本文關(guān)鍵詞：HA／β-TCA復(fù)合材料與同種異體骨體外兔脂肪干細(xì)胞生物相容性的對比實驗

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【摘要】：目的:探討羥基磷灰石/β-磷酸三鈣(hydroxyapatite/tricalcium phosphate,HA/β-TCA)復(fù)合材料與同種異體骨體外兔脂肪干細(xì)胞(rADSCs)生物相容性,為骨組織工程所選擇支架材料提供實驗基礎(chǔ)。方法:取4月齡新西蘭大白兔腹股溝區(qū)脂肪,Ⅰ型膠原酶消化、分離、培養(yǎng)及傳代原細(xì)胞,第2代rADSCs消化后,加入成骨培養(yǎng)液中誘導(dǎo)分化,分別行堿性磷酸酶染色、茜素紅染色以鑒定分化結(jié)果,擴增后分別與HA/β-TCA及同種異體骨復(fù)合培養(yǎng),通過掃描電子顯微鏡、堿性磷酸酶的方法檢測rADSCs在HA/β-TCA及同種異體骨表面的粘附能力、增殖活力,評價rADSCs與HA/β-TCA及同種異體2種材料的生物相容性,并比較分析。結(jié)果:原代細(xì)胞培養(yǎng)1周后將近90%的融合,傳代后平均3天即可達到90%以上的融合。第2代rADSCs分化誘導(dǎo)后細(xì)胞增殖良好,分化誘導(dǎo)15天后行茜紅素染色,細(xì)胞結(jié)節(jié)中央染色為紅色團塊,形成片狀鈣化影;堿性磷酸酶染色可見細(xì)胞漿內(nèi)呈淺棕色至棕褐色顆粒。接種培養(yǎng)后的第3天、第6天、第9天,同種異體骨與復(fù)合材料各時間點的吸光度(OD)值,差異無統(tǒng)計學(xué)意義。rADSCs在2種支架材料培養(yǎng)11天后,電鏡觀察可見有多角形細(xì)胞伸出、突起,粘附于材料上和空隙中,并向四圍伸展生長,鄰近細(xì)胞緊密鏈接,形成拉網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)。細(xì)胞表面分泌很多細(xì)胞外基質(zhì),填充于支架材料的孔隙中。細(xì)胞在兩種支架材料上生長良好,增殖明顯并保持均勻分布。結(jié)論:rADSCs與HA/β-TCA生物相容性不弱于同種異體骨。HA/β-TCA復(fù)合材料為骨組織工程支架提供了良好來源。
【學(xué)位授予單位】：新疆醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2016
【分類號】：R318.08;R687

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本文編號：1160202