Sema7A干預鈦微粒誘導鼠MC3T3-E1成骨細胞的凋亡
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【摘要】:背景:Sema7A是一種細胞表面蛋白,它可以促進破骨細胞的融合同時促進成骨細胞的遷移,從而影響骨的動態(tài)平衡。推測,Sema7A siR NA可能減弱鈦微粒成骨細胞分化。目的:分析信號素7A(Sema7A)對鈦顆粒抑制鼠MC3T3-E1前成骨細胞活性過程的影響。方法:取第六七代生長狀態(tài)良好的小鼠顱骨前成骨細胞(MC3T3-E1),分為4組培養(yǎng)。其中空白對照組為單獨培養(yǎng)的細胞;標準對照組加入了鈦微粒共培養(yǎng);實驗1組加入Sema7A過表達質(zhì)粒,實驗2組加入Sema7AsiR NA進行干擾。采用流式細胞儀檢測細胞凋亡情況;Q-PCR檢測骨涎蛋白、骨鈣素、Ⅰ型膠原蛋白的mR NA表達情況;Western-blot檢測骨涎蛋白、骨鈣素、Ⅰ型膠原蛋白的蛋白表達情況;茜素紅鈣結(jié)節(jié)染色檢測成骨細胞的礦化程度。結(jié)果與結(jié)論:結(jié)果提示標準對照組、實驗1組檢測到骨涎蛋白、骨鈣素、Ⅰ型膠原蛋白表達明顯減少而實驗2組骨涎蛋白、骨鈣素、Ⅰ型膠原蛋白則比標準對照組表達增加(P0.05)。流式細胞儀結(jié)果提示實驗1組成骨細胞凋亡率明顯高于其他組(P0.05),而實驗2組則比標準對照組凋亡率降低(P0.05)。茜素紅染色檢測結(jié)果顯示實驗1組未見明顯的礦化結(jié)節(jié),實驗2組有礦化結(jié)節(jié)形成。結(jié)果表明通過基因干擾技術(shù)抑制Sema7A活性可以對鈦顆粒抑制鼠MC3T3-E1成骨細胞分化的過程進行干擾,進而為臨床上用生物技術(shù)治療磨損微粒誘導的骨溶解問題提供了一條可行的思路。
【作者單位】: 解放軍南京軍區(qū)南京總醫(yī)院(解放軍第二軍醫(yī)大學南京臨床學院)骨科;
【關(guān)鍵詞】: 信號素類 成骨細胞 骨鈣素 膠原Ⅰ型 組織工程 組織構(gòu)建 SemaA MCT-E 骨涎蛋白 Ⅰ型膠原蛋白 人工關(guān)節(jié) 無菌性松動 骨溶解
【基金】:南京軍區(qū)醫(yī)藥衛(wèi)生科研基金面上項目(14MS112) 江蘇省臨床醫(yī)學科技專項資助(BL2012002)~~
【分類號】:R68;R318.08
【正文快照】: 0引言IntroductionBIOVISION公司);PCR擴增的上下游引物合成、茜素紅S目前,全世界每年開展的關(guān)節(jié)置換手術(shù)超過10萬例,(上海圓創(chuàng)生物科技有限公司);RT-PCR反轉(zhuǎn)錄試劑盒,Taq其中約10%在術(shù)后10年內(nèi)發(fā)生人工關(guān)節(jié)無菌性松動,翻修D(zhuǎn)NA聚合酶(立陶宛MBI公司(Fermentas));DNA marke、手
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本文編號:485270
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