本文關鍵詞：Ⅰ型膠原蛋白海綿的輻照交聯(lián)及其組織相容性評價

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【摘要】：目前,在臨床方面的廣泛應用顯示了Ⅰ型膠原蛋白海綿的重要性,各類嚴重的燒、燙傷給人們的日常生活帶來了極大的影響。然而在進行手術修復的過程后,由于真皮組織移植手術方面的限制以及其對人們術后正常生活的影響,發(fā)展Ⅰ型膠原蛋白人工真皮的必要性就有了很大的意義。本文中所涉及到使用輻照交聯(lián)法制備Ⅰ型膠原蛋白海綿,摒棄了常規(guī)利用小分子交聯(lián)劑的化學法帶來的生物安全性以及水資源浪費的問題,探究了利用高效清潔的輻照交聯(lián)方法對材料后期微觀結構的改變,并通過動物實驗,對比臨床應用的樣品,探討Co-60輻照交聯(lián)制備Ⅰ型膠原蛋白海綿的組織相容性。1.利用酶解法,對市售新鮮的牛跟腱進行Ⅰ型膠原蛋白的提取,研究胃蛋白酶用量、底物濃度等對提取效率的影響,在控制提取溫度、溶液的pH等條件下,得到最佳的提取條件,并對所提取的原料進行分子量、紅外光譜、紫外吸收光譜等檢測,以證明其為Ⅰ型膠原蛋白。2.利用輻照交聯(lián)的方法制備Ⅰ型膠原蛋白海綿,通過控制Ⅰ型膠原蛋白固含量以及輻照的劑量與劑量率,得到輻照處理過后的Ⅰ型膠原蛋白凝膠,再進行冷凍干燥處理,最終得到Ⅰ型膠原蛋白海綿,并進行材料的孔徑分布以及熱穩(wěn)定性等檢測,確定適合用于臨床實際應用的Ⅰ型膠原蛋白海綿及其制備工藝。3.通過進行動物實驗(新西蘭兔體內(nèi)植入Ⅰ型膠原蛋白海綿,評價Ⅰ型膠原蛋白海綿的組織相容性),通過HE染色、Masson染色、墨汁灌注等實驗判定材料的組織相容性良好,Evans Blue灌注實驗證明了材料可以被血管化,之間關系相互印證,相互支持,對材料的組織生物相容性進行了很好的判定,驗證了輻照交聯(lián)的材料可以在體內(nèi)進行降解。
【關鍵詞】：Ⅰ型膠原蛋白海綿 人工真皮 輻照交聯(lián) 組織相容性評價
【學位授予單位】：北京化工大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2016
【分類號】：R318.08
【目錄】：

• 摘要4-6
• Abstract6-14
• 第一章 緒論14-26
• 1.1 研究意義與背景14-15
• 1.2 膠原蛋白基本信息簡介15-16
• 1.3 膠原蛋白的應用16-19
• 1.3.1 膠原蛋白在化妝品行業(yè)的應用17
• 1.3.2 膠原蛋白在食品中的應用17-18
• 1.3.3 膠原蛋白在生物醫(yī)用材料領域的應用18-19
• 1.4 膠原蛋白的提取方法19-21
• 1.4.1 利用酸法進行膠原蛋白的提取20
• 1.4.2 利用堿法進行膠原蛋白的提取20
• 1.4.3 利用酶法進行膠原蛋白的提取20-21
• 1.5 膠原蛋白海綿的制備工藝21-22
• 1.5.1 Ⅰ型膠原蛋白海綿生產(chǎn)現(xiàn)狀21
• 1.5.2 Ⅰ型膠原蛋白海綿交聯(lián)方式探索方面進展21-22
• 1.5.2.1 利用EDC-NHS方法進行Ⅰ型膠原蛋白海綿交聯(lián)21-22
• 1.5.2.2 利用Genipin作為交聯(lián)劑制備Ⅰ型膠原蛋白海綿22
• 1.6 發(fā)展Ⅰ型膠原蛋白海綿的必要性22
• 1.7 本論文所取得的成果22-26
• 第二章 Ⅰ型膠原蛋白的提取與表征26-40
• 2.1 引言26
• 2.2 實驗材料26-28
• 2.2.1 原材料的準備與處理26-27
• 2.2.2 實驗儀器與試劑27-28
• 2.3 Ⅰ型膠原蛋白的提取28-33
• 2.3.1 牛跟腱處理方式對原材料利用效率的影響28-30
• 2.3.2 底物濃度對膠原蛋白提取量的影響30-32
• 2.3.3 胃蛋白酶用量對膠原蛋白提取的影響32-33
• 2.4 1型膠原蛋白的表征與分析33-37
• 2.4.1 利用SDS-Page電泳測定膠原蛋白分子量34
• 2.4.2 紫外吸收光譜法確定膠原蛋白34
• 2.4.3 FT-IR紅外譜圖確定膠原蛋白分子三螺旋結構34-35
• 2.4.4 Ⅰ型膠原蛋白原料的熱變性溫度35-36
• 2.4.5 Ⅰ型膠原蛋白原料的微觀結構觀察(SEM)36-37
• 2.5 小結37-40
• 第三章 輻照法制備Ⅰ型膠原蛋白海綿及其表征40-66
• 3.1 引言40-41
• 3.1.1 Ⅰ型膠原蛋白原料處理40-41
• 3.1.2 實驗儀器與器材41
• 3.2 不同固含量原料進行輻照交聯(lián)法制備Ⅰ型膠原蛋白凝膠41-56
• 3.2.1 0.5%固含量原料的輻照交聯(lián)43-48
• 3.2.2 1%固含量原料對輻照交聯(lián)的影響48-54
• 3.2.3 2%固含量原料的輻照交聯(lián)54-56
• 3.3 Ⅰ型膠原蛋白海綿的制備與表征56-63
• 3.3.1 Ⅰ型膠原蛋白海綿的制備56-57
• 3.3.2 Ⅰ型膠原蛋白海綿的微觀結構57-61
• 3.3.2.1 冷凍干燥法制備Ⅰ型膠原蛋白海綿57-59
• 3.3.2.2 輻照法制備Ⅰ型膠原蛋白海綿59-61
• 3.3.3 Ⅰ型膠原蛋白海綿的灰分含量測定61
• 3.3.4 Ⅰ型膠原蛋白海綿熱穩(wěn)定性的檢測61-62
• 3.3.5 Ⅰ型膠原蛋白海綿細胞毒性測試62-63
• 3.3.6 Ⅰ型膠原蛋白海綿耐體外酶降解測試63
• 3.4 小結63-66
• 第四章 Ⅰ型膠原蛋白海綿組織相容性評價66-82
• 4.1 引言66
• 4.2 Ⅰ型膠原蛋白海綿組織相容性實驗66-79
• 4.2.1 實驗樣品與器材66
• 4.2.2 實驗樣品的處理方法66-68
• 4.2.3 組織生物相容性實驗分析68-79
• 4.2.3.1 Ⅰ型膠原蛋白海綿材料體內(nèi)降解68
• 4.2.3.2 H&E染色結果68-72
• 4.2.3.3 Masson染色結果72-75
• 4.2.3.4 Evens Blue灌注實驗75-78
• 4.2.3.5 墨汁灌注染色78-79
• 4.3 小結79-82
• 第五章 結論與展望82-84
• 參考文獻84-88
• 致謝88-90
• 導師簡介90-92
• 作者簡介92-93
• 北京化工大學碩士研究生學位論文答辯委員會決議書93-94

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本文編號：592390