目的·利用兔耳廓軟骨細(xì)胞,復(fù)合明膠（GT）/聚己內(nèi)酯（PCL）靜電紡納米纖維膜,并結(jié)合3D打印聚乳酸己內(nèi)酯（PLCL）支架,構(gòu)建具有"C"形環(huán)狀結(jié)構(gòu)的組織工程軟骨,用于氣管軟骨的移植修復(fù)。方法·用酶消化法分離獲得原代兔耳廓軟骨細(xì)胞。通過(guò)靜電紡絲技術(shù)將GT和PCL紡制成納米纖維膜,并剪裁成12 cm×2.5 cm的長(zhǎng)方形膜片。以1×10⁸個(gè)/mL的密度將第2代軟骨細(xì)胞接種于電紡膜上,并將電紡膜均勻卷疊于3D打印的PLCL的"C"形環(huán)狀支架上,約卷5層,以構(gòu)建軟骨組織復(fù)合物。埋于裸鼠皮下培養(yǎng)8周,對(duì)形成的軟骨組織進(jìn)行大體觀察和石蠟切片組織學(xué)染色鑒定。結(jié)果·體內(nèi)培養(yǎng)8周后,白色軟骨組織形成,質(zhì)軟,有一定彈性。外觀呈環(huán)狀,有一定弧度,內(nèi)表面明顯可見凹凸不平、間隔排列的"C"形環(huán)狀軟骨結(jié)構(gòu),接近正常氣管軟骨的結(jié)構(gòu)和形狀。組織學(xué)染色可見大量典型的軟骨陷窩形成以及大量軟骨細(xì)胞外基質(zhì)分泌。結(jié)論·利用兔耳廓軟骨細(xì)胞,復(fù)合GT/PCL靜電紡納米纖維膜,并結(jié)合3D打印PLCL支架,可以構(gòu)建出具有"C"形環(huán)狀結(jié)構(gòu)的組織工程軟骨,有望應(yīng)用于氣管軟骨的移植修復(fù)。 

【文章來(lái)源】：上海交通大學(xué)學(xué)報(bào)(醫(yī)學(xué)版). 2017,37(07)北大核心CSCD

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【文章目錄】：
1 材料與方法
    1.1 材料
        1.1.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物
        1.1.2 主要試劑和儀器
    1.2 兔耳軟骨細(xì)胞的分離與培養(yǎng)
    1.3 GT/PCL靜電紡納米纖維膜的制備
    1.4 3D打印PLCL支架
    1.5“C”形環(huán)狀軟骨樣組織的構(gòu)建
        1.5.1 軟骨細(xì)胞-GT/PCL電紡膜復(fù)合物的構(gòu)建
        1.5.2 軟骨細(xì)胞-GT/PCL電紡膜復(fù)合物結(jié)合3D打印PLCL支架體外構(gòu)建“C”形環(huán)狀軟骨樣組織
        1.5.3 體內(nèi)培養(yǎng)獲得“C”形環(huán)狀軟骨
    1.6“C”環(huán)狀軟骨的組織學(xué)鑒定
2 結(jié)果
    2.1 體外構(gòu)建“C”形環(huán)狀軟骨的大體觀
    2.2體內(nèi)培養(yǎng)“C”形環(huán)狀軟骨的大體觀
    2.3“C”形環(huán)狀軟骨的組織學(xué)檢測(cè)
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