目的:構(gòu)建含hBMP2（human bone morphogenetic proteins 2）質(zhì)粒DNA的β-TCP/膠原（β-tricalcium phosphate/collagen）支架材料,并研究其對(duì)MC3T3-E1細(xì)胞成骨能力的影響。方法:制備納米級(jí)多孔β-TCP/膠原支架并負(fù)載含hBMP2目的 DNA基因及對(duì)照質(zhì)粒形成基因修飾的支架材料。建立MC3T3-E1細(xì)胞株與復(fù)合支架的體外培養(yǎng)體系。將其分為支架組hBMP2組（Z）對(duì)照質(zhì)粒組（Z0）,平皿hBMP2組（M）和對(duì)照質(zhì)粒組（M0）。復(fù)合培養(yǎng)后取樣通過(guò)掃描電鏡觀察支架表面形態(tài),成骨誘導(dǎo)1、3、7、14 d檢測(cè)不同濃度BMP2支架組和非支架組細(xì)胞堿性磷酸酶（ALP）的活性,并在成骨誘導(dǎo)的不同時(shí)間點(diǎn)采用實(shí)時(shí)熒光定量PCR的方法檢測(cè)Runx2、OCN、ALP、OPN等成骨相關(guān)標(biāo)志基因表達(dá)。檢測(cè)結(jié)果進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析。結(jié)果:含hBMP2為目的基因的質(zhì)粒DNA修飾納米β-TCP/I型膠原溶液復(fù)合材料表面呈多孔樣結(jié)構(gòu);支架組和平皿組中加入hBMP2質(zhì)粒DNA都能提高ALP的活性以及成骨相關(guān)標(biāo)志基因的表達(dá);支架組對(duì)MC3T3-E1細(xì)胞成骨促... 

【文章來(lái)源】：實(shí)用口腔醫(yī)學(xué)雜志. 2017,33(05)北大核心CSCD

【文章頁(yè)數(shù)】：5 頁(yè)

【文章目錄】：
1 材料與方法
    1.1 實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)與材料分組
    1.2 實(shí)驗(yàn)方法
        1.2.1 合成帶有h BMP2基因的質(zhì)粒DNA
        1.2.2 負(fù)載h BMP2為目的基因質(zhì)粒DNA修飾納米β-TCP/膠原溶液復(fù)合材料
        1.2.3 MC3T3-E1細(xì)胞培養(yǎng)
        1.2.4 材料與細(xì)胞復(fù)合培養(yǎng)
    1.3 檢測(cè)方法與指標(biāo)
        1.3.1 形態(tài)學(xué)觀察
        1.3.2 堿性磷酸酶活性 (ALP) 檢測(cè)
        1.3.3 實(shí)時(shí)熒光定量PCR檢測(cè)
    1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析
2 結(jié)果
    2.1 形態(tài)學(xué)觀察結(jié)果
        2.1.1 支架電鏡圖
        2.1.2 h BMP2轉(zhuǎn)染效率
    2.2 堿性磷酸酶ALP活性檢測(cè)結(jié)果
    2.3 實(shí)時(shí)熒光定量PCR檢測(cè)細(xì)胞成骨相關(guān)基因表達(dá)結(jié)果
3 討論


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]骨形成蛋白-2基因修飾的β磷酸三鈣/膠原復(fù)合材料修復(fù)顱骨缺損[J]. 李娟,鄭闈穎,盧巖,俞蘭,林軍.  材料科學(xué)與工程學(xué)報(bào). 2013(02)
[2]大鼠脂肪干細(xì)胞體外培養(yǎng)及成骨誘導(dǎo)分化研究[J]. 梁麗華,李龍,趙建輝,孫道才,劉乃彬,宋應(yīng)亮,焦鐵軍.  實(shí)用口腔醫(yī)學(xué)雜志. 2012(03)
[3]骨形成蛋白-2轉(zhuǎn)染MG-63細(xì)胞增加其對(duì)殼聚糖膜的粘附[J]. 范麗,盧巖,林慧平,姚航平,林軍.  材料科學(xué)與工程學(xué)報(bào). 2011(06)
[4]基于脂肪干細(xì)胞I型膠原凝膠PLGA-β-TCP支架的新型仿生骨組織工程復(fù)合體的構(gòu)建及生物學(xué)性能[J]. 郝偉,胡蘊(yùn)玉,姜明,呂榮,王軍,趙廷寶.  第四軍醫(yī)大學(xué)學(xué)報(bào). 2008(07)



本文編號(hào)：3278362