目的:（1）探索通過(guò)將骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞誘導(dǎo)所得內(nèi)皮樣細(xì)胞與骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞制備的細(xì)胞片混合培養(yǎng),初步探討兩者共同培養(yǎng)體外血管形成的可行性。（2）同時(shí)并將混合培養(yǎng)后的細(xì)胞片運(yùn)用于完全游離的缺血皮瓣模型,評(píng)估體內(nèi)血管形成的潛能。方法:（1）骨髓間充質(zhì)細(xì)胞（BMSCs）提取、培養(yǎng)及流式鑒定:取SPF級(jí)4周齡雄性SD大鼠,處死后提取骨髓沖洗液,采用全骨髓差異貼壁培養(yǎng)法,體外培養(yǎng)大鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞（BMSC）,取培養(yǎng)所得P4代BMSC,胰酶消化后運(yùn)用流式細(xì)胞計(jì)數(shù)檢測(cè)表面標(biāo)記物CD90、CD73、CD11b、CD45、CD31。（2）抗壞血酸介導(dǎo)BMSC形成細(xì)胞片:取培養(yǎng)所得P4代BMSC,加入含有抗壞血酸的培養(yǎng)基中培養(yǎng)10天后形成可通過(guò)細(xì)胞刮刮取的片狀結(jié)構(gòu),分別加入成骨、成脂誘導(dǎo)培養(yǎng)基進(jìn)行分化功能鑒定,并通過(guò)CCK8法檢測(cè)、繪制加入與不加入抗壞血酸后的BMSCs生長(zhǎng)曲線;行HE、Masson染色觀察細(xì)胞片組織學(xué)結(jié)構(gòu)。（3）BMSC向內(nèi)皮樣細(xì)胞誘導(dǎo)及鑒定:采用含有血管內(nèi)皮細(xì)胞生長(zhǎng)因子（VEGF）、堿性成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子（b-FGF）合誘導(dǎo)因子方法將骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞誘導(dǎo)分化為內(nèi)皮樣細(xì)胞,觀察細(xì)胞形... 

【文章來(lái)源】：華中科技大學(xué)湖北省 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校

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【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

原代BMSC第3天（100×）

原代BMSC第7天（100×）

cP3代BMSC第3天（100×）


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