蛋白質(zhì)磷酸化在新陳代謝、細(xì)胞信號(hào)通訊、細(xì)胞增殖與分化等生命活動(dòng)中起著非常重要的作用。據(jù)統(tǒng)計(jì)，有高達(dá)30%的人類蛋白要經(jīng)過蛋白激酶的修飾，從而調(diào)節(jié)細(xì)胞的生理生化功能。而異常的蛋白質(zhì)磷酸化與許多疾病密切相關(guān)，如許多慢性炎癥性疾病、癌癥、糖尿病和老年性癡呆等。因此，了解蛋白激酶的作用機(jī)理并找出有潛在功能的抑制劑，對(duì)疾病的診斷、治療和藥物的研發(fā)具有非常重要的指導(dǎo)意義。傳統(tǒng)的蛋白激酶活性檢測(cè)方法有很多，盡管這些方法很有效，但大多具有操作復(fù)雜、靈敏度不高、需放射性標(biāo)記、需昂貴儀器等缺點(diǎn)，所以發(fā)展新的蛋白激酶活性分析方法是十分必要的。電化學(xué)和電化學(xué)發(fā)光生物傳感器具有裝置簡(jiǎn)單、靈敏度高、選擇性好等特點(diǎn)而受到研究者們的廣泛關(guān)注。特別是隨著納米技術(shù)的發(fā)展，各種功能化納米材料被逐漸引入電化學(xué)及電化學(xué)發(fā)光生物傳感器的構(gòu)建。由于納米材料本身所具備的小尺寸效應(yīng)、大比表面積、良好的生物相容性和表面易修飾等優(yōu)良特性，尤其是在檢測(cè)DNA、蛋白質(zhì)、小分子等方面所表現(xiàn)出的信號(hào)增強(qiáng)效應(yīng)，為電化學(xué)及電化學(xué)發(fā)光生物傳感器性能的進(jìn)一步改善和優(yōu)化帶來了新契機(jī)�；诖�，本論文以發(fā)展蛋白激酶分析新方法為目標(biāo)，利用納米材料信號(hào)增強(qiáng)作用，構(gòu)... 

【文章來源】：湖南大學(xué)湖南省 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校

【文章頁數(shù)】：68 頁

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

基于量子點(diǎn)和熒光染料之間的FRET檢測(cè)蛋白激酶活性的原理圖

.1 電化學(xué)生物傳感器概述國(guó)際純粹與應(yīng)用化學(xué)聯(lián)合會(huì)（IUPAC）規(guī)定生物傳感器的定義為：生物傳感一類將具有分子識(shí)別功能的生物活性材料如酶、核酸、蛋白質(zhì)、微生物、細(xì)細(xì)胞器、動(dòng)植物組織以及抗原和抗體等作為敏感元件，來識(shí)別目標(biāo)物分子，過換能器，將生化反應(yīng)信號(hào)轉(zhuǎn)化為相應(yīng)的光學(xué)、熱學(xué)、電學(xué)等信號(hào)的一種分試裝置[20, 21]。所以生物傳感器主要由三部分構(gòu)成：其一是分子識(shí)別元件（感），一般由具有分子識(shí)別能力的生物活性物質(zhì)組成；其二是信號(hào)轉(zhuǎn)換器（換能，指將生物識(shí)別過程轉(zhuǎn)化為可檢測(cè)的電、光、熱等信號(hào)；最后是數(shù)據(jù)分析系統(tǒng)，測(cè)到的理化信號(hào)進(jìn)行處理，得出響應(yīng)大小與待測(cè)物含量的定量關(guān)系，從而達(dá)析檢測(cè)的目的。電化學(xué)生物傳感器（如圖 1.2）是指利用生物活性材料作為敏感元件來選擇識(shí)別目標(biāo)分子并將目標(biāo)分子捕獲到電極表面，以各種電極（固體電極、離子性電極、氣敏電極等）作為轉(zhuǎn)換元件，通過輸出電勢(shì)、電流、電阻或電容等量信號(hào)作為響應(yīng)信號(hào)，從而對(duì)目標(biāo)物含量進(jìn)行分析。

碩士學(xué)位論文助外加的標(biāo)記物來指示識(shí)別前后電化學(xué)信號(hào)的變化。根據(jù)標(biāo)記物的活性物質(zhì)標(biāo)記（亞甲藍(lán)、二茂鐵）、酶標(biāo)記（辣根過氧化物酶、葡萄納米材料標(biāo)記（金納米顆粒、量子點(diǎn)）等。如 Kang 等[22]通過在 DN標(biāo)記電活性物質(zhì)，檢測(cè)電活性基團(tuán)在雜交前后所產(chǎn)生的電化學(xué)信號(hào)變 DNA 靈敏地分析。Li 等[23]利用 Hg2+調(diào)節(jié)內(nèi)切酶切割雙鏈 DNA 產(chǎn)變化來對(duì) Hg2+進(jìn)行檢測(cè)。原理如圖 1.3 所示，首先在 DNA 的 5 末鐵（Fc），通過 T-Hg-T 結(jié)合產(chǎn)生雙鏈結(jié)構(gòu)使二茂鐵靠近電極表面，學(xué)信號(hào)；產(chǎn)生的雙鏈結(jié)構(gòu)含有內(nèi)切酶的切割位點(diǎn)；再經(jīng)內(nèi)切酶切割，電化學(xué)信號(hào)下降，利用電化學(xué)信號(hào)的變化來對(duì) Hg2+濃度進(jìn)行分析

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]納米材料在電化學(xué)生物傳感器中的應(yīng)用[J]. 扎熱木.薩迪克,都穎,徐靜娟,陳洪淵.  分析科學(xué)學(xué)報(bào). 2009(02)
[2]以油胺-硒化氫復(fù)合物為前體的脂溶性量子點(diǎn)的制備[J]. 劉劍波,羊小海,王柯敏,譚蔚泓,李朝輝,張鵬飛,王東.  高等學(xué)校化學(xué)學(xué)報(bào). 2008(12)
[3]生物傳感器的應(yīng)用研究進(jìn)展[J]. 武寶利,張國(guó)梅,高春光,雙少敏.  中國(guó)生物工程雜志. 2004(07)



本文編號(hào)：3087553