串聯(lián)黃色熒光蛋白在大鼠神經(jīng)細(xì)胞中表達(dá)
發(fā)布時間:2017-04-24 03:05
本文關(guān)鍵詞:串聯(lián)黃色熒光蛋白在大鼠神經(jīng)細(xì)胞中表達(dá),,由筆耕文化傳播整理發(fā)布。
【摘要】:神經(jīng)連接組學(xué)是一門新興學(xué)科,是研究和繪制出大腦神經(jīng)細(xì)胞連接(即突觸)的圖譜。神經(jīng)連接組學(xué)要解決的首要問題是神經(jīng)細(xì)胞的高亮度和高精度標(biāo)記,以致于成像設(shè)備能采集到樹突棘和軸突末梢。本課題組探索神經(jīng)細(xì)胞的分子標(biāo)記技術(shù)。為了實(shí)現(xiàn)高亮度標(biāo)記,構(gòu)建了多種串聯(lián)黃色熒光蛋白質(zhì)粒;為了實(shí)現(xiàn)標(biāo)記樹突棘,構(gòu)建了帶有定位序列的熒光蛋白質(zhì)粒。作者將在培養(yǎng)的神經(jīng)細(xì)胞中鑒定這些質(zhì)粒是否能實(shí)現(xiàn)目的。 人們已經(jīng)建立了胎鼠神經(jīng)細(xì)胞的體外培養(yǎng)方法,作者獲得了多種黃色熒光蛋白質(zhì)粒和帶有定位序列的熒光蛋白質(zhì)粒。課題的目的是觀察多種熒光蛋白質(zhì)粒在神經(jīng)細(xì)胞中的表達(dá),帶有定位序列的熒光蛋白質(zhì)粒在神經(jīng)細(xì)胞中的表達(dá)。實(shí)驗(yàn)探索是否熒光蛋白的亮度提高,是否熒光蛋白在神經(jīng)纖維中表達(dá)。通過查閱文獻(xiàn)和練習(xí),借鑒本實(shí)驗(yàn)室胎鼠神經(jīng)細(xì)胞體外培養(yǎng)方法,掌握了神經(jīng)細(xì)胞的體外培養(yǎng)方法,培養(yǎng)了神經(jīng)細(xì)胞,獲得了生長狀態(tài)良好的神經(jīng)細(xì)胞。通過查閱文獻(xiàn),采用脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染神經(jīng)細(xì)胞的方法,轉(zhuǎn)染了Hela細(xì)胞和神經(jīng)細(xì)胞,使用熒光顯微鏡觀察熒光蛋白表達(dá)情況。結(jié)果觀察到神經(jīng)細(xì)胞和Hela細(xì)胞表達(dá)熒光蛋白,觀察到熒光蛋白定位于神經(jīng)細(xì)胞突起上的纖維狀結(jié)構(gòu),表明多種黃色熒光蛋白質(zhì)粒和帶有定位序列的熒光蛋白質(zhì)粒在離體培養(yǎng)的神經(jīng)細(xì)胞中正常表達(dá),帶有定位序列的熒光蛋白質(zhì)粒能在神經(jīng)細(xì)胞突起上的纖維狀結(jié)構(gòu)中表達(dá)。本文結(jié)論多種黃色熒光蛋白質(zhì)粒和帶有定位序列的熒光蛋白質(zhì)?赡茉谏窠(jīng)細(xì)胞中正常表達(dá),帶有定位序列的熒光蛋白質(zhì)?赡苣軜(biāo)記神經(jīng)細(xì)胞突起上的纖維狀結(jié)構(gòu)。
【關(guān)鍵詞】:神經(jīng)細(xì)胞 離體培養(yǎng) 黃色熒光蛋白質(zhì)粒 脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染 神經(jīng)纖維
【學(xué)位授予單位】:華中科技大學(xué)
【學(xué)位級別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2013
【分類號】:R318.04
【目錄】:
- 摘要4-5
- Abstract5-9
- 1 緒論9-16
- 1.1 總結(jié)嗅覺通路標(biāo)記技術(shù)9-13
- 1.2 簡介熒光蛋白應(yīng)用13-14
- 1.3 論文研究的主要內(nèi)容14-16
- 2 神經(jīng)細(xì)胞的培養(yǎng)16-26
- 2.1 材料與儀器16-17
- 2.2 實(shí)驗(yàn)方法與操作17
- 2.3 實(shí)驗(yàn)結(jié)果17-18
- 2.4 討論18-26
- 3 串聯(lián)黃色熒光蛋白重組質(zhì)粒在神經(jīng)細(xì)胞中的表達(dá)26-35
- 3.1 材料26
- 3.2 方法,結(jié)果26-30
- 3.3 討論30-35
- 4 串聯(lián)黃色熒光蛋白重組質(zhì)粒在神經(jīng)細(xì)胞中的定位表達(dá)35-49
- 4.1 材料36
- 4.2 方法,結(jié)果36-45
- 4.3 討論45-49
- 5 總結(jié)與展望49-51
- 5.1 總結(jié)49
- 5.2 展望49-51
- 致謝51-52
- 參考文獻(xiàn)52-55
【參考文獻(xiàn)】
中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前3條
1 劉默芳,王恩多,server.shcnc.ac.cn;綠色熒光蛋白[J];生物化學(xué)與生物物理進(jìn)展;2000年03期
2 李艷玲;李向?qū)?周煒;曾紹群;劉曼;駱清銘;;培養(yǎng)海馬神經(jīng)元網(wǎng)絡(luò)學(xué)習(xí)模型的構(gòu)建[J];生物化學(xué)與生物物理進(jìn)展;2007年02期
3 楊杰;張智紅;駱清銘;;熒光蛋白研究進(jìn)展[J];生物物理學(xué)報(bào);2010年11期
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本文編號:323454
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