軟骨組織結(jié)構(gòu)簡(jiǎn)單,無(wú)血管神經(jīng)長(zhǎng)入,因此自身修復(fù)能力有限。傳統(tǒng)的軟骨缺損治療方法各有局限性且不能完全恢復(fù)軟骨組織的功能性,因此,利用組織工程方法構(gòu)建骨軟骨仿生組織復(fù)合物是未來(lái)解決大面積骨軟骨缺損的最佳方法之一。本實(shí)驗(yàn)采用生物相容性強(qiáng)、與人體骨組織結(jié)構(gòu)及性能相似的豬源骨松質(zhì)脫脂、脫鈣、脫蛋白后作為骨部分仿生支架,將殼聚糖明膠混合凍干并交聯(lián)后構(gòu)建殼聚糖-明膠水凝膠支架作為軟骨部分仿生支架。在構(gòu)建的水凝膠/松質(zhì)骨支架上分別接種骨細(xì)胞軟骨細(xì)胞方向誘導(dǎo)分化后的脂肪干細(xì)胞(Adipose-derived stem cells, ADSCs)后,構(gòu)建雙層骨軟骨復(fù)合物并檢測(cè)其用于骨軟骨修復(fù)中的可行性。 首先,制備骨松質(zhì)支架,檢測(cè)其孔徑分布、孔隙率,掃描電鏡觀察其表面形貌并利用紅外檢測(cè)其化學(xué)組成。掃描電鏡觀察發(fā)現(xiàn)骨松質(zhì)支架表面有大量納米級(jí)突起,骨松質(zhì)支架內(nèi)孔道連通,支架的平均孔徑為410±59μm,孔隙率為70.64±1.71%。通過紅外檢測(cè)發(fā)現(xiàn),骨松質(zhì)支架內(nèi)含有羥基磷灰石與蛋白質(zhì)等有機(jī)物質(zhì)。制備不同濃度的殼聚糖/明膠水凝膠支架并檢測(cè)不同濃度下支架的孔隙率、溶脹率及降解率,選擇綜合性能最優(yōu)的濃度用于制備本...

【文章頁(yè)數(shù)】：74 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
Abstract
引言
1 文獻(xiàn)綜述
    1.1 關(guān)節(jié)骨軟骨結(jié)構(gòu)
        1.1.1 軟骨結(jié)構(gòu)
        1.1.2 臨床軟骨缺損的修復(fù)
        1.1.3 組織工程方法修復(fù)骨軟骨缺損
    1.2 骨軟骨復(fù)合支架
        1.2.1 骨軟骨復(fù)合支架種子細(xì)胞
        1.2.2 骨軟骨復(fù)合支架材料
        1.2.3 骨軟骨復(fù)合支架構(gòu)建
        1.2.4 骨軟骨復(fù)合支架的應(yīng)用前景
    1.3 選題依據(jù)及研究?jī)?nèi)容
2 骨及軟骨支架的制備及性能檢測(cè)
    2.1 實(shí)驗(yàn)材料與儀器
        2.1.1 實(shí)驗(yàn)藥品
        2.1.2 實(shí)驗(yàn)儀器
        2.1.3 溶液配制
    2.2 骨松質(zhì)支架制備方法
    2.3 骨松質(zhì)支架的檢測(cè)
        2.3.1 骨松質(zhì)形態(tài)觀察及孔隙率
        2.3.2 掃描電鏡觀察及紅外檢測(cè)
    2.4 殼聚糖/明膠水凝膠的制備
    2.5 殼聚糖/明膠水凝膠的性能檢測(cè)
        2.5.1 水凝膠孔隙率及溶脹率的測(cè)定
        2.5.2 水凝膠降解率的測(cè)定
        2.5.3 掃描電鏡觀察及紅外檢測(cè)
        2.5.4 數(shù)據(jù)分析
    2.6 結(jié)果與討論
        2.6.1 骨松質(zhì)的孔隙率及孔徑
        2.6.2 骨松質(zhì)形貌與化學(xué)組成分析
        2.6.3 水凝膠的孔隙率、溶脹率及降解率
        2.6.4 水凝膠的孔徑與微觀形貌
        2.6.5 水凝膠的化學(xué)組成分析
    2.7 小結(jié)
3 脂肪干細(xì)胞的分離和培養(yǎng)
    3.1 實(shí)驗(yàn)材料
        3.1.1 實(shí)驗(yàn)藥品與試劑
        3.1.2 實(shí)驗(yàn)儀器與裝置
        3.1.3 實(shí)驗(yàn)所需溶液的配制
    3.2 實(shí)驗(yàn)方法
        3.2.1 脂肪干細(xì)胞的體外獲得及原代、繼代培養(yǎng)
        3.2.2 脂肪干細(xì)胞成脂肪誘導(dǎo)
        3.2.3 脂肪干細(xì)胞成軟骨誘導(dǎo)
        3.2.4 脂肪干細(xì)胞成骨誘導(dǎo)
    3.3 結(jié)果與討論
        3.3.1 不同培養(yǎng)時(shí)間脂肪干細(xì)胞的形態(tài)
        3.3.2 脂肪干細(xì)胞的脂肪分化能力
        3.3.3 脂肪干細(xì)胞的骨向分化能力
        3.3.4 脂肪干細(xì)胞的軟骨分化能力
    3.4 小結(jié)
4 脂肪干細(xì)胞與支架的復(fù)合培養(yǎng)
    4.1 實(shí)驗(yàn)材料
    4.2 實(shí)驗(yàn)方法
        4.2.1 骨部分仿生組織的體外培養(yǎng)
        4.2.2 水凝膠軟骨仿生組織的體外培養(yǎng)
        4.2.3 雙層支架的復(fù)合培養(yǎng)及檢測(cè)
        4.2.4 掃描電鏡觀察細(xì)胞及胞外基質(zhì)分泌物
        4.2.5 數(shù)據(jù)分析
    4.3 結(jié)果與討論
        4.3.1 骨松質(zhì)支架內(nèi)細(xì)胞的生長(zhǎng)增殖情況
        4.3.2 骨松質(zhì)支架內(nèi)細(xì)胞的骨向分化能力
        4.3.3 骨松質(zhì)支架上細(xì)胞及分泌物
        4.3.4 水凝膠內(nèi)細(xì)胞的生長(zhǎng)增殖情況
        4.3.5 水凝膠支架上的細(xì)胞及胞外分泌物
        4.3.6 細(xì)胞生長(zhǎng)增殖活性定量分析
    4.4 小結(jié)
結(jié)論
參考文獻(xiàn)
附錄A 英文縮略詞
攻讀碩士學(xué)位期間發(fā)表學(xué)術(shù)論文情況
致謝



本文編號(hào)：3965775