本文關(guān)鍵詞：BMSCs靜脈移植治療dMCAO大鼠的療效及早期作用機(jī)制

  更多相關(guān)文章： dMCAO 骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞 靜脈移植 療效 作用機(jī)制

【摘要】：目的：探討同種異體骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞(Bone marrow mesenchymal stem cells, BMSCs)靜脈移植治療大腦中動(dòng)脈遠(yuǎn)端阻塞(Distal middle cerebral artery occlusion, dMCAO)大鼠腦缺血模型的療效及早期作用機(jī)制。方法：90只SPF級(jí)SD雄性大鼠隨機(jī)分為假手術(shù)組、缺血對(duì)照組和BMSCs靜脈移植組,每組30只。采用dMCAO制備大鼠腦梗死模型,造模后1h經(jīng)尾靜脈移植同種異體大鼠BMSCs.移植后48h進(jìn)行TTC染色測(cè)定大鼠腦梗死體積,用ELISA檢測(cè)梗死灶周邊皮層區(qū)IGF-1,bFGF水平,采用免疫組織化學(xué)法染色并計(jì)數(shù)梗死灶周邊皮層區(qū)CD68、Iba-1染色陽(yáng)性的小膠質(zhì)細(xì)胞數(shù)；并分別于第1d、3d、5d和7d通過(guò)圓柱容器試驗(yàn)、爬格試驗(yàn)和平衡木試驗(yàn)對(duì)缺血對(duì)照組和BMSCs靜脈移植大鼠組進(jìn)行行為學(xué)評(píng)價(jià)。用ELISA檢測(cè)2d、4d和7d外周血及梗死灶核心區(qū)炎癥因子(IL-4、IL-6、IL-10、IL-1β和TNF-a)含量。結(jié)果：大鼠腦梗死48h后,BMSCs靜脈移植組的梗死體積較對(duì)照組顯著減小(P0.05)。在腦梗死初期,圓柱容器試驗(yàn)(第1d、3d、5d),爬格試驗(yàn)(第1d、3d)結(jié)果顯示BMSCs靜脈移植組的行為學(xué)較對(duì)照組改善明顯(P0.05),第7d兩組未檢測(cè)出明顯差異,平衡木試驗(yàn)在各時(shí)間點(diǎn)未能檢測(cè)出行為學(xué)差異；梗死灶周邊區(qū)營(yíng)養(yǎng)因子IGF-1, bFGF較對(duì)照組顯著增高(P0.05)；梗死灶周邊皮層區(qū)CD68、Iba-1染色陽(yáng)性的小膠質(zhì)細(xì)胞數(shù)與對(duì)照組比較無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P0.05)；外周血中的炎癥因子含量檢測(cè)結(jié)果示：(1)在BMSCs移植后第2d,移植組的IL-6含量較對(duì)照組顯著升高(P0.05),IL-4和IL-1β有下降趨勢(shì),TNF-a有升高趨勢(shì),但無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異,IL-10較對(duì)照組無(wú)明顯變化。(2)在BMSCs移植后第4d,移植組的IL-6含量較對(duì)照組明顯升高(P0.05), TNF-α和IL-1p含量亦有升高趨勢(shì),但無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異,IL-4和IL-10含量較對(duì)照組無(wú)明顯變化。(3)在BMSCs移植后第7d移植組的IL-1p和TNF-α含量較對(duì)照組顯著降低(P0.05),IL-10含量有升高趨勢(shì),但無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異,IL-4和IL-6含量較對(duì)照組無(wú)明顯變化。腦組織中炎癥因子含量檢測(cè)結(jié)果示：(1)在BMSCs移植后第2d,移植組的IL-6含量較對(duì)照組有降低趨勢(shì),但無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異,移植組的IL-4、IL-10、TNF-a和IL-1p含量較對(duì)照組無(wú)明顯變化。(2)在BMSCs移植后第4d,移植組的IL-10、TNF-α和IL-1β含量都有升高趨勢(shì),但無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異,IL-4和IL-6含量較對(duì)照組無(wú)明顯變化。(3)在BMSCs移植后第7d,移植組的IL-4、IL-6及TNF-a含量雖無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異,但均有下降趨勢(shì),IL-10和IL-1β含量較對(duì)照組無(wú)明顯變化。結(jié)論：BMSCs靜脈移植可減小dMCAO大鼠腦梗死體積,改善其行為學(xué)缺損；BMSCs移植的早期療效可能與IGF-1、bFGF的營(yíng)養(yǎng)作用相關(guān)；在移植后第7d外周血中TNF-a和IL-1p含量明顯下降,可能與BMSCs的抗炎作用相關(guān)。
【關(guān)鍵詞】：dMCAO 骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞 靜脈移植 療效 作用機(jī)制
【學(xué)位授予單位】：揚(yáng)州大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2016
【分類(lèi)號(hào)】：R651.1
【目錄】：

• 中文摘要2-4
• Abstract4-8
• 符號(hào)說(shuō)明8-10
• 前言10-11
• 1 實(shí)驗(yàn)材料11-13
• 1.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物及分組11
• 1.2 主要試劑11-12
• 1.3 主要儀器12-13
• 2 實(shí)驗(yàn)方法13-18
• 實(shí)驗(yàn)一：BMSCs移植治療dMCAO大鼠的療效13-15
• 2.1 大鼠BMSCs的提取、分離、培養(yǎng)和傳代13
• 2.2 大鼠BMSCs的流式鑒定13
• 2.3 dMCAO動(dòng)物模型制備和大鼠BMSCs靜脈移植13-14
• 2.4 大鼠腦梗死體積測(cè)定14
• 2.5 dMCAO大鼠行為學(xué)測(cè)試14-15
• 實(shí)驗(yàn)二：大鼠梗死灶周邊區(qū)IGF-1、bFGF的含量檢測(cè)15-16
• 2.6 梗死灶周邊區(qū)IGF-1、bFGF的含量檢測(cè)15-16
• 實(shí)驗(yàn)三：大鼠梗死灶周邊區(qū)CD68、Iba-1染色陽(yáng)性的小膠質(zhì)細(xì)胞的含量檢測(cè)16
• 2.7 梗死灶周邊區(qū)小膠質(zhì)細(xì)胞CD68、Iba-1免疫熒光染色16
• 2.8 梗死灶周邊區(qū)CD68、Iba-1染色陽(yáng)性的小膠質(zhì)細(xì)胞定量分析16
• 實(shí)驗(yàn)四：大鼠外周血及梗死灶核心區(qū)炎癥因子IL-4、IL-6、IL-10、TNFα和IL-1β的含量檢測(cè)16-18
• 2.9 外周血及梗死灶核心區(qū)炎癥因子的檢測(cè)16-17
• 2.10 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理17-18
• 3 實(shí)驗(yàn)結(jié)果18-31
• 3.1 大鼠BMSCs培養(yǎng)和傳代18
• 3.2 大鼠BMSCs表面標(biāo)志抗原檢測(cè)結(jié)果18-20
• 3.3 大鼠腦梗死體積測(cè)定結(jié)果20
• 3.4 腦梗死大鼠行為學(xué)檢測(cè)結(jié)果20-23
• 3.5 大鼠梗死灶周邊區(qū)IGF-1、bFGF的含量檢測(cè)結(jié)果23-24
• 3.6 大鼠梗死灶周邊區(qū)CD68、Iba-1染色陽(yáng)性的小膠質(zhì)細(xì)胞檢測(cè)結(jié)果24-26
• 3.7 dMCAO大鼠外周血炎癥因子IL-4、IL-6、IL-10、TNF和IL-1β的含量檢測(cè)結(jié)果26-28
• 3.8 dMCAO大鼠梗死灶核心區(qū)炎癥因子IL-4、IL-6、IL-10、TNF和IL-1β的含量檢測(cè)結(jié)果28-31
• 4 討論31-35
• 5 創(chuàng)新點(diǎn)35
• 6 結(jié)論35-36
• 參考文獻(xiàn)36-40
• BMSCs靜脈移植治療大鼠腦梗死的作用機(jī)制研究進(jìn)展40-47
• 1 骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞的概述40-41
• 2 采用靜脈移植治療的優(yōu)勢(shì)41
• 3 骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞主要療效機(jī)制41-43
• 參考文獻(xiàn)43-47
• 致謝47-48
• 攻讀碩士學(xué)位期間發(fā)表論文及科研情況48-49

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本文編號(hào)：1066620