本文關(guān)鍵詞：兩型骨骼肌纖維在體外培養(yǎng)過程中的相互轉(zhuǎn)換

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【摘要】：目的:通過在不同糖濃度條件下體外培養(yǎng)快肌纖維和慢肌纖維,觀察其MHC同功型表達(dá)情況,以探討快、慢肌纖維相互轉(zhuǎn)化的現(xiàn)象及其特征。方法:1取兔副半膜肌背側(cè)亞部,(快肌,Ⅱ型肌纖維)和固有半膜肌亞部(慢肌,Ⅰ型肌纖維)通過ATP酶染色法,進(jìn)行肌纖維類型鑒定。2取兔副半膜肌背側(cè)亞部,和固有半膜肌亞部獲取組織和細(xì)胞,按以下分組進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。(1)組織組分別獲取兩個(gè)亞部的肌組織備用。(2)消化組分別從兩個(gè)亞部獲取兩型肌細(xì)胞備用。(3)高糖培養(yǎng)組是將兩型肌細(xì)胞用高糖培養(yǎng)基進(jìn)行培養(yǎng)。(4)低糖培養(yǎng)組是將兩型肌細(xì)胞用低糖培養(yǎng)基進(jìn)行培養(yǎng)。所有培養(yǎng)的兩型肌細(xì)胞分別在1、3、7天取材,并與組織組和消化細(xì)胞組一起檢測MHC同功型的表達(dá)情況。結(jié)果:1)ATP酶染色顯示家兔副半膜肌背側(cè)亞部著色較深,固有半膜肌亞部著色較淺。未見深淺著色相間排列的現(xiàn)象。2)組織組MHC同功型檢測結(jié)果顯示Ⅰ型肌纖維表達(dá)MHCⅠ,Ⅱ型肌纖維表達(dá)MHCⅡa,Ⅱb及Ⅱx。3)消化組MHC同功型檢測結(jié)果顯示Ⅰ型肌纖維表達(dá)MHCⅠ,Ⅱ型肌纖維表達(dá)MHCⅡa,Ⅱb及Ⅱx。4)Ⅰ型細(xì)胞和Ⅱ型細(xì)胞高糖培養(yǎng)組:Ⅰ型細(xì)胞在高糖培養(yǎng)時(shí)第1天以表達(dá)MHCⅠ為主,同時(shí)也表達(dá)少量的MHCⅡa,MHCⅡb,MHCⅡx。第3天時(shí)仍表達(dá)MHCⅠ,但其表達(dá)量較第1天減少,具有顯著性差異,MHCⅡa,MHCⅡb,MHCⅡx表達(dá)量與第1天比較明顯增加,有顯著性差異。第7天時(shí)MHCⅠ表達(dá)量與第3天比較進(jìn)一步減少,具有顯著性差異,MHCⅡa,MHCⅡb,MHCⅡx表達(dá)量與第3天比較無明顯變化。Ⅱ型細(xì)胞在高糖培養(yǎng)時(shí)第1天只表達(dá)MHCⅡa,MHCⅡb,MHCⅡx,不表達(dá)MHCⅠ;第3天和第7天仍只表達(dá)MHCⅡa,MHCⅡb,MHCⅡx,不表達(dá)MHCⅠ與第1天比較無明顯差異。5)Ⅰ型細(xì)胞和Ⅱ型細(xì)胞低糖培養(yǎng)組:Ⅰ型細(xì)胞在低糖培養(yǎng)時(shí)第1天以表達(dá)MHCⅠ為主,同時(shí)也表達(dá)少量的MHCⅡa,MHCⅡb,MHCⅡx。第3天時(shí)仍表達(dá)MHCⅠ,其表達(dá)量與第1天無顯著性差異,同時(shí)MHCⅡa,MHCⅡb,MHCⅡx表達(dá)量增加,與第1天比較有顯著性差異。第7天時(shí)MHCⅠ表達(dá)量與第3天同樣無顯著性差異,MHCⅡa,MHCⅡb,MHCⅡx表達(dá)量與第3天比較無顯著性差異,但與第1天比較仍存在著顯著性差異。Ⅱ型細(xì)胞在低糖培養(yǎng)時(shí)第1天只表達(dá)MHCⅡa,MHCⅡb,MHCⅡx,不表達(dá)MHCⅠ。第3天仍表達(dá)MHCⅡa,MHCⅡb,MHCⅡx,其中Ⅱa和Ⅱb表達(dá)量增加,Ⅱx的表達(dá)量減少,Ⅱb和Ⅱx的表達(dá)量與第1天比較有顯著性差異,同時(shí)開始表達(dá)少量的MHCⅠ。第7天MHCⅡa,MHCⅡb,MHCⅡx的表達(dá)變化與第3天類似但無顯著性差異,MHCⅠ的表達(dá)量與第3天比較有所增加且與第3天存在有顯著性差異。結(jié)論:兩型骨骼肌纖維在體外分離過程中沒有相互轉(zhuǎn)化的現(xiàn)象,但在體外培養(yǎng)過程中無論是在高糖培養(yǎng)還是低糖培養(yǎng)條件下,Ⅰ型細(xì)胞都會(huì)在第1天開始向Ⅱ型細(xì)胞轉(zhuǎn)化,此后MHCⅡa,MHCⅡb,MHCⅡx的表達(dá)量逐漸增加。在低糖培養(yǎng)條件下,Ⅱ型細(xì)胞仍具有其Ⅱ型細(xì)胞細(xì)胞的特性,在第3天時(shí)開始表達(dá)MHCⅠ。
【學(xué)位授予單位】：遵義醫(yī)學(xué)院
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2016
【分類號(hào)】：R68

【參考文獻(xiàn)】

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