本文關(guān)鍵詞：滑膜間充質(zhì)干細胞向透明軟骨分化條件的體外研究

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【摘要】：目的：研究TGF β1、BMP-2、bFGF、IGF、BMP-7、ASA、Dex七種因素在滑膜間充質(zhì)干細胞向透明軟骨分化中起的作用。方法：嚴格按照無菌性操作從兔膝關(guān)節(jié)內(nèi)提取滑膜組織,刮除脂肪、肌肉組織后依靠酶消化法、有限稀釋法獲得滑膜間充質(zhì)干細胞。等到干細胞傳至第三代的時候,誘導(dǎo)其向脂肪細胞、軟骨細胞和骨細胞分化。網(wǎng)上搜索有關(guān)的文獻,了解在滑膜間充質(zhì)干細胞向透明軟骨分化中占據(jù)重要作用的因素。正交實驗中納入TGF β1、BMP-2、bFGF, IGF、BMP-7、AsA、Dex七種因素。通過SPSS22.0統(tǒng)計軟件設(shè)計L8(27)正交實驗及表頭,定義2水平條件。采用流式細胞儀檢測CD151+/CD44+細胞數(shù),免疫組織化學(xué)染色檢測高表達Col Ⅱ的II型膠原細胞與軟骨細胞總數(shù)的比值,該比值視為透明軟骨轉(zhuǎn)化率(N),設(shè)定rate為檢驗指標,rate為CD151+/CD44+細胞數(shù)乘以N所得結(jié)果。對實驗結(jié)果進行驗證采用甲苯胺藍染色法和免疫組化染色法,實驗結(jié)果分析采用直觀觀察法和主體間方差分析法。結(jié)果：提純后的滑膜間充質(zhì)干細胞是一種形態(tài)較為一致的細胞,有的呈星型,有的呈梭型,與成纖維細胞的形態(tài)較為相似。在誘導(dǎo)其向脂肪細胞、骨細胞、軟骨細胞分化后分別進行油紅染色、堿性磷酸酶染色、甲苯胺藍染色,染色結(jié)果均呈現(xiàn)為陽性。正交實驗中直觀觀察可見TGF-β1、作用最強,其次為BMP-7,主體間方差分析顯示TGFβ1、bFGF、IGF、BMP-7、AsA可以顯著影響SMSCs向透明軟骨分化,兩種結(jié)果一致。結(jié)論：滑膜間充質(zhì)干細胞能夠成功誘導(dǎo)向各種組織細胞分化,可以作為種子細胞應(yīng)用于透明軟骨的修復(fù)。TGF β1、bFGF、IGF、BMP-7、AsA七種因素在滑膜間充質(zhì)干細胞向透明軟骨分化中發(fā)揮顯著的作用,TGF β1是七種因素中作用最明顯的一種。繼續(xù)對更多誘導(dǎo)滑膜間充質(zhì)干細胞向透明軟骨因素及水平的探索,有助于尋找更為合理、精確的組合用于組織工程修復(fù)軟骨損傷。
【學(xué)位授予單位】：南京大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2016
【分類號】：R684

【參考文獻】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前5條

1 王震;梁大川;白潔玉;康寧;馮軍宇;楊自權(quán);;慢病毒介導(dǎo)的Sox9基因在兔骨髓間充質(zhì)干細胞的過表達促進軟骨損傷修復(fù)[J];中國骨傷;2015年05期

2 張復(fù)文;劉德寶;王剛;任振華;;微骨折技術(shù)聯(lián)合IGF-1修復(fù)兔關(guān)節(jié)軟骨缺損的實驗研究[J];中國修復(fù)重建外科雜志;2014年05期

3 陳松;符培亮;叢銳軍;吳海山;許震宇;;TGF-β_3、BMP-2及地塞米松誘導(dǎo)兔滑膜MSCs成軟骨分化的研究[J];中國修復(fù)重建外科雜志;2014年01期

4 符培亮;張雷;吳海山;叢銳軍;陳松;丁U喨，

本文編號：1202019