發(fā)布時間：2021-06-13 07:05

　　研究目的血管生成在生物體內(nèi)損傷修復(fù)起著重要的作用。已有動物實驗證實硫酸銅能促進角膜血管生成。同時硫酸鈣也能促進脛骨骨缺損周圍血管形成。另外含銅生物陶瓷材料證實具備促成骨效應(yīng)。于是本實驗制備硫酸銅及硫酸鈣復(fù)合材料,旨在驗證復(fù)合材料理化表征及促血管和骨修復(fù)效應(yīng)。方法1、含銅硫酸鈣膠合劑的制備、物理表征及體外降解實驗通過按照固定固液比例物理混合α-半水硫酸鈣粉末和不同濃度的五水硫酸銅溶液,通過制模得到圓柱狀含銅硫酸鈣復(fù)合材料樣品。檢測材料表征及了解體外降解特性。2、含銅硫酸鈣骨水泥對人臍靜脈內(nèi)皮細胞（HUVECs）及骨髓間充質(zhì)干細胞（BMSCs）增值分化、遷移的影響按照國際標準制備不同濃度復(fù)合材料浸提液,以浸提液干預(yù)HUVECs及BMSCs,通過CCK-8實驗檢測細胞增值能力;劃痕實驗及成管實驗檢測浸提液對HUVECs遷移和成管能力;PCR（Qrt-PCR）檢測相關(guān)血管基因（VEGF/HIF-1α/eNOS）和相關(guān)成骨分化基因（OCN、ALP、RUNX2 及 BSP）表達;細胞免疫熒光檢測相關(guān)蛋白（VEGF/HIF-1α）表達;茜素紅染色檢測浸提液對BMSCs礦化的影響。3、復(fù)合材料對大鼠脛... 

【文章來源】：南方醫(yī)科大學(xué)廣東省

【文章頁數(shù)】：93 頁

【學(xué)位級別】：博士

【部分圖文】：

圖２－１不同含銅量復(fù)合材料浸提液干預(yù)ＨＵＶＥＣｓ細胞的增殖情況??（ｘ士ｓ，ｎ＝５，＊表示與同一培養(yǎng)時間Ｃｕ?（０）組相比，有統(tǒng)計學(xué)意義Ｐ＜０．０５；?＃表示同一組??

?博士學(xué)位論文???ｓｅ＾ｏ－ｊ?ｓ？１００］??ｒｅ?？?？??Ｓ?Ｔ?Ｓ?８０－?Ａ－??丨?ｋｌｉｉ?ｉＬｎｉ??Ａ?Ｇｒｏｕｐ?ｂ?Ｇｒｏｕｐ??圖２－３不同材料組浸提液干預(yù)后ＨＵＶＥＣｓ細胞的劃痕愈合率??Ｆｉｇｕｒｅ?２－３?（Ａ）?７＇ｈｅ?ｑｕａｎｔｉｔａｔｉｖｅ?ａｎａｌｙｓｉｓ?ｏｆ?Ｒｅｌａｔｉｖｅ?ｍｉｇｒａｔｉｏｎ?ａｒｅａ?ｗａｓ?ｍｅａｓｕｒｅｄ?ａｔ?Ｉ６ｈ．?Ｍｅａｎ??±?ＳＤ；?ｎ＝３．＾Ｐ＜０．０５?Ｃｏｍｐａｒｅｄ?ｔｏ?Ｃｕ（０）．（Ｂ）?Ｔｈｅ?ｑｕａｎｔｉｔａｔｉｖｅ?ａｎａｌｙｓｉｓ?ｏｆ?Ｒｅｌａｔｉｖｅ?ｍｉｇｒａｔｉｏｎ?ａｒｅａ??ｗａｓ?ｍｅａｓｕｒｅｄ?ａｔ?２４ｈ，?Ｍｅａｎ?土?ＳＤ；?ｎ＝３．?＊卩＜０．０５?Ｃｏｍｐａｒｅｄ?ｔｏ?Ｃｕ（０），％Ｐ＜０．０５?Ｃｏｍｐａｒｅ?ｔｏ??Ｃｕ（Ｏ．ｌ）??３．４不同濃度銅摻雜硫酸鈣對血管內(nèi)皮細胞成管活力的結(jié)果??不同材料的浸提液對內(nèi)皮細胞的成管活力測定如圖２－４：結(jié)果表明：硫酸鈣??及不同濃度含銅硫酸鈣浸提液對內(nèi)皮細胞都有不同程度的成管能力，但內(nèi)皮細??胞在Ｃｕ（０．５）組材料浸提液溶解產(chǎn)物中孵育１２小時后形成細長的管狀結(jié)構(gòu)比其余??各組更完全及完整，內(nèi)皮細胞在其余各組材料溶解產(chǎn)物形成不完全或零星的管??狀結(jié)構(gòu)，在Ｃ’ｕ（２．５）組最明顯；所以成管能力Ｃｕ（０．５）最佳，Ｋ？次是Ｃｕ（Ｏ．ｌ）組、??Ｃｕ（ｌ）組、Ｃｕ（０）組，Ｃｕ（２．５）組最差。??Ｃｕ（０）?Ｃｕ（Ｏ．ｌ）?Ｃｕ（０．５）??＾＊ｖｖ；?ｊ：?＾??——■?－?４?—??＇＊ｒｌ??２９??

?第二部分不同濃度含銅硫酸鈣對人臍靜脈內(nèi)皮細胞增殖分化及遷移的影響???Ｃｕ（ｌ）?Ｃｕ（２．５）??；？?？？Ｊ?ｐ?５?１?ｒ／－＇?ｒ．?＊?＼ｗ??攀．?＇■一?一??圖２－４成管活力實驗檢測ＨＵＶＥＣｓ在不同濃度含銅硫酸鈣浸提液中培養(yǎng)�。玻韬蟮某晒芮闆r??Ｆｉｇｕｒｅ?２－４?Ｒｅｐｒｅｓｅｎｔａｔｉｖｅ?ｐｈｏｔｏｇｒａｐｈｓ?ｓｈｏｗｉｎｇ?ｔｈｅ?ｅｆｆｅｃｔ?ｏｆ?ｔｈｅ?ｉｏｎｉｃ?ｄｉｓｓｏｌｕｔｉｏｎ?ｐｒｏｄｕｃｔ?ｏｆ?ｔｈｅ??ｆｉｖｅ?ｇｒｏｕｐｓ?ｏｆ?ｃｏｍｐｏｓｉｔｅ?ｏｎ?ｔｈｅ?ｔｕｂｕｌｅ?ｆｏｒｍａｔｉｏｎ?ｏｆ?ＨＵＶＥＣｓ?ａｆｔｅｒ?ｉｎｃｕｂａｔｉｏｎ?ｆｏｒ?１２ｈ??３．５?ＶＥＧＦ、出Ｆ－ｌ＜ｘ和ｅＭ）Ｓ的基因表達結(jié)果??圖２－５中ＰＣＲ結(jié)果表明：在第４天，硫酸鈣和含銅復(fù)合材料浸提液產(chǎn)物培養(yǎng)??基干預(yù)的ＨＵＶＥＣｓ孵育提取物中，ＶＥＧＦ和ＨＩＦ－ｌａ的基因表達隨著復(fù)合材料中??銅含量的增加而增加。與Ｃｕ?（０）相比，Ｃｕ?（２．５）顯著增加ＶＥＧＦ和ＨＩＦ－ｌａ??的表達２０倍以上，并且組間具有統(tǒng)計學(xué)差異。但ｅＮＯＳ表達的結(jié)果表明，材料??浸提液的溶解離子產(chǎn)物對基因的表達略有增強，但組間無明顯統(tǒng)計學(xué)差異。在??一定程度上，我們可以得出結(jié)論，銅與硫酸鈣的結(jié)合增強了它們促血管生成的??潛能。??ＶＥＧＦ?ＨＩＦ－１ａ?ｇ?４??Ｓ５０！?１?－ｒ??＞?ｉ－?ｉ３－??〇?３０－?°?〇??｜?丄?１３〇－?■?ｇ?２－?ｗｍ?＾??ｉ：ｉ：』ｌ?［ｌｉｉｎｌｉ??圣?〇?Ｉ?１?．??．?圣?〇＇?Ｉ??１?■


本文編號：3227244