目的:設(shè)計(jì)制作組織工程軟骨培育系統(tǒng),體外周期性壓應(yīng)力條件下,以原代軟骨細(xì)胞和脫鈣骨基質(zhì)（DBM）材料構(gòu)建組織工程軟骨,初步觀察間歇性周期壓應(yīng)力對(duì)軟骨的增殖和分化影響,為智能化仿生組織工程培育系統(tǒng)的改進(jìn)積累實(shí)驗(yàn)依據(jù)。方法:1.設(shè)計(jì)制作組織工程軟骨培育系統(tǒng),包括:整機(jī),軟骨培養(yǎng)室,施力裝置和伸縮泵。2.酶消化法分離獲得軟骨細(xì)胞,倒置顯微鏡和甲苯胺藍(lán)以及番紅O染色觀察細(xì)胞形態(tài);參照Urist文獻(xiàn)中報(bào)道的改良方法[1]自制脫鈣骨基質(zhì)（DBM）材料.,掃描電鏡觀察自制的脫鈣骨基質(zhì)結(jié)構(gòu)表面及接種細(xì)胞后細(xì)胞生長情況。3.軟骨細(xì)胞和脫鈣骨基質(zhì)材料（DBM）復(fù)合構(gòu)建組織工程化軟骨組織,分別在動(dòng)態(tài)周期性應(yīng)力和靜態(tài)條件下培養(yǎng),取實(shí)驗(yàn)組和對(duì)照組樣品進(jìn)行如下檢測。常規(guī)石蠟切片,HE和甲苯胺藍(lán)染色、番紅O染色,Ⅱ型膠原免疫組化染色,光鏡下比較觀察靜態(tài)和動(dòng)態(tài)周期性應(yīng)力條件下培養(yǎng)的組織工程軟骨組織學(xué)差異;收集培養(yǎng)1、3、7,10和13天的標(biāo)本,按MTT試劑盒說明加樣,酶聯(lián)免疫儀490nm檢測OD值,估計(jì)各組標(biāo)本中細(xì)胞的相對(duì)數(shù),以評(píng)價(jià)周期性動(dòng)態(tài)應(yīng)力對(duì)軟骨細(xì)胞的增殖的影響;取培養(yǎng)5天的標(biāo)本,流式細(xì)胞儀檢測實(shí)驗(yàn)組和對(duì)照組結(jié)... 

【文章來源】：中國人民解放軍陸軍軍醫(yī)大學(xué)重慶市

【文章頁數(shù)】：75 頁

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

A軟骨培養(yǎng)室設(shè)計(jì)圖

B軟骨培養(yǎng)室實(shí)物圖

A電動(dòng)伸縮泵設(shè)計(jì)圖


本文編號(hào)：3333301