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殼聚糖—聚己內(nèi)酯作為組織工程軟骨支架的實(shí)驗(yàn)研究

發(fā)布時間:2021-08-17 19:01
  【目的】將殼聚糖和聚己內(nèi)酯二者的優(yōu)點(diǎn)結(jié)合起來制備殼聚糖-聚己內(nèi)酯復(fù)合多孔支架材料,研究其作為軟骨組織工程技術(shù)中軟骨細(xì)胞培養(yǎng)支架的可行性。【方法】消化分離1周齡SD大鼠四肢膝關(guān)節(jié)軟骨細(xì)胞,Ⅱ型膠原免疫組織化學(xué)染色鑒定軟骨細(xì)胞。取第二代軟骨細(xì)胞接種于自制的殼聚糖-聚己內(nèi)酯復(fù)合多孔支架上培養(yǎng),從光鏡和掃描電鏡觀察軟骨細(xì)胞在支架上的粘附、增殖和細(xì)胞外基質(zhì)的分泌情況。MTT檢測軟骨細(xì)胞在支架上的增殖情況。軟骨細(xì)胞-支架復(fù)合物HE染色觀察軟骨細(xì)胞在殼聚糖-聚己內(nèi)酯支架中的生長分布情況!窘Y(jié)果】制備的復(fù)合支架表面呈多孔狀,孔壁為纖維網(wǎng)狀結(jié)構(gòu),孔隙分布較均勻,孔隙連通性較好。Ⅱ型膠原免疫組化染色呈陽性結(jié)果,說明培養(yǎng)的細(xì)胞具有軟骨細(xì)胞特性。軟骨細(xì)胞能夠在殼聚糖-聚己內(nèi)酯復(fù)合支架上黏附、伸展、增殖和發(fā)揮正常功能,MTT測得軟骨細(xì)胞在支架中的增殖能力較強(qiáng)。HE染色顯示支架中軟骨細(xì)胞分布較均勻,呈三角形和多角形,細(xì)胞間相互接觸,隨培養(yǎng)時間的延長,支架中細(xì)胞增多,分布較均勻,排列較為規(guī)則。【結(jié)論】殼聚糖-聚己內(nèi)酯復(fù)合多孔支架與軟骨細(xì)胞具有較好的相容性,制備的殼聚糖-聚己內(nèi)酯復(fù)合多孔支架適合作為軟骨組織工程中的細(xì)... 

【文章來源】:華中科技大學(xué)湖北省 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校

【文章頁數(shù)】:47 頁

【學(xué)位級別】:碩士

【部分圖文】:

殼聚糖—聚己內(nèi)酯作為組織工程軟骨支架的實(shí)驗(yàn)研究


殼聚糖-聚己內(nèi)酯復(fù)合支架大體觀及掃描電鏡觀察

細(xì)胞支架,倒置顯微鏡,HE染色,復(fù)合物


第14天(圖7b)和第21天(圖7c)細(xì)胞支架復(fù)合物HE染色觀察(倒置顯微鏡x200)

軟骨,孔壁,細(xì)胞培養(yǎng),支架


圖3軟骨 細(xì) 胞 -支 架 復(fù) 合培 養(yǎng) 7 2h ( 倒置 顯 微 x2 0 0 )軟 骨 細(xì) 胞呈 球 形 單個 或 成串 沿 著支 架 孔壁 粘 附, 細(xì) 胞 周圍 可 見基 質(zhì) 分泌 。

【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]軟骨細(xì)胞外基質(zhì)/殼聚糖復(fù)合多孔支架和骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞構(gòu)建組織工程軟骨[J]. 王玉,彭江,張莉,陳繼鳳,周曉涵,黃靖香,許文靜,郭全義,盧世璧.  中國矯形外科雜志. 2010(20)
[2]聚己內(nèi)酯與左旋聚乳酸共聚物支架的細(xì)胞相容性測定及與軟骨細(xì)胞體外復(fù)合的實(shí)驗(yàn)研究[J]. 劉建華,王國海,徐棟梁.  醫(yī)學(xué)研究生學(xué)報. 2009(02)
[3]殼聚糖作為組織工程軟骨支架的實(shí)驗(yàn)研究[J]. 夏萬堯,曹誼林,商慶新,劉彥春,鐘偉.  中華顯微外科雜志. 2002(01)



本文編號:3348318

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