研究目的:將氯化鍶和氯化鈣以不同比例混合制備含鍶海藻酸鹽水凝膠,檢測海藻酸鹽水凝膠的部分理化性質(zhì),研究接種在水凝膠支架上的小鼠MC3T3-E1細(xì)胞成骨分化情況。研究方法:根據(jù)交聯(lián)劑中鈣離子和鍶離子的比例不同,制備5組（分別為Sr0、Sr1、Sr2、Sr3、Sr4組,Sr0為對照組）交聯(lián)劑終濃度為4g/L的電解液,并分別與pH值為7.4的2%wt海藻酸鈉溶液等比混合交聯(lián),制備直徑為15mm,厚度為1mm的圓形水凝膠。通過電感耦合等離子體光譜儀（ICP）檢測各組水凝膠浸泡在磷酸鹽緩沖溶液（PBS）中第1、3、5、10、14天的鍶離子析出濃度;將水凝膠浸泡在含有溶菌酶的PBS中計算各組水凝膠的降解速率;將小鼠MC3T3-E1細(xì)胞接種于水凝膠表面培養(yǎng),并更換成骨培養(yǎng)基,在第3、7、14天時檢測各組細(xì)胞的堿性磷酸酶（ALP）表達(dá)情況;各組水凝膠接種MC3T3-E1細(xì)胞,在成骨培養(yǎng)第21天時采用茜素紅染色,觀察鈣結(jié)節(jié)形成情況;各組水凝膠接種MC3T3-E1細(xì)胞,在成骨培養(yǎng)第3、7、14、21天時,采用實時熒光定量PCR技術(shù)（RT-qPCR）檢測各組成骨特異性基因的表達(dá);各組水凝膠接種MC3T3-E... 

【文章來源】：青島大學(xué)山東省

【文章頁數(shù)】：43 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
abstract
引言
第1章 材料與方法
    1.1 實驗材料、試劑和設(shè)備
        1.1.1 細(xì)胞來源
        1.1.2 主要材料、試劑
        1.1.3 主要儀器、設(shè)備
    1.2 實驗方法
        1.2.1 海藻酸鹽水凝膠的配置
2和Cacl₂溶液的配制">            1.2.1.1 Srcl₂和Cacl₂溶液的配制
            1.2.1.2 海藻酸鈉溶液的配置
            1.2.1.3 含鍶海藻酸鹽水凝膠的制備
        1.2.2 含鍶交聯(lián)海藻酸鹽水凝膠中鍶離子析出濃度檢測
        1.2.3 含鍶交聯(lián)海藻酸鹽水凝膠降解率檢測
        1.2.4 MC3T3-E1細(xì)胞的成骨培養(yǎng)
            1.2.4.1 MC3T3-E1細(xì)胞的培養(yǎng)
            1.2.4.2 成骨誘導(dǎo)培養(yǎng)基的配置
        1.2.5 含鍶交聯(lián)海藻酸鹽水凝膠表面接種細(xì)胞
        1.2.6 含鍶交聯(lián)海藻酸鹽水凝膠表面細(xì)胞的堿性磷酸酶活性檢測
        1.2.7 含鍶交聯(lián)海藻酸鹽水凝膠表面的鈣結(jié)節(jié)檢測
        1.2.8 含鍶交聯(lián)海藻酸鹽水凝膠表面細(xì)胞的成骨相關(guān)基因檢測
        1.2.9 含鍶交聯(lián)海藻酸鹽水凝膠表面細(xì)胞的成骨相關(guān)蛋白檢測
    1.3 統(tǒng)計學(xué)處理
第2章 結(jié)果
    2.1 含鍶交聯(lián)海藻酸鹽水凝膠表面觀
2+析出濃度的測定">    2.2 含鍶交聯(lián)海藻酸鹽水凝膠浸出液中Sr²⁺析出濃度的測定
    2.3 含鍶交聯(lián)海藻酸鹽水凝膠降解率的測定
    2.4 含鍶交聯(lián)海藻酸鹽水凝膠表面細(xì)胞的堿性磷酸酶活性的測定
    2.5 含鍶交聯(lián)海藻酸鹽水凝膠表面鈣結(jié)節(jié)的觀察
    2.6 含鍶交聯(lián)海藻酸鹽水凝膠表面細(xì)胞的成骨相關(guān)基因的測定
    2.7 含鍶交聯(lián)海藻酸鹽水凝膠表面細(xì)胞的成骨相關(guān)蛋白的測定
第3章 討論
第4章 結(jié)論
參考文獻(xiàn)
綜述
    綜述參考文獻(xiàn)
攻讀學(xué)位期間的研究成果
附錄
    縮略詞表
致謝



本文編號：3038985