本文關(guān)鍵詞：骨膜去細(xì)胞生物支架的制備和鑒定

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【摘要】：目的制備兔骨膜去細(xì)胞生物支架,為骨缺損、骨不愈的組織工程研究提供天然的生物支架材料。方法取健康新西蘭大白兔,游離雙側(cè)脛骨近端內(nèi)側(cè)骨膜,通過物理凍融(-80℃,24h)、去污劑洗脫(triton-X 100、SDS)和酶消化(DNA酶、RNA酶)獲取骨膜去細(xì)胞生物支架。通過HE染色、DAPI染色、瓊脂糖電泳和基因組DNA定量分析(n=5)測(cè)定細(xì)胞結(jié)構(gòu)及DNA成分殘留;Masson染色和羥脯氨酸測(cè)定法(n=6)定性定量檢測(cè)骨膜細(xì)胞外基質(zhì)的主要成分(膠原)的保留情況;掃描電子顯微鏡下觀察骨膜去細(xì)胞生物支架的表面微結(jié)構(gòu);CCK8法檢測(cè)支架浸提液毒性;皮下包埋實(shí)驗(yàn)(n=4)觀察該支架的免疫排斥反應(yīng)。結(jié)果 HE染色和4’,6-二脒基-2-苯基吲哚(DAPI)染色表明去細(xì)胞支架無殘留細(xì)胞;瓊脂糖電泳未見明顯DNA條帶;DNA定量檢測(cè)顯示組織去細(xì)胞率達(dá)95%以上;Masson染色及羥脯氨酸測(cè)定表明去細(xì)胞支架膠原成分被保留;掃描電子顯微鏡下細(xì)胞外基質(zhì)呈現(xiàn)三維網(wǎng)狀疏松結(jié)構(gòu);不同體積分?jǐn)?shù)的浸提液對(duì)骨膜細(xì)胞的增殖與對(duì)照組(普通培養(yǎng)基)比較無明顯抑制作用(P0.05);異體皮下包埋實(shí)驗(yàn)顯示,該去細(xì)胞支架免疫排斥反應(yīng)不明顯。結(jié)論運(yùn)用物理凍融、去污劑洗脫和酶消化等方法所獲取的骨膜去細(xì)胞生物支架細(xì)胞去除徹底,細(xì)胞外基質(zhì)的結(jié)構(gòu)及主要成分保留完好,生物相容性良好。
【作者單位】： 溫州醫(yī)科大學(xué)附屬第一醫(yī)院骨科;
【關(guān)鍵詞】： 去細(xì)胞 骨膜 膠原 生物相容性 皮下包埋 Masson染色 掃描電子顯微術(shù) 兔
【分類號(hào)】：R687;R318.08
【正文快照】： 骨缺損、骨不愈是臨床上常見的骨科難治性疾病,其治療棘手、預(yù)后不肯定,給患者帶來極大的經(jīng)濟(jì)和心理負(fù)擔(dān)。骨膜具有較強(qiáng)的成骨能力,在骨折愈合修復(fù)方面扮演著重要角色,骨膜也被認(rèn)為是促進(jìn)骨移植材料在移植區(qū)域發(fā)揮修復(fù)作用的始動(dòng)因素[1]。國內(nèi)外也有較多關(guān)于骨膜移植臨床上治

【參考文獻(xiàn)】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前1條

1 張忠信,劉蘭秀;自體骨膜移植促進(jìn)骨折愈合的療效觀察[J];中國骨傷;2005年02期

【共引文獻(xiàn)】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 陳國寶;呂永鋼;張小梅;董單娟;郭盼;楊力;;用于組織工程的去細(xì)胞化基質(zhì)材料研究進(jìn)展[J];功能材料;2013年21期

2 范雪梅;徐惠成;王朝麗;;脫細(xì)胞膀胱基質(zhì)補(bǔ)片的生物相容性研究[J];重慶醫(yī)學(xué);2014年03期

3 許向亮;王恩博;崔念暉;;脫細(xì)胞真皮基質(zhì)對(duì)年輕恒牙牙乳頭干細(xì)胞分化的作用[J];北京大學(xué)學(xué)報(bào)(醫(yī)學(xué)版);2014年01期

4 寇德鵬;王宏;;異種骨去抗原處理方法的研究進(jìn)展[J];中國骨與關(guān)節(jié)損傷雜志;2014年05期

5 方三高;印洪林;袁菊;史玉振;陸珍鳳;肖蔚;于波;季學(xué)滿;周曉軍;;軟骨母細(xì)胞瘤骨膜反應(yīng)的影像學(xué)及臨床病理研究[J];醫(yī)學(xué)研究生學(xué)報(bào);2012年08期

6 殷響;張福民;;復(fù)合皮移植治療燒傷患者的臨床效果觀察[J];大家健康(學(xué)術(shù)版);2014年05期

7 汲婧;劉子源;張晶;李學(xué)民;王薇;;脫細(xì)胞真皮基質(zhì)在角膜中植入性的生物力學(xué)研究[J];力學(xué)學(xué)報(bào);2014年01期

8 王立曼;王妍;段翠密;王海濱;王常勇;;兩種肝臟全器官脫細(xì)胞基質(zhì)制備方法的比較[J];解放軍醫(yī)學(xué)雜志;2014年04期

9 李珍美玉;顧蕓;易晟;;細(xì)胞外基質(zhì)在組織工程中的應(yīng)用[J];交通醫(yī)學(xué);2014年05期

10 邵營寬;嚴(yán)夏霖;饒志恒;黃高建;李嘉威;黃俊杰;梅勁;林刻智;;大鼠胰腺去細(xì)胞天然支架生物相容性的鑒定[J];解剖學(xué)報(bào);2014年04期

中國博士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 李宏;新型表面修飾化聚對(duì)苯二甲酸乙二醇酯（PET）人工韌帶的研制[D];復(fù)旦大學(xué);2012年

2 羅曉;不同來源細(xì)胞外基質(zhì)外科補(bǔ)片的生物學(xué)性質(zhì)研究[D];華中科技大學(xué);2013年

3 王琳;純鈦硬組織植入體表面膜層的仿生構(gòu)建及其生物學(xué)行為研究[D];華南理工大學(xué);2012年

4 王小軍;去細(xì)胞化的肝臟支架在細(xì)胞移植中的應(yīng)用研究[D];第三軍醫(yī)大學(xué);2013年

5 徐曉輝;組織工程人角膜上皮—基質(zhì)復(fù)合物（半角膜）體外重建及其動(dòng)物移植的實(shí)驗(yàn)研究[D];中國海洋大學(xué);2013年

6 王宇清;PFTBA水凝膠促進(jìn)周圍神經(jīng)再生的效能及機(jī)制研究[D];第四軍醫(yī)大學(xué);2013年

7 馬瑞娜;保留軟骨的去細(xì)胞全喉支架的實(shí)驗(yàn)研究[D];第四軍醫(yī)大學(xué);2013年

8 季茹;肝臟脫細(xì)胞生物支架的制備及誘導(dǎo)骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞肝向分化的研究[D];第四軍醫(yī)大學(xué);2013年

9 周逸丹;異種脫細(xì)胞基質(zhì)材料在陰道重建及盆底修復(fù)中的動(dòng)物實(shí)驗(yàn)研究[D];北京協(xié)和醫(yī)學(xué)院;2009年

10 唐成;自體骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞外基質(zhì)（ECM）支架在軟骨組織工程中的應(yīng)用研究[D];南京醫(yī)科大學(xué);2013年

中國碩士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 李長庚;組織工程骨結(jié)合帶血供自體骨移植修復(fù)大段骨缺損的實(shí)驗(yàn)研究[D];泰山醫(yī)學(xué)院;2011年

2 史永安;擴(kuò)髓對(duì)兔長骨髓腔內(nèi)成骨過程影響的實(shí)驗(yàn)研究[D];泰山醫(yī)學(xué)院;2009年

3 朱星;自體PRP對(duì)成骨細(xì)胞Ⅰ型膠原蛋白表達(dá)的影響[D];河北醫(yī)科大學(xué);2013年

4 賴草生;骨泥混以骨膜碎片植入治療兔早期激素性股骨頭壞死的實(shí)驗(yàn)研究[D];廣西醫(yī)科大學(xué);2013年

5 馮超;結(jié)冷膠水凝膠構(gòu)建可注射組織工程軟骨的研究[D];西北大學(xué);2013年

6 張承e，

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