本文關鍵詞：兩型骨骼肌纖維在體外培養(yǎng)過程中的相互轉換

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【摘要】：目的:通過在不同糖濃度條件下體外培養(yǎng)快肌纖維和慢肌纖維,觀察其MHC同功型表達情況,以探討快、慢肌纖維相互轉化的現(xiàn)象及其特征。方法:1取兔副半膜肌背側亞部,(快肌,Ⅱ型肌纖維)和固有半膜肌亞部(慢肌,Ⅰ型肌纖維)通過ATP酶染色法,進行肌纖維類型鑒定。2取兔副半膜肌背側亞部,和固有半膜肌亞部獲取組織和細胞,按以下分組進行實驗。(1)組織組分別獲取兩個亞部的肌組織備用。(2)消化組分別從兩個亞部獲取兩型肌細胞備用。(3)高糖培養(yǎng)組是將兩型肌細胞用高糖培養(yǎng)基進行培養(yǎng)。(4)低糖培養(yǎng)組是將兩型肌細胞用低糖培養(yǎng)基進行培養(yǎng)。所有培養(yǎng)的兩型肌細胞分別在1、3、7天取材,并與組織組和消化細胞組一起檢測MHC同功型的表達情況。結果:1)ATP酶染色顯示家兔副半膜肌背側亞部著色較深,固有半膜肌亞部著色較淺。未見深淺著色相間排列的現(xiàn)象。2)組織組MHC同功型檢測結果顯示Ⅰ型肌纖維表達MHCⅠ,Ⅱ型肌纖維表達MHCⅡa,Ⅱb及Ⅱx。3)消化組MHC同功型檢測結果顯示Ⅰ型肌纖維表達MHCⅠ,Ⅱ型肌纖維表達MHCⅡa,Ⅱb及Ⅱx。4)Ⅰ型細胞和Ⅱ型細胞高糖培養(yǎng)組:Ⅰ型細胞在高糖培養(yǎng)時第1天以表達MHCⅠ為主,同時也表達少量的MHCⅡa,MHCⅡb,MHCⅡx。第3天時仍表達MHCⅠ,但其表達量較第1天減少,具有顯著性差異,MHCⅡa,MHCⅡb,MHCⅡx表達量與第1天比較明顯增加,有顯著性差異。第7天時MHCⅠ表達量與第3天比較進一步減少,具有顯著性差異,MHCⅡa,MHCⅡb,MHCⅡx表達量與第3天比較無明顯變化。Ⅱ型細胞在高糖培養(yǎng)時第1天只表達MHCⅡa,MHCⅡb,MHCⅡx,不表達MHCⅠ;第3天和第7天仍只表達MHCⅡa,MHCⅡb,MHCⅡx,不表達MHCⅠ與第1天比較無明顯差異。5)Ⅰ型細胞和Ⅱ型細胞低糖培養(yǎng)組:Ⅰ型細胞在低糖培養(yǎng)時第1天以表達MHCⅠ為主,同時也表達少量的MHCⅡa,MHCⅡb,MHCⅡx。第3天時仍表達MHCⅠ,其表達量與第1天無顯著性差異,同時MHCⅡa,MHCⅡb,MHCⅡx表達量增加,與第1天比較有顯著性差異。第7天時MHCⅠ表達量與第3天同樣無顯著性差異,MHCⅡa,MHCⅡb,MHCⅡx表達量與第3天比較無顯著性差異,但與第1天比較仍存在著顯著性差異。Ⅱ型細胞在低糖培養(yǎng)時第1天只表達MHCⅡa,MHCⅡb,MHCⅡx,不表達MHCⅠ。第3天仍表達MHCⅡa,MHCⅡb,MHCⅡx,其中Ⅱa和Ⅱb表達量增加,Ⅱx的表達量減少,Ⅱb和Ⅱx的表達量與第1天比較有顯著性差異,同時開始表達少量的MHCⅠ。第7天MHCⅡa,MHCⅡb,MHCⅡx的表達變化與第3天類似但無顯著性差異,MHCⅠ的表達量與第3天比較有所增加且與第3天存在有顯著性差異。結論:兩型骨骼肌纖維在體外分離過程中沒有相互轉化的現(xiàn)象,但在體外培養(yǎng)過程中無論是在高糖培養(yǎng)還是低糖培養(yǎng)條件下,Ⅰ型細胞都會在第1天開始向Ⅱ型細胞轉化,此后MHCⅡa,MHCⅡb,MHCⅡx的表達量逐漸增加。在低糖培養(yǎng)條件下,Ⅱ型細胞仍具有其Ⅱ型細胞細胞的特性,在第3天時開始表達MHCⅠ。
【學位授予單位】：遵義醫(yī)學院
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2016
【分類號】：R68

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