本文關鍵詞：燒傷患者分泌物多重耐藥銅綠假單胞菌耐藥機制及分子流行病學研究

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【摘要】：[目的]研究燒傷患者分泌物分離的多重耐藥銅綠假單胞菌對常用抗生素的耐藥性,發(fā)現(xiàn)其多重耐藥的耐藥基因,外膜蛋白的缺失情況。以及分析多重耐藥的銅綠假單胞菌院內感染的分子流行特征,對臨床醫(yī)生有效控制耐藥菌株的傳播和指導臨床用藥有重要意義。[方法]收集昆明醫(yī)科大學第二附屬醫(yī)院燒傷科2014年1月-2015年6月燒傷患者創(chuàng)面分泌物培養(yǎng)分離的多重耐藥銅綠假單胞菌38株,采用VITEK-2 Compact全自動細菌鑒定分析儀進行菌株鑒定,采用最小抑菌濃度(MIC)方法進行體外藥敏實驗,PCR方法檢測外膜蛋白OprD基因、β-內酰胺酶類基因的金屬酶類基因(IMP、VIM、SPM), AmpC酶基因(ACT-1、CMY-2), A類及D類β-內酰胺酶基因(CTX-M-3、SHV、KPC、IMI、GES、OXA-48),并對其進行測序分析,PCR擴增7個管家基因,測序并確定其多位點序列分型。[結果]自2015年1月在昆明醫(yī)科大學第二附屬醫(yī)院燒傷患者分泌物分離了38株多重耐藥銅綠假單胞菌；根據(jù)抗菌藥物敏感性試驗執(zhí)行標準(第二十三版)有關銅綠假單胞菌MIC標準解釋,我們結果顯示：38株燒傷創(chuàng)面分泌物分離的多重耐藥銅綠假單胞菌對8種受試抗菌藥物耐藥很嚴峻,表現(xiàn)為多重耐藥、甚至是泛耐藥。38株菌株對碳青酶烯類藥物亞胺培南和美羅培南中的一種耐藥,美羅培南耐藥率達89.4%,亞胺培南耐藥率達86.8%,其他p-內酰胺類藥物中,頭孢他啶耐藥率為94.7%,哌拉西林/他唑巴坦為100%耐藥；大部分菌株對氨曲南的體外藥敏實驗結果表現(xiàn)為耐藥,耐藥率達94.7%,替加環(huán)素和阿米卡星表現(xiàn)出強大的體外抗菌活性,35株多重耐藥銅綠假單胞菌對阿米卡星表現(xiàn)為敏感,且替加環(huán)素100%敏感。38株銅綠假單胞菌通過PCR擴增的方法檢出的基因全部為：AmpC酶基因CMY和p-內酰胺酶基因SHV；導致多重耐藥的p-內酰胺類、氨基糖苷類以及氟喹諾酮類耐藥基因如：β-內酰胺酶類基因：VIM、SPM;質粒介導的AmpC酶基因：ACT-1;A類及D類β-內酰胺酶基因：CTX-M-3、IMI、GES、 OXA-4、aac(6')-I8均未檢測到；尤其引起耐碳青酶烯類抗生素基因IMP、KPC在國內檢出率高的基因在本次實驗中均未檢出；同時檢測到外膜蛋白OprD,說明外膜蛋白得到轉錄,陽性產物全部測序,序列結果呈尖峰,無套峰、無中斷現(xiàn)象、無衰減、彌散等信號峰圖,運用BLASTN在線工具比對,得到陽性耐藥基因型為CMY-2、SHV-2α、OprD-2;38株銅綠假單胞菌7個管家基因roE、nuoD、 ppsA、mutL、acsA、trpE、guaA均顯示陽性,用Ⅰ)NAstar軟件進行拼接轉換后在網(wǎng)站進行比對,MLST分型質量較高,其中ST292占76.3%,ST244型占15.8%、ST961型占7.9%。[結論]燒傷患者分泌物標本多重耐藥銅綠假單胞菌分離株對碳青霉烯類、喹諾酮類、頭孢菌素、青霉素類等抗菌藥物表現(xiàn)出多重耐藥。并表達CMY-2、SHV-2α耐藥基因；同時表達外膜蛋白OprD2基因；此次發(fā)現(xiàn)3個ST型,其中ST292有占76.3%,說明燒傷科多重耐藥銅綠假單胞菌以克隆方式進行傳播,分散以ST242、ST961傳播。燒傷病房多重耐藥銅綠假單胞菌引起的感染應引起臨床工作者的重視。防治結合,防止院內播散。
【關鍵詞】：銅綠單胞菌 多重耐藥 耐藥基因 外膜蛋白D 多位點序列分型
【學位授予單位】：昆明醫(yī)科大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2016
【分類號】：R644;R446.5
【目錄】：

• 縮略詞表5-7
• 中文摘要7-9
• 英文摘要9-11
• 前言11-14
• 1. 材料與方法14-20
• 2. 結果20-26
• 3. 討論26-31
• 4. 結論31-32
• 參考文獻32-37
• 綜述37-46
• 參考文獻43-46
• 攻讀學位期間獲得的學術成果46-47
• 致謝47

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