深低溫停循環(huán)對(duì)大鼠海馬線粒體通透性轉(zhuǎn)化孔骨架蛋白的影響
發(fā)布時(shí)間:2017-06-29 09:22
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【摘要】:[目的]研究深低溫停循環(huán)對(duì)大鼠海馬線粒體通透性轉(zhuǎn)化孔(mPTP,Mitochondrial permeablity transition pore)的影響和低溫通過抑制線粒體介導(dǎo)的細(xì)胞凋亡途徑起到腦保護(hù)性的作用機(jī)制。[方法]方法35只大鼠經(jīng)隨機(jī)分三組(其中5只為預(yù)灌注血液供體)后采體外插管法建立大鼠閉胸式體外循環(huán)模型,三組動(dòng)物分別經(jīng)深低溫停循(DHCA,Deep Hypothermic Circulatory Arrest), n=10,腦濁20℃-24℃,停循環(huán) 10分鐘;常溫停循環(huán)(NTCA, Normal Temperature Circulatory Arrest), n=10,腦溫36℃~37℃,停循環(huán)10分鐘;常溫不停循環(huán)(NC, Normal Control)n=10,腦溫36℃~37℃。經(jīng)循環(huán)后快速斷頭取海馬,液氮保存。提取海馬組織線粒體的蛋白質(zhì)和RNA做通透性轉(zhuǎn)化孔相關(guān)蛋白的蛋白質(zhì)表達(dá)水平和基因表達(dá)水平檢測(cè)。實(shí)驗(yàn)所得數(shù)據(jù)用均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差(x±s)表示,采用完全隨機(jī)設(shè)計(jì)的單因素方差分析,多樣本均數(shù)間的比較采用q檢驗(yàn),以P0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義,當(dāng)P0.05,要了解那些組有差異要做兩樣本之間的t檢驗(yàn),P0.05差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。[結(jié)果]線粒體通透性轉(zhuǎn)化孔的骨架蛋白VDAC (voltage-dependent anion channel)三種亞(VDAC1*、VDAC2、VDAC3、ANT(Adenine nucleotide transporter、CYPD(Cyclophilin D)在深低溫停循環(huán)組和常溫停循環(huán)組中的表達(dá)量較空白對(duì)照組均升高,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05);在深低溫停循環(huán)組中的表達(dá)量較常溫停循環(huán)組的表達(dá)量低,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。[結(jié)論]缺血缺氧可誘導(dǎo)大鼠海馬組織的線粒體通透性轉(zhuǎn)化孔的骨架蛋白的表達(dá)量增加和通道的開放進(jìn)而引起神經(jīng)元細(xì)胞的凋亡,而深低溫在相同的缺血缺氧時(shí)間條件下可以減少骨架蛋白量的表達(dá),并抑制通道的開放,從而抑制神經(jīng)元細(xì)胞的凋亡而達(dá)到腦保護(hù)的作用。
【關(guān)鍵詞】:閉胸式體外循環(huán)深低溫停循環(huán)電壓依賴性陰離子通道腺嘌呤核苷酸轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白親環(huán)蛋白D線粒體凋停亡線粒體通透性轉(zhuǎn)化孔
【學(xué)位授予單位】:昆明醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2015
【分類號(hào)】:R318.52
【目錄】:
- 中英文縮寫詞表5-6
- 中文摘要6-8
- 英文摘要8-10
- 前言10-15
- 參考文獻(xiàn)12-15
- 第一部分 建立大鼠閉胸式體外循環(huán)模型及驗(yàn)證15-26
- 一. 主要試劑15
- 二. 主要器材和設(shè)備15-16
- 三. 實(shí)驗(yàn)分組16
- 四. 建立模型16-19
- 五. 結(jié)果19-23
- 六. 討論23-25
- 七. 結(jié)論25-26
- 第二部分 海馬組織線粒體提取和膜電位檢測(cè)26-32
- 一. 主要設(shè)備及試劑26
- 二. 提取線粒體及驗(yàn)證26-27
- 三. 純化線粒體膜電位檢測(cè)27-28
- 四. 結(jié)果28-31
- 五. 結(jié)論31-32
- 第三部分 海馬線粒體通透性轉(zhuǎn)化骨架蛋白的基因和蛋白質(zhì)表達(dá)水平檢測(cè)32-45
- 一. 設(shè)備及試劑32
- 二. 主要試劑32-33
- 三. 海馬組織RNA提取及RT-PCR33-36
- 四. 蛋白質(zhì)檢測(cè)western-blotting36-40
- 五. 實(shí)驗(yàn)結(jié)果及分析40-44
- 六. 實(shí)驗(yàn)結(jié)果總結(jié)44-45
- 討論45-51
- 結(jié)論51-52
- 參考文獻(xiàn)52-56
- 綜述56-63
- 參考文獻(xiàn)60-63
- 攻讀學(xué)位期間發(fā)表論文63-64
- 致謝64
【參考文獻(xiàn)】
中國碩士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫 前1條
1 郭虹霞;親環(huán)素Cyclophilin D(CypD)選擇性小分子抑制劑篩選以及小分子對(duì)依賴Ca2+的線粒體形態(tài)功能的影響[D];中國科學(xué)院研究生院(上海生命科學(xué)研究院);2005年
本文關(guān)鍵詞:深低溫停循環(huán)對(duì)大鼠海馬線粒體通透性轉(zhuǎn)化孔骨架蛋白的影響,由筆耕文化傳播整理發(fā)布。
,本文編號(hào):497385
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