構及滑膜中IL-6、TNF-α、VEGF的表達無影響,安全性較高。
【學位授予單位】：鄭州大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2016
【分類號】：R684.3

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