細胞中氧化還原穩(wěn)態(tài)的失衡與癌癥、神經(jīng)退行性疾病、心血管疾病等眾多疾病的發(fā)展緊密關(guān)聯(lián)。氧化還原酶是維護細胞氧化還原穩(wěn)態(tài)的重要組成部分。探究細胞中氧化還原酶的功能和水平對疾病的診斷和治療具有重要的意義。雙光子熒光成像技術(shù)以其較高的靈敏度、無損快速分析、高時空分辨率和深層組織穿透能力成為檢測和成像復(fù)雜生物系統(tǒng)中活性物種的有力工具。據(jù)此本論文基于羥苯基多烯吡啶鹽骨架共軛連接響應(yīng)基團的策略設(shè)計酶激活的新型雙光子熒光探針。全文主要的創(chuàng)新點和內(nèi)容如下:（1）NADPH:醌氧化還原酶（NQO1）在醌解毒作用中扮演著重要的角色,也是潛在的治療靶點,高時空示蹤和成像NQO1對于關(guān)聯(lián)NQO1的疾病的早期診斷以及監(jiān)測治療效率是迫切需求的。據(jù)此我們設(shè)計了一類具有推拉結(jié)構(gòu)和不同共軛鏈長短的羥苯基多烯吡啶鹽熒光團。在該類熒光團上通過嫁接響應(yīng)基團三甲基鎖醌構(gòu)建探針,實現(xiàn)以分子內(nèi)電荷轉(zhuǎn)移機理成像NQO1。在系統(tǒng)篩選后,我們鑒定了探針QBMP為檢測線粒體中NQO1的比率型雙光子熒光探針,具有優(yōu)良的性質(zhì):包括優(yōu)異的選擇性、快速的響應(yīng)（4 min）、大的斯托克斯位移（162 nm）、超低的檢測限（0.9 nM）和深層組織穿透... 

【文章來源】：蘭州大學甘肅省 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校

【文章頁數(shù)】：118 頁

【學位級別】：碩士

【文章目錄】：
中文摘要
Abstract
縮略語表
第一章 文獻綜述
    1.1 前言
    1.2 小分子酶熒光探針設(shè)計策略
        1.2.1 底物型酶熒光探針
        1.2.2 非底物型酶熒光探針
        1.2.3 小分子酶熒光探針的熒光信號轉(zhuǎn)換機制設(shè)計
        1.2.4 酶熒光探針其他特點
    1.3 氧化還原酶在疾病中的檢測方法
    1.4 NAD（P）H:醌氧化還原酶（NQO1）
        1.4.1 NQO1的介紹
        1.4.2 NQO1熒光探針
        1.4.3 底物型NQO1熒光探針
        1.4.4 非底物型NQO1熒光探針
    1.5 硫氧還蛋白酶（TrxR）
        1.5.1 硫氧還蛋白酶的介紹
        1.5.2 底物型TrxR熒光探針
        1.5.3 非底物型TrxR熒光探針
    1.6 雙光子吸收截面
    1.7 論文選題依據(jù)及擬解決科學問題
    參考文獻
第二章 發(fā)展推拉結(jié)構(gòu)的羥苯基多烯吡啶鹽熒光團用于比率型檢測線粒體NQO1的雙光子熒光探針
    2.1 前言
    2.2 結(jié)果與討論
        2.2.1 熒光團和探針的合成以及篩選
        2.2.2 確定比率型熒光探針QBMP用于選擇性檢測NQO1
        2.2.3 機理研究
        2.2.4 細胞毒活性和亞細胞器定位研究
        2.2.5 生物應(yīng)用:區(qū)分癌細胞和正常細胞
        2.2.6 生物應(yīng)用:揭示在PD中降低的NQO1 活性以及發(fā)展NQO1誘導(dǎo)劑作為神經(jīng)保護試劑
        2.2.7 雙光子在組織成像中的應(yīng)用
    2.3 本章小結(jié)
    2.4 方法和材料
        2.4.1 實驗材料
        2.4.2 主要儀器
    2.5 實驗方法
        2.5.1 探針的合成以及譜圖數(shù)據(jù)
        2.5.2 探針的紫外和熒光光譜
        2.5.3 探針的動力學實驗
        2.5.4 細胞培養(yǎng)
        2.5.5 細胞毒活性實驗
        2.5.6 細胞熒光成像
        2.5.7 熒光量子產(chǎn)率測定
        2.5.8 雙光子吸收截面的測定
        2.5.9 組織成像
    參考文獻
第三章 基于羥苯基多烯吡啶鹽骨架設(shè)計比率型雙光子熒光探針用于檢測和成像活細胞中TrxR活性
    3.1 前言
    3.2 結(jié)果與討論
        3.2.1 探針的合成
        3.2.2 紫外-可見光譜分析
        3.2.3 探針的熒光光譜性質(zhì)
        3.2.4 探針DSMP的光譜性質(zhì)研究
        3.2.6 探針的細胞毒活性研究
        3.2.7 線粒體靶向?qū)嶒?br>        3.2.8 特異性檢測細胞內(nèi)的TrxR2
        3.2.9 生物應(yīng)用:揭示在PD中降低的TrxR活性
    3.3 小結(jié)
    3.4 儀器和試劑
        3.4.1 實驗材料
        3.4.2 主要儀器
    3.5 實驗方法
        3.5.1 探針的合成及其波譜數(shù)據(jù)
        3.5.2 探針的紫外和熒光光譜
        3.5.3 細胞培養(yǎng)
        3.5.4 細胞毒活性實驗（MTT）
        3.5.5 細胞熒光成像
    參考文獻
第四章 全文總結(jié)及其展望
    4.1 全文總結(jié)
    4.2 工作展望
部分化合物譜圖
致謝


【參考文獻】：
期刊論文
[1]Affinity-guided protein conjugation: the trilogy of covalent protein labeling, assembly and inhibition[J]. Yongsheng Yu,Jiang Xia.  Science China（Chemistry）. 2016(07)
[2]雙光子吸收截面的測量方法[J]. 何國華,王剛,葉莉華,崔一平.  激光雜志. 2003(06)



本文編號：3152664