深低溫停循環(huán)對大鼠海馬線粒體通透性轉(zhuǎn)化孔骨架蛋白的影響
發(fā)布時間:2017-06-29 09:22
本文關鍵詞:深低溫停循環(huán)對大鼠海馬線粒體通透性轉(zhuǎn)化孔骨架蛋白的影響,由筆耕文化傳播整理發(fā)布。
【摘要】:[目的]研究深低溫停循環(huán)對大鼠海馬線粒體通透性轉(zhuǎn)化孔(mPTP,Mitochondrial permeablity transition pore)的影響和低溫通過抑制線粒體介導的細胞凋亡途徑起到腦保護性的作用機制。[方法]方法35只大鼠經(jīng)隨機分三組(其中5只為預灌注血液供體)后采體外插管法建立大鼠閉胸式體外循環(huán)模型,三組動物分別經(jīng)深低溫停循(DHCA,Deep Hypothermic Circulatory Arrest), n=10,腦濁20℃-24℃,停循環(huán) 10分鐘;常溫停循環(huán)(NTCA, Normal Temperature Circulatory Arrest), n=10,腦溫36℃~37℃,停循環(huán)10分鐘;常溫不停循環(huán)(NC, Normal Control)n=10,腦溫36℃~37℃。經(jīng)循環(huán)后快速斷頭取海馬,液氮保存。提取海馬組織線粒體的蛋白質(zhì)和RNA做通透性轉(zhuǎn)化孔相關蛋白的蛋白質(zhì)表達水平和基因表達水平檢測。實驗所得數(shù)據(jù)用均數(shù)±標準差(x±s)表示,采用完全隨機設計的單因素方差分析,多樣本均數(shù)間的比較采用q檢驗,以P0.05為差異有統(tǒng)計學意義,當P0.05,要了解那些組有差異要做兩樣本之間的t檢驗,P0.05差異有統(tǒng)計學意義。[結(jié)果]線粒體通透性轉(zhuǎn)化孔的骨架蛋白VDAC (voltage-dependent anion channel)三種亞(VDAC1*、VDAC2、VDAC3、ANT(Adenine nucleotide transporter、CYPD(Cyclophilin D)在深低溫停循環(huán)組和常溫停循環(huán)組中的表達量較空白對照組均升高,差異有統(tǒng)計學意義(P0.05);在深低溫停循環(huán)組中的表達量較常溫停循環(huán)組的表達量低,差異有統(tǒng)計學意義(P0.05)。[結(jié)論]缺血缺氧可誘導大鼠海馬組織的線粒體通透性轉(zhuǎn)化孔的骨架蛋白的表達量增加和通道的開放進而引起神經(jīng)元細胞的凋亡,而深低溫在相同的缺血缺氧時間條件下可以減少骨架蛋白量的表達,并抑制通道的開放,從而抑制神經(jīng)元細胞的凋亡而達到腦保護的作用。
【關鍵詞】:閉胸式體外循環(huán)深低溫停循環(huán)電壓依賴性陰離子通道腺嘌呤核苷酸轉(zhuǎn)運蛋白親環(huán)蛋白D線粒體凋停亡線粒體通透性轉(zhuǎn)化孔
【學位授予單位】:昆明醫(yī)科大學
【學位級別】:碩士
【學位授予年份】:2015
【分類號】:R318.52
【目錄】:
- 中英文縮寫詞表5-6
- 中文摘要6-8
- 英文摘要8-10
- 前言10-15
- 參考文獻12-15
- 第一部分 建立大鼠閉胸式體外循環(huán)模型及驗證15-26
- 一. 主要試劑15
- 二. 主要器材和設備15-16
- 三. 實驗分組16
- 四. 建立模型16-19
- 五. 結(jié)果19-23
- 六. 討論23-25
- 七. 結(jié)論25-26
- 第二部分 海馬組織線粒體提取和膜電位檢測26-32
- 一. 主要設備及試劑26
- 二. 提取線粒體及驗證26-27
- 三. 純化線粒體膜電位檢測27-28
- 四. 結(jié)果28-31
- 五. 結(jié)論31-32
- 第三部分 海馬線粒體通透性轉(zhuǎn)化骨架蛋白的基因和蛋白質(zhì)表達水平檢測32-45
- 一. 設備及試劑32
- 二. 主要試劑32-33
- 三. 海馬組織RNA提取及RT-PCR33-36
- 四. 蛋白質(zhì)檢測western-blotting36-40
- 五. 實驗結(jié)果及分析40-44
- 六. 實驗結(jié)果總結(jié)44-45
- 討論45-51
- 結(jié)論51-52
- 參考文獻52-56
- 綜述56-63
- 參考文獻60-63
- 攻讀學位期間發(fā)表論文63-64
- 致謝64
【參考文獻】
中國碩士學位論文全文數(shù)據(jù)庫 前1條
1 郭虹霞;親環(huán)素Cyclophilin D(CypD)選擇性小分子抑制劑篩選以及小分子對依賴Ca2+的線粒體形態(tài)功能的影響[D];中國科學院研究生院(上海生命科學研究院);2005年
本文關鍵詞:深低溫停循環(huán)對大鼠海馬線粒體通透性轉(zhuǎn)化孔骨架蛋白的影響,由筆耕文化傳播整理發(fā)布。
,本文編號:497385
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