“鈦骨”表面納米摻鋅鈣磷涂層的骨誘導(dǎo)性探究
本文關(guān)鍵詞:“鈦骨”表面納米摻鋅鈣磷涂層的骨誘導(dǎo)性探究,由筆耕文化傳播整理發(fā)布。
【摘要】:目的: 在新型種植體“鈦骨”表面構(gòu)建摻入不同濃度鋅的納米級(jí)鈣磷涂層;通過體外細(xì)胞實(shí)驗(yàn)檢測(cè)此種生物涂層對(duì)MG63細(xì)胞早期黏附、增殖、分化、基質(zhì)礦化的影響并由此篩選出最適當(dāng)摻入鋅濃度。 方法: 運(yùn)用計(jì)時(shí)電位-電化學(xué)沉積法在“鈦骨”表面構(gòu)建不同濃度納米摻鋅鈣磷涂層;以單純細(xì)胞組作空白對(duì)照組,純“鈦骨”組作陰性對(duì)照組,分別摻入鋅的Zn/(Ca+Zn)摩爾比分別為0%、10%、20%、30%的鈣磷涂層組為實(shí)驗(yàn)組,,將材料與MG-63細(xì)胞共培養(yǎng);在1h時(shí)通過DAPI染色定性檢測(cè)各組黏附細(xì)胞量、于1、4、7天通過CCK-8法評(píng)估材料對(duì)細(xì)胞增殖的影響、第7天定量檢測(cè)胞內(nèi)AKP活性、第14天通過BCA法定量測(cè)定細(xì)胞總蛋白濃度、第9、14天通過Real-TimePCR檢測(cè)成骨相關(guān)基因RUNX2、OCN、Osterix mRNA的相對(duì)表達(dá)水平、第9、14、21天通過Westernblot測(cè)定基質(zhì)礦化相關(guān)蛋白Collagen I及BSP表達(dá)量。 結(jié)果: 1、“鈦骨”表面納米摻鋅鈣磷涂層可促進(jìn)共培養(yǎng)1h后MG63細(xì)胞的早期黏附,其中摻入20%Zn-HA組及30%Zn-HA組對(duì)細(xì)胞黏附的促進(jìn)作用相對(duì)更明顯; 2、“鈦骨”表面納米摻鋅鈣磷涂層在第4、7天能明顯促進(jìn)MG63細(xì)胞早期增殖,在第7天20%Zn-HA涂層對(duì)細(xì)胞增殖的促進(jìn)作用最顯著; 3、與對(duì)照組相比,第7天實(shí)驗(yàn)組可上調(diào)MG-63中AKP活性,其中20%摻鋅組的促進(jìn)效果最明顯; 4、與空白及陰性對(duì)照組相比,20%Zn-HA組能明顯促進(jìn)總蛋白表達(dá)量; 5、在細(xì)胞促基質(zhì)礦化期的第9、14天時(shí),20%摻鋅組可上調(diào)RUNX2、OCN、Osterix mRNA表達(dá)量; 6、在礦化早期及晚期,20%Zn-HA對(duì)MG-63中成骨相關(guān)蛋白Collagen I及BSP的表達(dá)量起正性調(diào)節(jié)作用。 結(jié)論: 1、鈦骨表面納米摻鋅鈣磷涂層在成骨樣細(xì)胞的早期黏附、早期增殖、早期分化、后期分化、基質(zhì)礦化等成骨想過過程中都能發(fā)揮積極作用; 2、在摻入不同鋅濃度的鈣磷涂層中,20%摩爾比對(duì)成骨的促進(jìn)作用最強(qiáng); 3、鋅離子的生物活性具有濃度依賴性,30%組中釋放的鋅離子濃度可能存在細(xì)胞毒性。 4、成骨樣細(xì)胞更易在納米級(jí)粗糙表面附著;不易在邊緣尖銳的表面附著。
【關(guān)鍵詞】:鋅 鈣 磷 表面涂層 電化學(xué)沉積 骨誘導(dǎo)性 鈦骨
【學(xué)位授予單位】:吉林大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2015
【分類號(hào)】:R783.1
【目錄】:
- 引言4-6
- 摘要6-8
- Abstract8-12
- 英文縮略語表12-13
- 第1章 緒論13-20
- 1.1 納米摻鋅鈣磷涂層的理化性能及抑菌性13-15
- 1.1.1 鋅在鈣磷涂層中的結(jié)合形式13-14
- 1.1.2 鋅對(duì)鈣磷涂層理化性能的影響14
- 1.1.3 摻入鋅的抑菌性及機(jī)制14-15
- 1.2 納米摻鋅鈣磷涂層的生物學(xué)性能15-20
- 1.2.1 鈣磷涂層對(duì)成骨的影響15
- 1.2.2 鈣促成骨機(jī)制15-16
- 1.2.3 磷促成骨機(jī)制16
- 1.2.4 鋅對(duì)成骨的影響16-17
- 1.2.5 鋅促成骨機(jī)制17-20
- 第2章 材料與方法20-28
- 2.1 實(shí)驗(yàn)設(shè)備與材料20-22
- 2.1.1 主要實(shí)驗(yàn)設(shè)備20-21
- 2.1.2 主要實(shí)驗(yàn)試劑及材料21-22
- 2.2 實(shí)驗(yàn)方法22-28
- 2.2.1 “鈦骨”表面納米摻鋅鈣磷涂層的構(gòu)建22
- 2.2.2 生物性能評(píng)估22-28
- 第3章 實(shí)驗(yàn)結(jié)果28-37
- 3.1 DAPI 染色28-29
- 3.2 CCK-8 測(cè)定早期增殖29-31
- 3.3 AKP 活性檢測(cè)31-32
- 3.4 BCA 法檢測(cè)細(xì)胞總蛋白濃度32-33
- 3.5 Real-Time PCR 檢測(cè) OCN、Osterix、Runx2 mRNA 表達(dá)水平33-36
- 3.6 Westernblot 檢測(cè) BSP 及 Collagen I 表達(dá)水平36-37
- 第4章 討論37-46
- 4.1 MG-63 細(xì)胞的選擇及培養(yǎng)38
- 4.2 鈦骨38-39
- 4.3 DAPI 染色39-40
- 4.4 CCK-8 檢測(cè)40-41
- 4.5 AKP 檢測(cè)41-43
- 4.6 蛋白總濃度檢測(cè)43
- 4.7 Real-Time PCR 檢測(cè) OCN、Osterix、Runx2 mRNA 的表達(dá)水平43-44
- 4.8 Westernblot 檢測(cè) BSP、Collagen I 水平44-46
- 第5章 結(jié)論46-47
- 參考文獻(xiàn)47-52
- 作者簡介及在學(xué)期間所取得的科研成果52-53
- 致謝53-54
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本文編號(hào):393922
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