背景:軟骨組織工程中,體外擴增的軟骨細(xì)胞極易發(fā)生去分化,表現(xiàn)為細(xì)胞表型消失,合成細(xì)胞外基質(zhì)能力下降�；|(zhì)金屬蛋白酶（matrix metallo-proteinase, MMP）是一組廣泛存在于各種組織、可降解細(xì)胞外基質(zhì)的蛋白酶,與軟骨細(xì)胞去分化、軟骨退變關(guān)系密切。RNA干擾（RNA interference, RNAi）是指將與靶基因同源序列的雙鏈RNA導(dǎo)入細(xì)胞,在細(xì)胞內(nèi)與靶基因的信使RNA（messenger RNA, mRNA）結(jié)合并迅速將其降解,從而抑制該基因表達(dá)。殼聚糖（chitosan, CS）是一種帶正電荷的大分子,在一定條件下可與帶負(fù)電荷的核酸結(jié)合,形成納米級別的聚合物可被細(xì)胞胞吞。本研究擬使用攜載MMP-3和13的小干擾RNA（small interfering RNA, siRNA）質(zhì)粒的殼聚糖納米微粒轉(zhuǎn)染體外培養(yǎng)的種子細(xì)胞,試圖抑制去分化相關(guān)基因表達(dá),培養(yǎng)出表型優(yōu)良、穩(wěn)定的軟骨細(xì)胞,防止再生軟骨細(xì)胞退變。實驗一軟骨細(xì)胞的體外培養(yǎng)與鑒定目的:通過體外培養(yǎng)兔關(guān)節(jié)軟骨細(xì)胞,觀察軟骨細(xì)胞的形態(tài)、體外培養(yǎng)時維持細(xì)胞表型的能力,選出最適合作軟骨組織工程的種子細(xì)胞。方法:利用貫... 

【文章來源】：中國人民解放軍空軍軍醫(yī)大學(xué)陜西省 211工程院校

【文章頁數(shù)】：80 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【部分圖文】：

軟骨細(xì)胞HE染色

軟骨細(xì)胞甲苯胺藍(lán)染色

軟骨細(xì)胞Ⅰ型、Ⅱ型膠原免疫組化染色(×50)

【參考文獻】：
期刊論文
[1]兔軟骨細(xì)胞的分離培養(yǎng)及其生物學(xué)特征的檢測[J]. 宋鴻,陳煒.  遵義醫(yī)學(xué)院學(xué)報. 2008(06)
[2]殼聚糖納米粒作為基因載體的研究:影響轉(zhuǎn)染效率的因素[J]. 張淑蕓,袁喜英,楊曉容,宗莉.  中國新藥雜志. 2008(17)
[3]兔關(guān)節(jié)軟骨細(xì)胞的分離和培養(yǎng)[J]. 王斌,楊沁,路景濤,周愛武,陳敏珠.  中國藥理學(xué)通報. 1998(06)
[4]關(guān)節(jié)軟骨細(xì)胞的分離及培養(yǎng)技術(shù)[J]. 于長隆,曲綿域,陸明.  中國運動醫(yī)學(xué)雜志. 1984(03)



本文編號：3223949