本文關(guān)鍵詞：燒傷患者分泌物多重耐藥銅綠假單胞菌耐藥機(jī)制及分子流行病學(xué)研究

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【摘要】：[目的]研究燒傷患者分泌物分離的多重耐藥銅綠假單胞菌對常用抗生素的耐藥性,發(fā)現(xiàn)其多重耐藥的耐藥基因,外膜蛋白的缺失情況。以及分析多重耐藥的銅綠假單胞菌院內(nèi)感染的分子流行特征,對臨床醫(yī)生有效控制耐藥菌株的傳播和指導(dǎo)臨床用藥有重要意義。[方法]收集昆明醫(yī)科大學(xué)第二附屬醫(yī)院燒傷科2014年1月-2015年6月燒傷患者創(chuàng)面分泌物培養(yǎng)分離的多重耐藥銅綠假單胞菌38株,采用VITEK-2 Compact全自動細(xì)菌鑒定分析儀進(jìn)行菌株鑒定,采用最小抑菌濃度(MIC)方法進(jìn)行體外藥敏實驗,PCR方法檢測外膜蛋白OprD基因、β-內(nèi)酰胺酶類基因的金屬酶類基因(IMP、VIM、SPM), AmpC酶基因(ACT-1、CMY-2), A類及D類β-內(nèi)酰胺酶基因(CTX-M-3、SHV、KPC、IMI、GES、OXA-48),并對其進(jìn)行測序分析,PCR擴(kuò)增7個管家基因,測序并確定其多位點序列分型。[結(jié)果]自2015年1月在昆明醫(yī)科大學(xué)第二附屬醫(yī)院燒傷患者分泌物分離了38株多重耐藥銅綠假單胞菌；根據(jù)抗菌藥物敏感性試驗執(zhí)行標(biāo)準(zhǔn)(第二十三版)有關(guān)銅綠假單胞菌MIC標(biāo)準(zhǔn)解釋,我們結(jié)果顯示：38株燒傷創(chuàng)面分泌物分離的多重耐藥銅綠假單胞菌對8種受試抗菌藥物耐藥很嚴(yán)峻,表現(xiàn)為多重耐藥、甚至是泛耐藥。38株菌株對碳青酶烯類藥物亞胺培南和美羅培南中的一種耐藥,美羅培南耐藥率達(dá)89.4%,亞胺培南耐藥率達(dá)86.8%,其他p-內(nèi)酰胺類藥物中,頭孢他啶耐藥率為94.7%,哌拉西林/他唑巴坦為100%耐藥；大部分菌株對氨曲南的體外藥敏實驗結(jié)果表現(xiàn)為耐藥,耐藥率達(dá)94.7%,替加環(huán)素和阿米卡星表現(xiàn)出強(qiáng)大的體外抗菌活性,35株多重耐藥銅綠假單胞菌對阿米卡星表現(xiàn)為敏感,且替加環(huán)素100%敏感。38株銅綠假單胞菌通過PCR擴(kuò)增的方法檢出的基因全部為：AmpC酶基因CMY和p-內(nèi)酰胺酶基因SHV；導(dǎo)致多重耐藥的p-內(nèi)酰胺類、氨基糖苷類以及氟喹諾酮類耐藥基因如：β-內(nèi)酰胺酶類基因：VIM、SPM;質(zhì)粒介導(dǎo)的AmpC酶基因：ACT-1;A類及D類β-內(nèi)酰胺酶基因：CTX-M-3、IMI、GES、 OXA-4、aac(6')-I8均未檢測到；尤其引起耐碳青酶烯類抗生素基因IMP、KPC在國內(nèi)檢出率高的基因在本次實驗中均未檢出；同時檢測到外膜蛋白OprD,說明外膜蛋白得到轉(zhuǎn)錄,陽性產(chǎn)物全部測序,序列結(jié)果呈尖峰,無套峰、無中斷現(xiàn)象、無衰減、彌散等信號峰圖,運(yùn)用BLASTN在線工具比對,得到陽性耐藥基因型為CMY-2、SHV-2α、OprD-2;38株銅綠假單胞菌7個管家基因roE、nuoD、 ppsA、mutL、acsA、trpE、guaA均顯示陽性,用Ⅰ)NAstar軟件進(jìn)行拼接轉(zhuǎn)換后在網(wǎng)站進(jìn)行比對,MLST分型質(zhì)量較高,其中ST292占76.3%,ST244型占15.8%、ST961型占7.9%。[結(jié)論]燒傷患者分泌物標(biāo)本多重耐藥銅綠假單胞菌分離株對碳青霉烯類、喹諾酮類、頭孢菌素、青霉素類等抗菌藥物表現(xiàn)出多重耐藥。并表達(dá)CMY-2、SHV-2α耐藥基因；同時表達(dá)外膜蛋白OprD2基因；此次發(fā)現(xiàn)3個ST型,其中ST292有占76.3%,說明燒傷科多重耐藥銅綠假單胞菌以克隆方式進(jìn)行傳播,分散以ST242、ST961傳播。燒傷病房多重耐藥銅綠假單胞菌引起的感染應(yīng)引起臨床工作者的重視。防治結(jié)合,防止院內(nèi)播散。
【關(guān)鍵詞】：銅綠單胞菌 多重耐藥 耐藥基因 外膜蛋白D 多位點序列分型
【學(xué)位授予單位】：昆明醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2016
【分類號】：R644;R446.5
【目錄】：

• 縮略詞表5-7
• 中文摘要7-9
• 英文摘要9-11
• 前言11-14
• 1. 材料與方法14-20
• 2. 結(jié)果20-26
• 3. 討論26-31
• 4. 結(jié)論31-32
• 參考文獻(xiàn)32-37
• 綜述37-46
• 參考文獻(xiàn)43-46
• 攻讀學(xué)位期間獲得的學(xué)術(shù)成果46-47
• 致謝47

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