目的:分離及鑒定大鼠腰椎軟骨終板干細(xì)胞,并制備脫軟骨細(xì)胞基質(zhì),探究脫軟骨細(xì)胞基質(zhì)的生物相容性及對大鼠腰椎軟骨終板干細(xì)胞的分化影響;將脫細(xì)胞軟骨基質(zhì)聯(lián)合殼聚糖經(jīng)冷凍干燥法制備組織支架,探究軟骨干細(xì)胞在支架上的增殖與凋亡。方法:分離大鼠腰椎軟骨終板,使用酶聯(lián)合消化獲得原代軟骨細(xì)胞;將軟骨細(xì)胞按照一定的密度接種培養(yǎng)后,結(jié)晶紫染色,計算軟骨干細(xì)胞集落形成的百分比;胰酶消化集落并進(jìn)行擴(kuò)增培養(yǎng),加入成骨,成脂肪及成軟骨誘導(dǎo)培養(yǎng)液誘導(dǎo)相應(yīng)的天數(shù)后,使用茜素紅,油紅O及番紅染色,觀察其多向分化能力;流式細(xì)胞儀檢測干細(xì)胞表面陽性標(biāo)記物CD44和CD90及陰性標(biāo)記物CD45的表達(dá)情況。將家豬軟骨粉碎后,胰酶聯(lián)合核酶TritonX-100處理得到脫細(xì)胞軟骨基質(zhì),DAPI染色觀察軟骨組織脫細(xì)胞效果;電鏡掃描觀察脫細(xì)胞基質(zhì)的形態(tài);傅里葉紅外光譜儀分析脫細(xì)胞基質(zhì)的組成成分;將脫細(xì)胞基質(zhì)溶于醋酸后,制備成脫細(xì)胞基質(zhì)膜,觀察其大體特點(diǎn);將獲得的終板軟骨干細(xì)胞種植于膜上,倒置相差顯微鏡下觀察軟骨干細(xì)胞生長形態(tài),并用CCK-8檢測軟骨干細(xì)胞在基質(zhì)膜上的增殖情況,與空白板進(jìn)行對照;引入細(xì)胞相對增值率（RGR）的概念,建立新... 

【文章頁數(shù)】：63 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【文章目錄】：
中英文縮略詞對照表
摘要
ABSTRACT
前言
研究材料(資料、內(nèi)容)與方法
    1 實(shí)驗(yàn)材料
    2 實(shí)驗(yàn)方法
        2.1 大鼠腰椎軟骨終板干細(xì)胞的獲取及鑒定
        2.2 脫細(xì)胞軟骨基質(zhì)的制備及物理學(xué)特點(diǎn)
        2.3 脫細(xì)胞軟骨基質(zhì)的生物相容性
        2.4 脫細(xì)胞軟骨基質(zhì)對軟骨終板干細(xì)胞的分化影響
        2.5 基因表達(dá)分析
        2.6 脫細(xì)胞軟骨基質(zhì)聯(lián)合殼聚糖組織工程支架
        2.7 支架的生物學(xué)活性
結(jié)果
討論
結(jié)論
參考文獻(xiàn)
綜述 椎間盤退變治療方法的研究進(jìn)展
    參考文獻(xiàn)
作者簡介及讀研期間主要科研成果
致謝


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]Runx2、Osterix轉(zhuǎn)錄因子過表達(dá)驅(qū)動內(nèi)皮細(xì)胞成骨分化的機(jī)制探討[J]. 楊光正,張文杰,丁迅,張翔凱,蔣欣泉,張志愿.  上�？谇会t(yī)學(xué). 2017(04)
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