周圍神經(jīng)組織由于其結(jié)構(gòu)、功能復雜,一旦發(fā)生損傷則致殘率高、預后差、治療復雜,成為當前臨床的一大重要難題。傳統(tǒng)的自體神經(jīng)與異體神經(jīng)移植仍然是臨床治療周圍神經(jīng)缺損的常用方案,然而其本身的局限性極大的限制了它們的廣泛應用。神經(jīng)組織工程的興起為周圍神經(jīng)修復提供了新的方向。當前神經(jīng)組織工程領(lǐng)域的研究主要集中在支架材料、支架結(jié)構(gòu)、神經(jīng)細胞、神經(jīng)因子、電刺激信號等幾個方面。本研究從組織工程的支架、細胞和因子三大要素著手,提出制備三種新型神經(jīng)導管支架。首先,聚吡咯(Ppy)因為具備良好的生物相容性和導電性能,利用其制備聚吡咯涂層神經(jīng)導管支架,在支架材料上實現(xiàn)創(chuàng)新,同時結(jié)合電刺激信號進行體外研究;然后,仿生神經(jīng)內(nèi)膜結(jié)構(gòu),以納米纖維海綿作為填充物制備納米纖維海綿填充式神經(jīng)導管支架,在支架結(jié)構(gòu)上實現(xiàn)創(chuàng)新;最后,因為聚多巴胺納米球(PDA NPs)具有良好的生物相容性,且具備負載神經(jīng)生長因子(NGF)的能力,利用其介導NGF制備可緩釋NGF的復合水凝膠填充式神經(jīng)導管支架,同時在神經(jīng)因子和支架結(jié)構(gòu)上實現(xiàn)創(chuàng)新。具體來看,本文的研究內(nèi)容與結(jié)果可以概括為以下幾個部分:(1)以吡咯為單體,利用原位氧化聚合和靜電紡絲技術(shù)...

【文章頁數(shù)】：174 頁

【學位級別】：博士

【文章目錄】：
摘要
abstract
第一章 緒論
    1.1 周圍神經(jīng)組織與神經(jīng)組織工程
        1.1.1 神經(jīng)組織結(jié)構(gòu)與組成
        1.1.2 周圍神經(jīng)組織的缺損與再生
        1.1.3 神經(jīng)組織工程及其對周圍神經(jīng)組織再生的意義
    1.2 神經(jīng)組織工程的研究方向和熱點
        1.2.1 支架材料
        1.2.2 支架結(jié)構(gòu)
        1.2.3 神經(jīng)細胞
        1.2.4 神經(jīng)因子
        1.2.5 電刺激或者其他信號
    1.3 導電材料在神經(jīng)組織工程上的應用
        1.3.1 神經(jīng)組織工程上應用的導電材料
        1.3.2 聚吡咯導電材料的生物相容性及其在神經(jīng)組織工程上的應用.
    1.4 具有特殊結(jié)構(gòu)的神經(jīng)組織工程支架的研究與應用
        1.4.1 取向結(jié)構(gòu)支架制備及其在神經(jīng)組織工程的應用
        1.4.2 內(nèi)部填充式支架的制備及其在神經(jīng)組織工程的應用
    1.5 神經(jīng)生長因子在神經(jīng)組織工程中的應用
        1.5.1 神經(jīng)生長因子及其緩釋體系
        1.5.2 聚多巴胺納米球作為神經(jīng)生長因子緩釋載體的研究
    1.6 本課題的研究意義與主要研究內(nèi)容
        1.6.1 本課題的研究意義
        1.6.2 本課題的主要研究內(nèi)容
        1.6.3 本課題的創(chuàng)新點
    參考文獻
第二章 導電聚吡咯涂層納米纖維神經(jīng)導管的制備
    2.1 前言
    2.2 實驗材料和方法
        2.2.1 實驗材料及試劑
        2.2.2 實驗儀器與設(shè)備
        2.2.3 導電聚吡咯涂層PLCL/SF納米纖維膜的制備
        2.2.4 導電聚吡咯涂層納米纖維膜的測試與表征
        2.2.5 導電聚吡咯涂層納米纖維神經(jīng)導管的制備
        2.2.6 導電聚吡咯涂層納米纖維神經(jīng)導管的測試與表征
        2.2.7 動物實驗
        2.2.8 統(tǒng)計學分析
    2.3 結(jié)果與討論
        2.3.1 導電聚吡咯涂層納米纖維膜的制備流程
        2.3.2 導電聚吡咯涂層納米纖維膜的表面形貌
        2.3.3 導電聚吡咯涂層納米纖維膜的FTIR和XRD測試
        2.3.4 導電聚吡咯涂層納米纖維膜的熱穩(wěn)定性和親水性
        2.3.5 導電聚吡咯涂層納米纖維膜的力學性能
        2.3.6 導電聚吡咯涂層納米纖維膜的導電性
        2.3.7 導電聚吡咯涂層納米纖維膜的降解性能及降解對其導電穩(wěn)定性的影響
        2.3.8 電刺激條件下雪旺細胞在導電聚吡咯涂層納米纖維膜上的增殖行為
        2.3.9 電刺激條件下PC12細胞在導電聚吡咯涂層納米纖維膜上的分化行為
        2.3.10 導電聚吡咯涂層納米纖維神經(jīng)導管的制備和表面形貌
        2.3.11 導電聚吡咯涂層納米纖維神經(jīng)導管的XPS測試和導電性能
        2.3.12 動物實驗手術(shù)前后神經(jīng)組織的大體形貌觀察
        2.3.13 術(shù)后大鼠坐骨神經(jīng)功能恢復評價
        2.3.14 術(shù)后大鼠再生神經(jīng)的組織學染色評價
        2.3.15 術(shù)后大鼠再生神經(jīng)的免疫熒光染色
        2.3.16 術(shù)后大鼠再生神經(jīng)的透射電鏡和掃描電鏡表征
    2.4 本章小結(jié)
    參考文獻
第三章 納米纖維海綿填充式神經(jīng)導管的制備及應用研究
    3.1 前言
    3.2 實驗材料和方法
        3.2.1 實驗材料及試劑
        3.2.2 實驗儀器與設(shè)備
        3.2.3 納米纖維海綿的制備
        3.2.4 納米纖維海綿的形貌觀察
        3.2.5 納米纖維海綿的孔隙率測定
        3.2.6 納米纖維海綿的孔徑分布表征
        3.2.7 傅里葉紅外(FTIR)表征
        3.2.8 循環(huán)壓縮力學測試
        3.2.9 納米纖維海綿填充式神經(jīng)導管支架的制備
        3.2.10 納米纖維海綿填充式神經(jīng)導管支架的形貌表征
        3.2.11 納米纖維海綿填充式神經(jīng)導管支架的細胞增殖與滲透實驗
        3.2.12 手術(shù)移植
        3.2.13 大鼠術(shù)后再生神經(jīng)組織大體觀察
        3.2.14 大鼠術(shù)后足跡分析
        3.2.15 大鼠術(shù)后肱三頭肌濕重分析與Masson染色
        3.2.16 組織學染色
        3.2.17 免疫組化
        3.2.18 免疫熒光染色
        3.2.19 透射電鏡分析
        3.2.20 統(tǒng)計學分析
    3.3 結(jié)果與討論
        3.3.1 納米纖維海綿的制備流程
        3.3.2 納米纖維海綿的表面形貌分析
        3.3.3 納米纖維海綿的FTIR測試
        3.3.4 納米纖維海綿的孔隙率和孔徑分布分析
        3.3.5 納米纖維海綿的壓縮力學性能分析
        3.3.6 納米纖維海綿填充式神經(jīng)導管支架的制備
        3.3.7 納米纖維海綿填充式神經(jīng)導管支架的形貌表征
        3.3.8 納米纖維海綿填充式神經(jīng)導管支架的細胞相容性
        3.3.9 納米纖維海綿填充式神經(jīng)導管支架的細胞滲透表征
        3.3.10 動物實驗手術(shù)前后神經(jīng)組織的大體形貌觀察
        3.3.11 術(shù)后大鼠神經(jīng)功能恢復評價
        3.3.12 術(shù)后大鼠再生神經(jīng)的組織學染色評價
        3.3.13 術(shù)后大鼠再生神經(jīng)的免疫組化分析
        3.3.14 術(shù)后大鼠再生神經(jīng)的免疫熒光染色
        3.3.15 術(shù)后大鼠再生神經(jīng)的透射電鏡表征
    3.4 本章小結(jié)
    參考文獻
第四章 聚多巴胺納米球介導的可緩釋NGF復合水凝膠填充式神經(jīng)導管的制備和體外表征
    4.1 前言
    4.2 實驗材料和方法
        4.2.1 實驗材料及試劑
        4.2.2 實驗儀器與設(shè)備
        4.2.3 聚多巴胺納米球的制備
        4.2.4 聚多巴胺納米球的表征
        4.2.5 負載NGF聚多巴胺納米球的制備
        4.2.6 負載NGF聚多巴胺納米球的表征
        4.2.7 利用三維打印技術(shù)制備負載NGF水凝膠纖維填充式神經(jīng)導管
        4.2.8 負載NGF復合水凝膠纖維填充式神經(jīng)導管的形貌表征
        4.2.9 復合水凝膠纖維的體外降解性能研究
        4.2.10 復合水凝膠纖維填充式神經(jīng)導管的體外生物學評價
        4.2.11 統(tǒng)計學分析
    4.3 結(jié)果與討論
        4.3.1 聚多巴胺納米球的制備和條件優(yōu)化實驗
        4.3.2 聚多巴胺納米球的形貌觀察與粒徑分析
        4.3.3 聚多巴胺納米球的紅外和拉曼圖譜分析
        4.3.4 負載NGF聚多巴胺納米球的制備流程
        4.3.5 負載NGF聚多巴胺納米球的形貌觀察與粒徑分析
        4.3.6 負載NGF聚多巴胺納米球的紅外和拉曼圖譜分析
        4.3.7 NGF的包封率和載藥率
        4.3.8 負載NGF聚多巴胺納米球上的NGF緩釋行為
        4.3.9 負載NGF聚多巴胺納米球的生物相容性
        4.3.10 負載NGF的復合水凝膠纖維填充式神經(jīng)導管支架的制備
        4.3.11 復合水凝膠填充式神經(jīng)導管支架的形貌表征
        4.3.12 復合水凝膠纖維的體外降解性能
        4.3.13 復合水凝膠填充式神經(jīng)導管支架的體外生物學研究
    4.4 本章小結(jié)
    參考文獻
第五章 結(jié)論與展望
    5.1 結(jié)論
    5.2 展望
攻讀博士期間科研成果及獲獎情況
附錄：主要縮寫詞
致謝



本文編號：3846549