蛋白質(zhì)的翻譯后修飾幾乎涉及所有的生命過(guò)程,在蛋白質(zhì)的功能和活性中起著非常重要的調(diào)節(jié)作用。其中,蛋白質(zhì)糖基化和磷酸化是最常見的翻譯后修飾。糖基化位點(diǎn)作為生物標(biāo)志物和治療靶標(biāo),參與許多疾病的發(fā)生和發(fā)展。研究表明,磷蛋白的含量異常與許多疾病的發(fā)病機(jī)理密切相關(guān)。但是,在生物學(xué)中蛋白質(zhì)的糖基化和磷酸化之間是否存在一定的相關(guān)性,仍沒(méi)有明確的定論。因此,研究蛋白質(zhì)糖基化與磷酸化之間的關(guān)系被認(rèn)為是了解主要疾病發(fā)生和發(fā)展的有效途徑,對(duì)研究疾病的發(fā)病機(jī)制和早期診斷具有重要意義�；诖�,本文以Zr（IV）和硼酸為活性中心分別發(fā)展了兩種類型的MOFs納米探針。通過(guò)Zr（IV）與磷酸鹽的特異性相互作用實(shí)現(xiàn)了磷酸化位點(diǎn)的熒光檢測(cè)。利用硼酸與順式二醇的特異性作用,結(jié)合茜素紅調(diào)控探針的熒光,實(shí)現(xiàn)了糖基化位點(diǎn)的特異性識(shí)別。最后,將制備的納米探針應(yīng)用于抑郁小鼠體內(nèi)糖基化和磷酸化水平的原位熒光成像。具體工作部分如下:1.以Zr（IV）和硼酸為活性中心,設(shè)計(jì)合成了同時(shí)識(shí)別糖基化與磷酸化位點(diǎn)的MOFs納米探針。利用Zr（IV）與磷酸鹽之間的特異性相互作用,實(shí)現(xiàn)了磷酸化位點(diǎn)的熒光成像。為了實(shí)現(xiàn)對(duì)糖基化位點(diǎn)的特異性識(shí)別,在MOFs... 

【文章來(lái)源】：山東師范大學(xué)山東省

【文章頁(yè)數(shù)】：66 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

蛋白質(zhì)納米孔技術(shù)測(cè)定蛋白磷酸化[17]

山東師范大學(xué)碩士學(xué)位論文3圖1-2Trm-SH2用于分析酪氨酸磷酸化狀態(tài)示意圖[18]2018年，MingliangYe等人[19]提出了一種偽靶向MS方法（圖1-3），以鑒定微量樣品中的低豐度磷酸化。因?yàn)閮蓚€(gè)階段使用了相同的樣品和相同的液相色譜系統(tǒng)，不需要樣品分級(jí)分離或富集，這使得該方法可以分析微量樣品。作者已經(jīng)證明，此方法具有較高的靈敏度可以識(shí)別內(nèi)源性Shc1蛋白復(fù)合物上的磷酸化位點(diǎn)。平行反應(yīng)監(jiān)測(cè)（PRM）通常用于靶向蛋白質(zhì)組學(xué)中的目標(biāo)肽，而這種偽靶向MS方法使PRM能夠識(shí)別新肽。在這種新方法中，將從數(shù)據(jù)依賴性采集（DDA）的數(shù)據(jù)集中識(shí)別出的低可信度肽用于構(gòu)建PRM分析的偽靶向庫(kù)，從而可以識(shí)別新的高可信度肽。因此，該策略不僅用于于分析蛋白質(zhì)磷酸化，也適用于分析痕量樣品中的其他低豐度多肽。圖1-3偽靶向策略測(cè)定蛋白質(zhì)磷酸化位點(diǎn)[19]

山東師范大學(xué)碩士學(xué)位論文3圖1-2Trm-SH2用于分析酪氨酸磷酸化狀態(tài)示意圖[18]2018年，MingliangYe等人[19]提出了一種偽靶向MS方法（圖1-3），以鑒定微量樣品中的低豐度磷酸化。因?yàn)閮蓚€(gè)階段使用了相同的樣品和相同的液相色譜系統(tǒng)，不需要樣品分級(jí)分離或富集，這使得該方法可以分析微量樣品。作者已經(jīng)證明，此方法具有較高的靈敏度可以識(shí)別內(nèi)源性Shc1蛋白復(fù)合物上的磷酸化位點(diǎn)。平行反應(yīng)監(jiān)測(cè)（PRM）通常用于靶向蛋白質(zhì)組學(xué)中的目標(biāo)肽，而這種偽靶向MS方法使PRM能夠識(shí)別新肽。在這種新方法中，將從數(shù)據(jù)依賴性采集（DDA）的數(shù)據(jù)集中識(shí)別出的低可信度肽用于構(gòu)建PRM分析的偽靶向庫(kù)，從而可以識(shí)別新的高可信度肽。因此，該策略不僅用于于分析蛋白質(zhì)磷酸化，也適用于分析痕量樣品中的其他低豐度多肽。圖1-3偽靶向策略測(cè)定蛋白質(zhì)磷酸化位點(diǎn)[19]


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