本文關(guān)鍵詞：基于FRET技術(shù)MMP-9生物傳感器的構(gòu)建及鑒定

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【摘要】：為了構(gòu)建包含有增強(qiáng)青色熒光蛋白-MMP-9-黃色熒光蛋白(ECFP-MMP-9-YPet)融合蛋白的真核表達(dá)質(zhì)粒MMP-9生物傳感器,利用原有質(zhì)粒Src biosensor和通用載體p MD-18T,通過(guò)基因工程的方法構(gòu)建ECFP-MMP-9-YPet生物傳感器并進(jìn)行鑒定,轉(zhuǎn)染293T細(xì)胞24 h后觀察轉(zhuǎn)染效率,然后加MMP-3刺激293T細(xì)胞,運(yùn)用熒光共振能量轉(zhuǎn)移(flurorescence resonance energy transfer,FRET)技術(shù)在熒光顯微鏡下觀察MMP-9生物傳感器的熒光共振能量轉(zhuǎn)移現(xiàn)象。PCR和雙酶切鑒定顯示,ECFP-MMP-9-YPet生物傳感器構(gòu)建成功,293T細(xì)胞轉(zhuǎn)染效率約40%。用免疫熒光法檢測(cè)MMP-9生物傳感器融合蛋白在293T細(xì)胞表面膜表達(dá),用MMP-3刺激轉(zhuǎn)染細(xì)胞可以檢測(cè)到FRET現(xiàn)象。結(jié)果表明,基于FRET構(gòu)建的MMP-9生物傳感器可以敏感而準(zhǔn)確地監(jiān)測(cè)活細(xì)胞中MMP-9的表達(dá)情況。
【作者單位】： 石河子大學(xué)醫(yī)學(xué)院第一附屬醫(yī)院骨科;新疆民族與地方病教育部重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室;
【基金】：國(guó)家自然科學(xué)基金(批準(zhǔn)號(hào):81160225,81260453,81360451) 新疆兵團(tuán)醫(yī)藥衛(wèi)生專項(xiàng)資助(批準(zhǔn)號(hào):2013BA020) 兵團(tuán)國(guó)際交流與合作專項(xiàng)(批準(zhǔn)號(hào):2012BC002,2011BC004) 兵團(tuán)科技創(chuàng)新團(tuán)隊(duì)專項(xiàng)基金(批準(zhǔn)號(hào):2014CC002)資助的課題~~
【分類號(hào)】：R684.3;TP212.3
【正文快照】： 骨關(guān)節(jié)炎(osteoarthritis,OA)是最常見的關(guān)節(jié)疾病,其主要特征是關(guān)節(jié)軟骨退化、軟骨下骨反應(yīng)性增生、關(guān)節(jié)功能障礙。OA病變的主要機(jī)制之一是蛋白酶對(duì)軟骨的降解,其中基質(zhì)金屬蛋白酶(matrixmetalloproteinases,MMPs)[1-2]、尿激酶型纖溶酶原激活物(urokinase type plasminogen a

【相似文獻(xiàn)】

中國(guó)期刊全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前10條

1 李培進(jìn) ,張傳本,刁天喜,蔣銘敏,賈啟中;生物傳感器及其在軍事醫(yī)學(xué)中的應(yīng)用[J];人民軍醫(yī);2002年05期

2 林薇薇;生物傳感器在臨床檢驗(yàn)儀器中的應(yīng)用和發(fā)展[J];醫(yī)療設(shè)備信息;2002年10期

3 陳強(qiáng),李靜,殷惠軍,黃加棟,吳寶艷,蔣躍絨,陳可冀;親和型生物傳感器及其在中藥作用機(jī)理研究中的應(yīng)用展望[J];中國(guó)中西醫(yī)結(jié)合雜志;2004年08期

4 施詠軍,楊斌,趙亞麗;生物傳感器的現(xiàn)狀及發(fā)展前景[J];醫(yī)療裝備;2005年11期

5 楊一民;;生物傳感器[J];上海生物醫(yī)學(xué)工程;2006年02期

6 羅宏;劉勁;鄧剛;;生物傳感器在醫(yī)學(xué)中的應(yīng)用現(xiàn)狀和發(fā)展前景[J];醫(yī)療設(shè)備信息;2006年11期

7 劉向陽(yáng);;生物傳感器在醫(yī)療領(lǐng)域的應(yīng)用[J];醫(yī)療保健器具;2008年02期

8 宋衛(wèi)紅;;生物傳感器在體育科學(xué)中的應(yīng)用[J];醫(yī)療保健器具;2008年04期

9 魯然;;生物傳感器在醫(yī)學(xué)領(lǐng)域中的應(yīng)用[J];當(dāng)代醫(yī)學(xué);2009年24期

10 ;人體細(xì)胞生物傳感器分子機(jī)制首次揭開[J];生物醫(yī)學(xué)工程與臨床;2011年04期

中國(guó)重要會(huì)議論文全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前10條

1 崔傳金;吳海云;左月明;;生物傳感器研究進(jìn)展及發(fā)展趨勢(shì)[A];紀(jì)念中國(guó)農(nóng)業(yè)工程學(xué)會(huì)成立30周年暨中國(guó)農(nóng)業(yè)工程學(xué)會(huì)2009年學(xué)術(shù)年會(huì)（CSAE 2009）論文集[C];2009年

2 莫冰;劉曉為;;淺談生物傳感器在幾個(gè)主要領(lǐng)域的應(yīng)用及展望[A];中國(guó)傳感器產(chǎn)業(yè)發(fā)展論壇暨東北MEMS研發(fā)聯(lián)合體研討會(huì)論文集[C];2004年

3 薛瑞;康天放;;基于絲素蛋白固定乙酰膽堿酯酶的有機(jī)磷和氨基甲酸酯類農(nóng)藥生物傳感器的研究[A];第六屆全國(guó)環(huán)境化學(xué)大會(huì)暨環(huán)境科學(xué)儀器與分析儀器展覽會(huì)摘要集[C];2011年

4 李彤;趙純;;用于水體監(jiān)測(cè)的生物傳感器研究進(jìn)展[A];2012中國(guó)環(huán)境科學(xué)學(xué)會(huì)學(xué)術(shù)年會(huì)論文集（第一卷）[C];2012年

5 任湘菱;唐芳瓊;;光電化學(xué)體系構(gòu)建新型葡萄糖生物傳感器[A];中國(guó)感光學(xué)會(huì)影像材料的研究與應(yīng)用學(xué)術(shù)研討會(huì)論文集[C];2009年

6 鄒琴;李劉冬;;生物傳感器在貝毒快速檢測(cè)中的應(yīng)用[A];泛珠三角區(qū)域漁業(yè)經(jīng)濟(jì)合作論壇第三次年會(huì)會(huì)議論文[C];2008年

7 邱筱岷;;生物傳感器及其在臨床醫(yī)學(xué)中的應(yīng)用研究[A];中華醫(yī)學(xué)會(huì)醫(yī)學(xué)工程學(xué)分會(huì)第十次學(xué)術(shù)年會(huì)暨2009中華臨床醫(yī)學(xué)工程及數(shù)字醫(yī)學(xué)大會(huì)論文集[C];2009年

8 馬芬;張成孝;;多標(biāo)記型汞離子電化學(xué)發(fā)光生物傳感器的研究[A];中國(guó)化學(xué)會(huì)第十屆全國(guó)發(fā)光分析學(xué)術(shù)研討會(huì)論文集[C];2011年

9 任湘菱;唐芳瓊;;銀—金納米復(fù)合顆粒增強(qiáng)的葡萄糖生物傳感器[A];第一屆全國(guó)納米技術(shù)與應(yīng)用學(xué)術(shù)會(huì)議論文集[C];2000年

10 黃智偉;黃琛;;光纖DNA生物傳感器研究動(dòng)向[A];中國(guó)電子學(xué)會(huì)第七屆學(xué)術(shù)年會(huì)論文集[C];2001年

中國(guó)重要報(bào)紙全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前10條

1 哈爾濱工業(yè)大學(xué) 莫冰;四大應(yīng)用領(lǐng)域，生物傳感器技術(shù)發(fā)展迅速[N];中國(guó)電子報(bào);2004年

2 張巍巍;美研制出超靈敏生物傳感器[N];科技日?qǐng)?bào);2012年

3 吳瓊;生物傳感器迅速成長(zhǎng)[N];中國(guó)電子報(bào);2000年

4 何屹;新生物傳感器可觀測(cè)細(xì)菌生長(zhǎng)[N];科技日?qǐng)?bào);2011年

5 記者 毛黎;人體細(xì)胞生物傳感器分子機(jī)理首次揭開[N];科技日?qǐng)?bào);2011年

6 記者 何永晉;烏生物傳感器研究碩果累累[N];科技日?qǐng)?bào);2003年

7 白毅 王宇星;我國(guó)生物傳感器研究獲重大進(jìn)展[N];中國(guó)醫(yī)藥報(bào);2006年

8 張佳星;“火眼金睛”窺測(cè)基因調(diào)控[N];科技日?qǐng)?bào);2008年

9 汪明;2009年全球生物傳感器市場(chǎng)有望突破40億美元[N];中國(guó)醫(yī)藥報(bào);2006年

10 鄒爭(zhēng)春;漏聲表面波生物傳感器檢測(cè)系統(tǒng)構(gòu)建成功[N];中國(guó)醫(yī)藥報(bào);2012年

中國(guó)博士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前10條

1 史大川;恒溫型納米—滾環(huán)擴(kuò)增-SPR傳感器快速檢測(cè)病原微生物的研究[D];第三軍醫(yī)大學(xué);2015年

2 劉蓬勃;提高微流芯片生物傳感器檢測(cè)限的研究[D];大連理工大學(xué);2015年

3 唱?jiǎng)P;Ⅰ:LSAW生物傳感器的構(gòu)建及臨床應(yīng)用研究 Ⅱ:兩株罕見致病菌的鑒定[D];第三軍醫(yī)大學(xué);2015年

4 羅鵬;一次性電化學(xué)酒精生物傳感器的研究[D];重慶醫(yī)科大學(xué);2009年

5 衛(wèi)銀銀;新型葡萄糖生物傳感器的構(gòu)筑、機(jī)理及應(yīng)用研究[D];華東師范大學(xué);2011年

6 劉盛平;基于支撐雙分子層膜的智能生物傳感器系統(tǒng)研究[D];重慶大學(xué);2003年

7 曹淑瑞;納米復(fù)合材料固載生物氧化酶構(gòu)建高靈敏電流型酶生物傳感器的研究[D];西南大學(xué);2013年

8 劉詠;幾種化學(xué)/生物傳感器的制備及在分析中的研究應(yīng)用[D];湖南大學(xué);2010年

9 王福昌;無(wú)機(jī)離子化學(xué)傳感器及過(guò)氧化氫生物傳感器研究[D];西南大學(xué);2007年

10 陳時(shí)洪;基于納米材料構(gòu)建過(guò)氧化氫生物傳感器的研究[D];西南大學(xué);2008年

中國(guó)碩士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前10條

1 徐云英;基于免標(biāo)記熒光生物傳感器檢測(cè)蛋白質(zhì)和小分子的研究[D];西南大學(xué);2015年

2 楊彩鳳;水熱法生長(zhǎng)微/納米結(jié)構(gòu)及其電化學(xué)性能研究[D];西南大學(xué);2015年

3 吳小平;基于新型碳納米復(fù)合材料構(gòu)建電致化學(xué)發(fā)光酶生物傳感器的研究[D];西南大學(xué);2015年

4 馬曄;三維石墨烯/納米材料復(fù)合生物傳感器制備及應(yīng)用研究[D];浙江大學(xué);2015年

5 范玲玲;兩種二茂鐵探針的合成及其在QCM生物傳感器組裝與再生研究中的應(yīng)用[D];鄭州大學(xué);2015年

6 段凱月;硫族鉬化物納米復(fù)合材料修飾玻碳電極的制備及其在分析化學(xué)中的應(yīng)用研究[D];蘭州大學(xué);2015年

7 何穎;金屬納米材料和功能化的碳納米材料在生物傳感器中的應(yīng)用研究[D];西南大學(xué);2015年

8 張娟娟;基于納米材料和酶構(gòu)建的膽固醇和伴刀豆球蛋白A的電致化學(xué)發(fā)光生物傳感器的研究[D];西南大學(xué);2015年

9 王昱琳;基于明膠—多孔炭過(guò)氧化氫生物傳感器的制備及其應(yīng)用研究[D];北京化工大學(xué);2015年

10 汪淑婷;基于納米材料和核酸探針的新型熒光生物傳感器[D];湖北中醫(yī)藥大學(xué);2015年

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