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組織工程骨膜的構(gòu)建及其同種異體體內(nèi)成骨修復(fù)兔肩胛骨缺損的實(shí)驗(yàn)研究

發(fā)布時(shí)間:2017-09-03 14:27

  本文關(guān)鍵詞:組織工程骨膜的構(gòu)建及其同種異體體內(nèi)成骨修復(fù)兔肩胛骨缺損的實(shí)驗(yàn)研究


  更多相關(guān)文章: 骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞 豬小腸黏膜下層 組織工程骨膜 肩胛骨缺損


【摘要】:目的:兔骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞(BMSCs)作為組織工程種子細(xì)胞復(fù)合自制豬小腸粘膜下層(SIS)聯(lián)合培養(yǎng),體外構(gòu)建組織工程化骨膜(TEP),觀察其生物學(xué)特性并檢測(cè)成骨活性,進(jìn)一步植入異體兔體內(nèi)對(duì)肩胛骨缺損進(jìn)行修復(fù),探討人工骨膜修復(fù)大塊不規(guī)則骨缺損的可行性。 方法:以豬小腸粘膜下層(SIS)基質(zhì)作為支架材料,與體外成骨誘導(dǎo)培養(yǎng)后的第三代兔骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞(BMSCs),采用沉淀法復(fù)合構(gòu)建組織工程化骨膜,MTT法和掃描電鏡檢測(cè)種子細(xì)胞在支架材料的生長(zhǎng)、黏附情況,體外檢測(cè)堿性磷酸酶與骨鈣素表達(dá),并取6月齡新西蘭大白兔24只制備單側(cè)肩胛骨3cm×3cm次全切骨缺損模型,隨機(jī)分為實(shí)驗(yàn)組和對(duì)照組(n=12),分別于缺損處植入組織工程骨膜和單純SIS。術(shù)后觀察動(dòng)物大體情況;4、8、12周時(shí)處死動(dòng)物后行X線片觀察并按Lane-Sandhu X線片評(píng)分標(biāo)準(zhǔn)評(píng)分;行標(biāo)本大體觀察后,行HE及Masson染色觀察。 結(jié)果:種子細(xì)胞在SIS上生長(zhǎng)良好,組織工程骨膜在含有成骨誘導(dǎo)劑的培養(yǎng)基中培養(yǎng)可分泌一定量骨鈣素(11d達(dá)峰值),并表達(dá)堿性磷酸酶活性(7d達(dá)峰值),植入體內(nèi)后各時(shí)間段,X線片觀察示實(shí)驗(yàn)組骨缺損區(qū)有片狀新生骨形成,密度與正常骨相同,隨著時(shí)間的增加,新生骨數(shù)量也不斷增多;對(duì)照組骨缺損區(qū)無(wú)骨形成征象,骨缺損區(qū)密度與周?chē)浗M織影相近。至12周標(biāo)本大體觀察示實(shí)驗(yàn)組兩端橋接部已形成骨性愈合,部分骨缺損區(qū)已被新生骨填充;對(duì)照組無(wú)骨組織生成。HE及Masson染色示實(shí)驗(yàn)組骨缺損處有新骨生成,骨組織中可見(jiàn)血管腔及髓腔樣結(jié)構(gòu),未見(jiàn)明顯巨噬細(xì)胞及淋巴細(xì)胞浸潤(rùn);對(duì)照組骨缺損區(qū)僅為膠原瘢痕組織和纖維樣結(jié)構(gòu),無(wú)骨組織生成。 結(jié)論:組織工程化骨膜能夠在體外保持較穩(wěn)定的生物活性,分泌一定量的堿性磷酸酶和骨鈣素,植入實(shí)驗(yàn)動(dòng)物體內(nèi)后在同種異體體內(nèi)可以成骨,具有修復(fù)大塊不規(guī)則骨缺損的可行性。
【關(guān)鍵詞】:骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞 豬小腸黏膜下層 組織工程骨膜 肩胛骨缺損
【學(xué)位授予單位】:蘭州大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2014
【分類(lèi)號(hào)】:R318.08;R681
【目錄】:
  • 中文摘要4-5
  • Abstract5-7
  • 目錄7-8
  • 前言8-11
  • 第一章 組織工程化骨膜的構(gòu)建11-20
  • 1. 材料和方法11-14
  • 2. 結(jié)果14-18
  • 3. 討論18-19
  • 4. 結(jié)論19-20
  • 第二章 組織工程化骨膜體外成骨活性檢測(cè)20-28
  • 1. 材料和方法20-23
  • 2. 結(jié)果23-26
  • 3. 討論26-27
  • 4. 結(jié)論27-28
  • 第三章 組織工程骨膜修復(fù)肩胛骨骨缺損的實(shí)驗(yàn)研究28-39
  • 1. 材料與方法28-31
  • 2. 結(jié)果31-36
  • 3. 討論36-38
  • 4. 結(jié)論38-39
  • 參考文獻(xiàn)39-43
  • 在學(xué)期間的研究成果43-44
  • 致謝44

【參考文獻(xiàn)】

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本文編號(hào):785550

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