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載microRNA-15b-5p殼聚糖納米粒子的制備及其對(duì)大鼠BMSCs成骨分化影響的初步研究

發(fā)布時(shí)間:2022-10-18 16:52
  目的:探討microRNA (miR)-15b-5p對(duì)大鼠來(lái)源骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞(bone marrow mesenchymal stem cells,BMSCs)成骨分化的調(diào)控功能,并構(gòu)建殼聚糖/miR-15b-5p納米粒子,研究該納米粒子對(duì)于大鼠BMSCs成骨分化的影響。方法:提取大鼠原代BMSCs并誘導(dǎo)其成骨分化,檢測(cè)miR-15b-5p在成骨分化過(guò)程中的表達(dá)變化。再在大鼠BMSCs中過(guò)表達(dá)miR-15b-5p并誘導(dǎo)其成骨分化,檢測(cè)其成骨分化能力。進(jìn)一步采用離子交聯(lián)法制備不同質(zhì)量比的殼聚糖/miR-15b-5p納米粒子并表征其性能,將納米粒子體外轉(zhuǎn)染BMSCs及體內(nèi)應(yīng)用后,檢測(cè)其成骨分化能力。其中,對(duì)照組不經(jīng)任何處理,使用成骨分化誘導(dǎo)的為誘導(dǎo)組,過(guò)表達(dá)miR-15b-5p并成骨誘導(dǎo)的為轉(zhuǎn)染誘導(dǎo)組。結(jié)果:在大鼠BMSCs成骨分化過(guò)程中,miR-15b-5p表達(dá)上調(diào);過(guò)表達(dá)miR-15b-5p并誘導(dǎo)成骨后,其成骨相關(guān)基因(RUNX2、OPN、OCN等)表達(dá)高于誘導(dǎo)組和對(duì)照組;當(dāng)殼聚糖/miR-15b-5p質(zhì)量比為20∶1時(shí),納米粒子包封率達(dá)到(98.55±0.10)%,其形態(tài)均一,平均... 

【文章頁(yè)數(shù)】:8 頁(yè)

【文章目錄】:
1 材料和方法
    1.1 原代BMSCs的分離、培養(yǎng)
    1.2 成骨分化
    1.3 茜素紅染色
    1.4 mi R-15b-5p及成骨相關(guān)基因檢測(cè)
    1.5 mi R-15b-5p轉(zhuǎn)染BMSCs
    1.6 殼聚糖/mi R-15b-5p納米粒子的制備
    1.7 殼聚糖/mi R-15b-5p納米粒子表征的測(cè)定
        1.7.1 包封率測(cè)定
        1.7.2 粒徑及形貌測(cè)定
        1.7.3 細(xì)胞毒性測(cè)定
        1.7.4 體外轉(zhuǎn)染
    1.8 納米粒子在大鼠顱骨缺損修復(fù)中的運(yùn)用
    1.9 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析
2 結(jié)果
    2.1 mi R-15b-5p在成骨分化中的作用
    2.2 殼聚糖/mi R-15b-5p納米粒子表征
    2.3 殼聚糖/mi R-15b-5p納米粒子促成骨分化能力
3 討論



本文編號(hào):3692695

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