目的應(yīng)用模擬體液(simulated body fluid, SBF)仿生礦化法制備羥磷灰石(hydroxyapatite,HA)-殼聚糖(chitosan,CHI)支架,并對(duì)支架的理化性能及自身的吸水性能、溶脹性能、降解性能進(jìn)行評(píng)估,探討礦化時(shí)間對(duì)支架結(jié)構(gòu)的影響,并將成骨誘導(dǎo)后的脂肪基質(zhì)干細(xì)胞接種到該支架上,通過(guò)觀察細(xì)胞的增殖分化情況驗(yàn)證該支架的細(xì)胞相容性,進(jìn)一步了解該支架對(duì)細(xì)胞生長(zhǎng)的影響。方法先將殼聚糖粉末溶于2%乙酸溶液中,應(yīng)用冷凍干燥法制備殼聚糖支架,NaOH乙醇-水溶液除酸,多聚磷酸鈉交聯(lián);將該支架應(yīng)用交替浸泡法進(jìn)行預(yù)鈣化,然后浸入模擬體液中進(jìn)行礦化,控制礦化時(shí)間分別為7d、14d、21d,即為三組實(shí)驗(yàn)組,單純殼聚糖支架為對(duì)照組,檢測(cè)支架的大體形態(tài)、內(nèi)部結(jié)構(gòu)、孔徑、孔隙率、物質(zhì)組成、官能團(tuán)組成、機(jī)械力學(xué)性能及吸水率、溶脹率、降解性能、熱力學(xué)性質(zhì)等屬性,再將經(jīng)過(guò)成骨誘導(dǎo)后的脂肪基質(zhì)干細(xì)胞(adipose-derived stem cells, ADSCs)接種到支架上,觀察細(xì)胞-支架復(fù)合物粘附性、進(jìn)行Live/Dead染色、免疫組織化學(xué)染色、茜素紅染色分析、定量分析細(xì)胞增殖量、...

【文章頁(yè)數(shù)】：75 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

圖1殼聚糖支架的大體形態(tài)（左）及在光學(xué)顯微鏡下的觀察（右）×100

其中F為截面載荷，S為截面面積，dH為支架高度的變化，H為支初始高度。（7）統(tǒng)計(jì)學(xué)分析采用國(guó)際通用的SPSS22.0軟件，先檢查方差齊性，若方差齊則采用單因素方分析，并采用LSD組間兩兩多重比較，若方差不齊將采用校正后的方差分析，用Dunnett’s方法進(jìn)....

圖2實(shí)驗(yàn)組及對(duì)照組的支架特征×600（1）實(shí)驗(yàn)組及對(duì)照組支架的掃面電子顯微鏡結(jié)果如圖2所示

將首次凍干后的殼聚糖支架放入水中后，會(huì)很快發(fā)現(xiàn)其溶于水中，但是將材料放入氫氧化鈉乙醇水溶液3小時(shí)后再次凍干，支架材料仍然會(huì)有一部分溶失的現(xiàn)象，但是較初次凍干者支架的溶失率低，說(shuō)明氫氧化鈉乙醇水溶液中和了殼聚糖溶液中的乙酸。再經(jīng)多聚磷酸鈉化學(xué)交聯(lián)劑交聯(lián)24小時(shí)，用超純水徹底....

圖3實(shí)驗(yàn)組及對(duì)照組孔徑測(cè)試圖像×200a：7d組；b：14d組；c：21d組；d:PureCHI組圖3為每個(gè)實(shí)驗(yàn)組及對(duì)照組具有代表性的圖片，從該類平行圖片中測(cè)得支架材料的孔徑

（2）將單純殼聚糖支架材料經(jīng)過(guò)預(yù)鈣化以后，浸泡入模擬體液之后根據(jù)時(shí)間不同（7天、14天、21天）得到以上A、B、C三張圖片，當(dāng)在模擬體液中礦化7天時(shí)（圖中A圖片），會(huì)觀察到在支架的孔壁上會(huì)形成少量的礦化物，對(duì)支架的孔徑、孔隙率沒(méi)有明顯的影響；當(dāng)在模擬體液中礦化....

圖4實(shí)驗(yàn)組及對(duì)照組支架材料的孔隙率

圖4實(shí)驗(yàn)組及對(duì)照組支架材料的孔隙率由實(shí)驗(yàn)結(jié)果可知，雖然各個(gè)組別的支架材料在模擬體液中礦化時(shí)間不同，但是所有組中孔隙率均高于90%，符合骨組織工程支架材料對(duì)孔隙率的要求[30]。同時(shí)，礦化時(shí)間對(duì)支架的孔隙率有著重要的影響，其趨勢(shì)是礦化時(shí)間與支架的孔隙率成反比，但不是特別明顯，....

本文編號(hào)：3913326