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Sema7A干預鈦微粒誘導鼠MC3T3-E1成骨細胞的凋亡

發(fā)布時間:2017-06-26 07:14

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【摘要】:背景:Sema7A是一種細胞表面蛋白,它可以促進破骨細胞的融合同時促進成骨細胞的遷移,從而影響骨的動態(tài)平衡。推測,Sema7A siR NA可能減弱鈦微粒成骨細胞分化。目的:分析信號素7A(Sema7A)對鈦顆粒抑制鼠MC3T3-E1前成骨細胞活性過程的影響。方法:取第六七代生長狀態(tài)良好的小鼠顱骨前成骨細胞(MC3T3-E1),分為4組培養(yǎng)。其中空白對照組為單獨培養(yǎng)的細胞;標準對照組加入了鈦微粒共培養(yǎng);實驗1組加入Sema7A過表達質粒,實驗2組加入Sema7AsiR NA進行干擾。采用流式細胞儀檢測細胞凋亡情況;Q-PCR檢測骨涎蛋白、骨鈣素、Ⅰ型膠原蛋白的mR NA表達情況;Western-blot檢測骨涎蛋白、骨鈣素、Ⅰ型膠原蛋白的蛋白表達情況;茜素紅鈣結節(jié)染色檢測成骨細胞的礦化程度。結果與結論:結果提示標準對照組、實驗1組檢測到骨涎蛋白、骨鈣素、Ⅰ型膠原蛋白表達明顯減少而實驗2組骨涎蛋白、骨鈣素、Ⅰ型膠原蛋白則比標準對照組表達增加(P0.05)。流式細胞儀結果提示實驗1組成骨細胞凋亡率明顯高于其他組(P0.05),而實驗2組則比標準對照組凋亡率降低(P0.05)。茜素紅染色檢測結果顯示實驗1組未見明顯的礦化結節(jié),實驗2組有礦化結節(jié)形成。結果表明通過基因干擾技術抑制Sema7A活性可以對鈦顆粒抑制鼠MC3T3-E1成骨細胞分化的過程進行干擾,進而為臨床上用生物技術治療磨損微粒誘導的骨溶解問題提供了一條可行的思路。
【作者單位】: 解放軍南京軍區(qū)南京總醫(yī)院(解放軍第二軍醫(yī)大學南京臨床學院)骨科;
【關鍵詞】信號素類 成骨細胞 骨鈣素 膠原Ⅰ型 組織工程 組織構建 SemaA MCT-E 骨涎蛋白 Ⅰ型膠原蛋白 人工關節(jié) 無菌性松動 骨溶解
【基金】:南京軍區(qū)醫(yī)藥衛(wèi)生科研基金面上項目(14MS112) 江蘇省臨床醫(yī)學科技專項資助(BL2012002)~~
【分類號】:R68;R318.08
【正文快照】: 0引言IntroductionBIOVISION公司);PCR擴增的上下游引物合成、茜素紅S目前,全世界每年開展的關節(jié)置換手術超過10萬例,(上海圓創(chuàng)生物科技有限公司);RT-PCR反轉錄試劑盒,Taq其中約10%在術后10年內發(fā)生人工關節(jié)無菌性松動,翻修DNA聚合酶(立陶宛MBI公司(Fermentas));DNA marke、手

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本文編號:485270

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