本文關(guān)鍵詞：重組人骨形態(tài)發(fā)生蛋白-2的制備及成骨活性表征

  更多相關(guān)文章： 骨修復(fù) 生物醫(yī)學(xué)工程 蛋白質(zhì) 蛋白質(zhì)復(fù)性 骨形態(tài)發(fā)生蛋白- 原核表達(dá)

【摘要】：骨形態(tài)發(fā)生蛋白-2(BMP-2)是重要的骨誘導(dǎo)生長(zhǎng)因子,是提高骨修復(fù)材料活性和臨床骨修復(fù)效果的有效手段和關(guān)鍵物質(zhì)。由于BMP-2在體內(nèi)含量低,依靠從動(dòng)物體內(nèi)提取難以滿足臨床需求。本文研究滿足臨床需求的BMP-2的制備方法,并評(píng)價(jià)其生物活性。采用密碼子優(yōu)化方法,并通過(guò)進(jìn)一步更換其中部分核苷酸編碼,得到優(yōu)化的h BMP-2基因的DNA序列,制備大腸桿菌rh BMP-2菌株,通過(guò)發(fā)酵及工藝優(yōu)化,獲得BMP包涵體,經(jīng)分離純化與復(fù)性,制備出高純度的rh BMP-2。測(cè)定C2C12細(xì)胞的堿性磷酸酶(ALP)活性來(lái)表征單倍體和二倍體BMP-2的成骨活性,發(fā)現(xiàn)二倍體rh BMP-2的成骨活性明顯高于單倍體rh BMP-2,并且隨著BMP-2濃度增加,堿性磷酸酶活性上升。體內(nèi)動(dòng)物異位成骨實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)rh BMP-2肌帶植入小鼠體內(nèi)3周后,取出的異位骨顆粒鮮艷飽滿,骨結(jié)構(gòu)完整;HE切片和Masson三色切片都顯示出良好的異位成骨效果。此方法制備的rh BMP-2具有良好的誘導(dǎo)成骨分化能力,可用于骨組織修復(fù),滿足臨床需要。
【作者單位】： 華東理工大學(xué)教育部醫(yī)用生物材料工程研究中心;
【關(guān)鍵詞】： 骨修復(fù) 生物醫(yī)學(xué)工程 蛋白質(zhì) 蛋白質(zhì)復(fù)性 骨形態(tài)發(fā)生蛋白- 原核表達(dá)
【基金】：國(guó)家重點(diǎn)基礎(chǔ)研究發(fā)展計(jì)劃項(xiàng)目(2012CB933600)~~
【分類號(hào)】：R318.08
【正文快照】： 聯(lián)系人:劉昌勝。第一作者:李貴龍(1988—),男,碩士研究生。Received date:2015-06-04.Corresponding author:Prof.LIU Changsheng,liucs@ecust.edu.cnFoundation item:supported by the National Basic Research Programof China(2012CB933600).引言近年來(lái),因疾病、創(chuàng)傷、人口

【參考文獻(xiàn)】

中國(guó)期刊全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前3條

1 楊春瑜;楊春莉;劉曉飛;赫美;;骨形態(tài)發(fā)生蛋白-2的高效表達(dá)、純化和復(fù)性[J];食品科學(xué);2013年15期

2 孫傳秀;趙文志;何盛為;方旭;米立東;杜廣宇;張路;;重組人骨形態(tài)發(fā)生蛋白2在大腸桿菌中的可溶性表達(dá)和純化[J];中國(guó)組織工程研究與臨床康復(fù);2009年07期

3 孫奮勇,汪炬,孫晉華,戴云,邱垂源,洪岸;重組人骨形成蛋白-2在大腸桿菌中的表達(dá)、純化和復(fù)性(英文)[J];中國(guó)病理生理雜志;2005年08期

【共引文獻(xiàn)】

中國(guó)期刊全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前10條

1 郭雄軍;陳勁春;;重組人DNaseⅠ不同表達(dá)模式的下游工藝研究[J];北京化工大學(xué)學(xué)報(bào)(自然科學(xué)版);2010年01期

2 李賢;汪炬;周長(zhǎng)忍;田金環(huán);陳小佳;趙名艷;;殼寡糖對(duì)UCB-MSC細(xì)胞cyclinD1和RUNX2 mRNA表達(dá)的影響[J];材料科學(xué)與工程學(xué)報(bào);2010年05期

3 邱裕友;湯光宇;;骨髓脂肪在骨質(zhì)代謝中的作用及其相關(guān)機(jī)制[J];國(guó)際醫(yī)學(xué)放射學(xué)雜志;2013年01期

4 陳盛舉;任婉娜;胡彩麗;蒲英;李麗;杜宇;;骨形成蛋白-7在大鼠角膜損傷愈合的表達(dá)及作用[J];國(guó)際眼科雜志;2013年09期

5 鄧連霞;張海萍;楊明英;朱良均;;蠶絲蛋白生物高分子材料的應(yīng)用研究新進(jìn)展[J];蠶桑通報(bào);2014年03期

6 李練兵;張其清;侯志偉;朱一劍;張丹妍;呂靜;趙樂(lè)天;楊智曦;朱明華;馬明福;;復(fù)合人工骨材料對(duì)骨形成影響的實(shí)驗(yàn)研究[J];北京生物醫(yī)學(xué)工程;2014年03期

7 王夢(mèng)漪;屈志國(guó);周亞軍;;即刻種植骨缺損及其修復(fù)的研究進(jìn)展[J];內(nèi)蒙古醫(yī)學(xué)雜志;2014年01期

8 宋亞平;徐世同;楊淑娟;張彩美;黃丞蔚;劉虎;;rhBMP-2、PRF和自體骨分別復(fù)合珊瑚羥基磷灰石成骨效能的比較研究[J];中國(guó)口腔種植學(xué)雜志;2014年04期

9 潘秋輝;楊松海;孫奮勇;;在CHO細(xì)胞中表達(dá)具有高效成骨活性的BMP-2/7異源二聚體[J];生物工程學(xué)報(bào);2008年03期

10 楊春瑜;楊明;楊春莉;赫美;曲敏;張帥;徐偉;陳鳳蓮;王萍;;骨形態(tài)發(fā)生蛋白-2分離純化技術(shù)研究進(jìn)展[J];食品工業(yè)科技;2009年12期

中國(guó)重要會(huì)議論文全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前1條

1 鄧連霞;張海萍;楊明英;朱良均;;蠶絲蛋白生物高分子材料的應(yīng)用研究新進(jìn)展[A];全國(guó)家(柞)蠶資源高值化利用學(xué)術(shù)研討會(huì)論文集[C];2013年

中國(guó)博士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前7條

1 解芳;構(gòu)建同種異體組織工程骨及修復(fù)犬顱骨臨界骨缺損的實(shí)驗(yàn)研究[D];北京協(xié)和醫(yī)學(xué)院;2013年

2 郭旺明;重組大腸桿菌工業(yè)生產(chǎn)三種蛋白藥物過(guò)程中的關(guān)鍵技術(shù)[D];浙江大學(xué);2012年

3 徐宏兵;老年腰椎管狹窄癥手術(shù)治療的臨床研究[D];華中科技大學(xué);2013年

4 張迪;RGD短肽修飾殼聚糖作為鈦表面hBMP-2cDNA基因載體表達(dá)效率的研究[D];南方醫(yī)科大學(xué);2014年

5 何軍;生殖支原體GlpK和GlpO定位及酶活性與細(xì)胞毒性研究[D];中南大學(xué);2014年

6 王瑋;可注射納米纖維微球聯(lián)合BMP-2可控緩釋技術(shù)在牙本質(zhì)再生組織工程中的應(yīng)用研究[D];第四軍醫(yī)大學(xué);2014年

7 朱向情;HAP/β-TCP/CS、KGM/HA骨組織工程支架材料的制備及臨床前期研究[D];昆明理工大學(xué);2014年

中國(guó)碩士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前7條

1 劉孝龍;新型菊酯類農(nóng)藥降解酶的生化鑒定及分子改造研究[D];中山大學(xué);2010年

2 殷仲達(dá);rhBMP-2與bFGF在小鼠異位成骨中的協(xié)同作用實(shí)驗(yàn)研究[D];暨南大學(xué);2013年

3 文志敏;載三組份藥物多孔磷酸鈣骨水泥的研究[D];西南交通大學(xué);2013年

4 陳玉陽(yáng);可注射納米殼聚糖/骨形成蛋白復(fù)合物修復(fù)大鼠頜骨缺損的實(shí)驗(yàn)研究[D];蘭州大學(xué);2014年

5 宋亞平;rhBMP-2、PRF和自體骨分別復(fù)合珊瑚羥基磷灰石修復(fù)骨缺損的實(shí)驗(yàn)研究[D];遵義醫(yī)學(xué)院;2014年

6 金耀;含重組人骨形態(tài)發(fā)生蛋白-2骨修復(fù)材料在頸椎前路減壓植骨融合術(shù)中的應(yīng)用[D];蘇州大學(xué);2013年

7 周亮;硫酸鈣復(fù)合骨形態(tài)發(fā)生蛋白-2功能多肽修復(fù)骨缺損的研究[D];中國(guó)人民解放軍醫(yī)學(xué)院;2014年

【二級(jí)參考文獻(xiàn)】

中國(guó)期刊全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前10條

1 方針強(qiáng);葉鋼;歐陽(yáng)一辛;劉永亮;賈維勝;馮嘉瑜;;人BMP-7基因重組腺病毒的構(gòu)建與鑒定[J];第三軍醫(yī)大學(xué)學(xué)報(bào);2008年02期

2 熊紹虎,余 磊,譚海燕,黃 濤,王朝陽(yáng),劉大庸,鐘世鎮(zhèn);重組人骨形態(tài)發(fā)生蛋白-2在大腸桿菌中的表達(dá)及純化[J];第一軍醫(yī)大學(xué)學(xué)報(bào);2002年05期

3 朱紅裕;李強(qiáng);;外源蛋白在大腸桿菌中的可溶性表達(dá)策略[J];過(guò)程工程學(xué)報(bào);2006年01期

4 鄧少林;權(quán)毅;潘顯明;屈波;;骨形態(tài)發(fā)生蛋白的可溶性表達(dá)、純化及抗體制備[J];四川大學(xué)學(xué)報(bào)(醫(yī)學(xué)版);2008年01期

5 胡志國(guó),郭美錦,儲(chǔ)炬,莊英萍,張嗣良;人白細(xì)胞介素18基因化學(xué)合成及其在大腸桿菌中高表達(dá)[J];中國(guó)生化藥物雜志;2005年01期

6 聶忠清;吳永剛;蒙建洲;;分子伴侶的功能和應(yīng)用[J];生命科學(xué);2006年01期

7 楊春瑜;楊明;楊春莉;赫美;曲敏;張帥;徐偉;陳鳳蓮;王萍;;骨形態(tài)發(fā)生蛋白-2分離純化技術(shù)研究進(jìn)展[J];食品工業(yè)科技;2009年12期

8 潘云娣;楊文鴿;侯溫甫;孫翠玲;;分子伴侶結(jié)構(gòu)與功能的研究進(jìn)展[J];生物學(xué)通報(bào);2006年03期

9 楊春瑜;楊春莉;田曉紅;柏樹令;王淑靜;赫美;佟浩;;改性羥基磷灰石/聚乳酸復(fù)合材料制備及其生物相容性評(píng)價(jià)[J];西安交通大學(xué)學(xué)報(bào);2010年12期

10 孫傳秀;趙文志;何盛為;方旭;米立東;杜廣宇;張路;;重組人骨形態(tài)發(fā)生蛋白2在大腸桿菌中的可溶性表達(dá)和純化[J];中國(guó)組織工程研究與臨床康復(fù);2009年07期

中國(guó)碩士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前1條

1 王馥麗;高濃度rhBMP-2m復(fù)性條件的探討[D];第四軍醫(yī)大學(xué);2008年

【相似文獻(xiàn)】

中國(guó)期刊全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前10條

1 莫蘭加;郝小亞;;骨形態(tài)發(fā)生蛋白12對(duì)肌腱和韌帶損傷的修復(fù)作用[J];中國(guó)臨床康復(fù);2006年25期

2 詹玉蕊;李麗;田蔓男;;骨形態(tài)發(fā)生蛋白及其在眼科方面的研究[J];蘭州大學(xué)學(xué)報(bào)(醫(yī)學(xué)版);2006年04期

3 岳鵬舉;趙建寧;;骨形態(tài)發(fā)生蛋白-2促進(jìn)骨缺損修復(fù)的研究進(jìn)展[J];醫(yī)學(xué)研究生學(xué)報(bào);2007年12期

4 顧羊林;楊開舜;;骨形態(tài)發(fā)生蛋白研究新進(jìn)展[J];臨床外科雜志;2008年10期

5 陳聰;孟勇;劉貴峰;齊強(qiáng);;重組人骨形態(tài)發(fā)生蛋白-7的研究與應(yīng)用[J];重慶醫(yī)學(xué);2012年28期

6 王，

本文編號(hào)：797435