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高靈敏檢測(cè)單細(xì)胞外分泌乳酸及熒光素酶的微液滴技術(shù)

發(fā)布時(shí)間:2021-03-18 00:38
  癌癥和細(xì)菌感染都給人類生命健康帶來(lái)重大威脅。腫瘤由于其高復(fù)發(fā)性、高轉(zhuǎn)移性和早期無(wú)癥狀等特點(diǎn)一直困擾著科研工作者,所以需要迫切開(kāi)發(fā)出針對(duì)癌癥的早期防御、治療和預(yù)后的新方法,在細(xì)菌感染病例中,雖然普通細(xì)菌感染可以被人體免疫系統(tǒng)清除,但在特定的條件下,部分細(xì)菌可以欺騙人體免疫系統(tǒng),隱藏自身逃避清除,并對(duì)人體免疫細(xì)胞產(chǎn)生殺傷。目前,對(duì)于腫瘤和細(xì)菌感染的研究方法有很多是基于大量群體細(xì)胞來(lái)進(jìn)行檢測(cè)和診斷,運(yùn)用這些傳統(tǒng)手段會(huì)導(dǎo)致細(xì)胞個(gè)體間的差異被掩蓋,而且對(duì)于樣品中細(xì)胞/細(xì)菌數(shù)量少的情況下容易產(chǎn)生假陰性結(jié)果。而基于單細(xì)胞技術(shù)的分析方法可以提供細(xì)胞個(gè)體間差異的關(guān)鍵信息,因此成為生物醫(yī)學(xué)領(lǐng)域中的研究熱點(diǎn)。微流控芯片技術(shù)的進(jìn)步為單細(xì)胞實(shí)驗(yàn)提供了重要平臺(tái),具有靈敏性高、樣品消耗少、檢測(cè)方便、性價(jià)比高等優(yōu)點(diǎn)。本論文將包裹了單細(xì)胞的微液滴與光學(xué)檢測(cè)技術(shù)結(jié)合,來(lái)發(fā)展對(duì)重要生物分子進(jìn)行高靈敏分析的方法,并初步探討了腫瘤細(xì)胞在單細(xì)胞水平上的異質(zhì)性。本論文包括四個(gè)章節(jié):第一章:簡(jiǎn)要概述了微流控技術(shù)的發(fā)展歷程、芯片制備方法、優(yōu)勢(shì)特點(diǎn)和應(yīng)用領(lǐng)域,隨后對(duì)其中有代表性的微液滴技術(shù)進(jìn)行重點(diǎn)介紹,對(duì)于其液滴生成原理、分類、方法和應(yīng)... 

【文章來(lái)源】:蘇州大學(xué)江蘇省

【文章頁(yè)數(shù)】:100 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】:碩士

【部分圖文】:

高靈敏檢測(cè)單細(xì)胞外分泌乳酸及熒光素酶的微液滴技術(shù)


圖1.1多種微流控芯片實(shí)物圖

壓印,模壓,法相,納米


利用光刻法制作微流控芯片,首先需要在硅晶片或者金屬表面旋涂上光刻??膠(常用SU-8抗蝕劑)并進(jìn)行光刻?,其次使用配套顯影液除去未交聯(lián)的光刻膠,??并在其表面用脫模劑(常用硅烷偶聯(lián)劑)進(jìn)行處理,方便后續(xù)脫模。在光刻法的分??支中還有一種軟光刻法,通常采用聚二甲基硅氧烷(PDMS,低聚物和交聯(lián)劑的混??合溶液)或者Ecoflex倒在母板上,震除氣泡后進(jìn)行熱固化,不同溫度熱固化時(shí)間??不同,通常約為l-6h。固化后,將PDMS輕剝離模具,超聲清洗后可與其他基底??材料結(jié)合成為新的模板。如圖1.2將光刻法與噴墨打印技術(shù)相結(jié)合,Chen等人[25]??報(bào)告了一種制造包含電潤(rùn)濕閥和電化學(xué)轉(zhuǎn)導(dǎo)的柔性微流體裝置的方法,該制造工??藝使用光刻技術(shù)來(lái)制造SU-8母版,并通過(guò)熱固化PDMS來(lái)制造用于納米壓印光??刻的沖壓模板,設(shè)備由兩個(gè)柔性PET層組成,形成一個(gè)柔性的微流體設(shè)備,同時(shí)??使用UV-Nanoimprint平版印刷術(shù)(UV-NIL)在PET薄膜上構(gòu)造高保真度的微通??道,在PET膜上進(jìn)行光子燒結(jié),將包含膜的電極直接鍵合在包含通道的另一層以??形成密封的自動(dòng)輸液微流體裝置。??III??lak^cl?primed?clcctnulc'??^?,n:I:??1?1?1?hm??n?MictoIIuhIk?<kvicv??viu.?Nil.??caln|??u?Ptui?〇FC?i??IVvckipnwnl?tii?PDMS?prccur?〇f?on?Si?outkl?vi?MtctuOutJic?channel??圖1.2采用納米壓印光刻技扎和熱模壓法相結(jié)合,將噴墨打印的電極和微流體通道粘合在一??起以形成微流體設(shè)備的

微流控芯片,刻蝕,激光,生物醫(yī)學(xué)


?=r二:一?=:?〇??Sample?_?Laser?beam??1064?nm,10?ps??Laser?i?-:??,? ̄'?I? ̄ ̄?Working??_j?Mirror?(?platform??二….……]?廣r ̄?L? ̄?i??b?50?nm?55?nm?60?pm??ji!???p'i?I?j?I?'?:?a?E?^?■??I!I?lii。?-?-?-??65?jim?70?pm?75?pm??圖1.3激光刻蝕法加工微流控芯片。(a)皮秒激光加工系統(tǒng)。(b)以不同的激光線間隔在太??陽(yáng)能破璃表面上制成的周期性微溝槽的SEM圖像丨26】。??Figure?1.3?Laser?etched?microfluidic?chip,?(a)?Picosecond?laser?processing?system,?(b)?SEM?images??of?periodic?microgrooves?made?on?the?surface?of?solar?glass?at?different?laser?line?intervals126^.??1.2.3微流控技術(shù)的應(yīng)用??近年來(lái),自主研發(fā)的微流控芯片已取得了階段性的突破進(jìn)展,逐漸成為各領(lǐng)域??的焦點(diǎn)。此技術(shù)可與許多檢測(cè)方法相結(jié)合,并應(yīng)用于合成納米生物材料、細(xì)胞分析??檢測(cè)、生物醫(yī)學(xué)、疾病診斷和環(huán)境檢測(cè)等領(lǐng)域[〃281。??1.2.3.1在模擬人工器官方面的應(yīng)用??微流控技術(shù)可以與材料學(xué)和生物醫(yī)學(xué)相結(jié)合,實(shí)現(xiàn)對(duì)病灶的精準(zhǔn)治療,尤其是??在組織工程支架、人工器官等方面,均表現(xiàn)出極大的應(yīng)用前景[29 ̄3(


本文編號(hào):3087939

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