本文關(guān)鍵詞：新型小口徑人工血管的研制

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【摘要】：心血管疾病是目前影響人類(lèi)健康的主要疾病之一,對(duì)于病情較為嚴(yán)重者,常用的治療手段就是血管移植手術(shù)。目前聚合物材料制備的大口徑人工血管已經(jīng)應(yīng)用于臨床,但小口徑人工血管("f5mm)由于血栓、內(nèi)膜增生等問(wèn)題,仍然難以滿(mǎn)足臨床需求。通過(guò)靜電紡絲技術(shù)制備的組織工程支架,具有高孔隙率、高比表面積和內(nèi)部聯(lián)通網(wǎng)絡(luò)空洞,利于細(xì)胞附著和滲透,且能過(guò)材料的選擇來(lái)調(diào)節(jié)支架的力學(xué)性能,因此非常適合小孔徑人工血管的構(gòu)建。本文通過(guò)靜電紡絲技術(shù)制備了具有良好生物相容性的聚己內(nèi)酯(PCL)、明膠(GT)和聚乙烯醇(PVA)混合小口徑人工血管。取得了以下研究成果：1：通過(guò)靜電紡絲技術(shù)成功制備了PCL/GT和PCL/GT:PVA混合纖維支架。掃描電鏡觀(guān)察發(fā)現(xiàn)兩種纖維支架均一穩(wěn)定,沒(méi)有串珠或粘連現(xiàn)象。將纖維支架浸入37℃的PBS中一夜后發(fā)現(xiàn),PCL/GT:PVA支架纖維直徑的改變率較高,這是由于PVA的快速溶解,使得平均直徑變小,由此可知PCL/GT:PVA支架植入體內(nèi)后,可以通過(guò)PVA纖維絲的快速溶解和降解提高人工血管孔隙率。但PVA的加入,支架材料的力學(xué)能變差,但仍略高于大部分天然血管。2：通過(guò)化學(xué)鍵方法將肝素結(jié)合到明膠之上,并通過(guò)傅里葉紅外光譜分析證實(shí)了肝素的成功結(jié)合。通過(guò)血小板粘附實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn),肝素化之后的纖維支架抗凝血能力得到了明顯提高,且證實(shí)了引入適量PVA會(huì)更好的提高材料的抗凝血能力。通過(guò)MTT法,證明了兩種支架具有良好的細(xì)胞相容性,但由于PCL/GT:PVA=3:1支架中PVA的快速溶解,增加了支架的孔隙率,因此具有更好的細(xì)胞相容性。3：通過(guò)將兩種人工血管植入實(shí)驗(yàn)鼠皮下,來(lái)測(cè)試組織相容性的細(xì)胞滲透能力。植入體內(nèi)后,小鼠沒(méi)有炎癥或者其它不良發(fā)應(yīng)發(fā)生,證明兩種人工血管均具有良好的組織相容性。分別在3周和8周的時(shí)候?qū)⑷斯ぱ苋〕?切片后進(jìn)行HE和DAPI染色后發(fā)現(xiàn),在第三周時(shí)兩種支架吸附和滲透的的細(xì)胞數(shù)量幾乎相同,但在第8周的時(shí)候PCL/GT:PVA=3:1人工血管的細(xì)胞滲透深度已經(jīng)達(dá)到300微米,而PCL/GT僅僅滲透了100微米,證明了PVA的引入可以大大提高人工血管的細(xì)胞的滲透能力。
【關(guān)鍵詞】：組織工程 人工血管 靜電紡絲 生物相容性
【學(xué)位授予單位】：湖南大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類(lèi)號(hào)】：R318.11
【目錄】：

• 摘要5-6
• Abstract6-10
• 第1章 緒論10-20
• 1.1 引言10
• 1.2 人工血管的發(fā)展10-12
• 1.2.1 生物組織型人工血管10-11
• 1.2.2 合成型人工血管11
• 1.2.3 生物混合型人工血管11
• 1.2.4 組織工程型人工血管11-12
• 1.3 人工血管制作要求12-13
• 1.4 常用于制作人工血管的材料13-16
• 1.4.1 天然生物材料13-14
• 1.4.2 人工合成材料14-15
• 1.4.3 復(fù)合材料15-16
• 1.5 人工血管制備技術(shù)16-18
• 1.5.1 靜電紡絲的原理與發(fā)展16-17
• 1.5.2 靜電紡絲的影響因素17-18
• 1.6 本論文擬開(kāi)展的工作18-20
• 第2章 小口徑人工血管的制備與性能檢測(cè)20-33
• 2.1 前言20-21
• 2.2 實(shí)驗(yàn)部分21-26
• 2.2.1 實(shí)驗(yàn)原料和儀器21-23
• 2.2.2 靜電紡絲支架的制備23
• 2.2.3 靜電紡絲支架的特征和表面修飾23-24
• 2.2.4 靜電紡絲管狀支架的力學(xué)性能測(cè)試24-25
• 2.2.5 支架的肝素化修飾25-26
• 2.3 結(jié)果和討論26-32
• 2.3.1 靜電紡絲纖維支架的外貌26-28
• 2.3.2 人工血管的力學(xué)性能測(cè)試28-30
• 2.3.3 血管支架肝素化鑒定以及固定量檢測(cè)30-32
• 2.4 本章小結(jié)32-33
• 第3章 靜電紡絲支架體外生物相容性檢測(cè)33-41
• 3.1 前言33-34
• 3.2 實(shí)驗(yàn)部分34-37
• 3.2.1 實(shí)驗(yàn)材料與儀器34-35
• 3.2.2 靜電紡絲支架血液相容性檢測(cè)35-36
• 3.2.3 靜電紡絲支架細(xì)胞相容性檢測(cè)36-37
• 3.3 實(shí)驗(yàn)結(jié)果37-40
• 3.3.1 靜電紡絲支架血小板的粘附37-39
• 3.3.2 靜電紡絲支架的細(xì)胞相容性39-40
• 3.4 本章小結(jié)40-41
• 第4章 靜電紡絲支架體內(nèi)生物相容性檢測(cè)41-48
• 4.1 引言41-42
• 4.2 實(shí)驗(yàn)材料與儀器設(shè)備42
• 4.2.1 實(shí)驗(yàn)材料的準(zhǔn)備42
• 4.2.2 實(shí)驗(yàn)設(shè)備42
• 4.3 實(shí)驗(yàn)方法42-43
• 4.3.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的選取及分組42
• 4.3.2 動(dòng)物實(shí)驗(yàn)操作42-43
• 4.4 實(shí)驗(yàn)結(jié)果檢測(cè)43-45
• 4.4.1 組織樣本的制備43-44
• 4.4.2 H&E染色44-45
• 4.4.3 DAPI染色45
• 4.5 實(shí)驗(yàn)結(jié)果分析45-47
• 4.5.1 H&E染色結(jié)果分析45-47
• 4.5.2 DAPI染色結(jié)果分析47
• 4.6 本章小結(jié)47-48
• 第5章 總結(jié)48-50
• 參考文獻(xiàn)50-58
• 附錄A 攻讀學(xué)位期間所獲得的學(xué)術(shù)成果58-59
• 致謝59

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