蛋白質(zhì)磷酸化是一種廣泛存在的蛋白質(zhì)翻譯后修飾,參與了許多重要的細胞活動,包括細胞分化、增殖、信號轉(zhuǎn)導(dǎo)、分子識別和代謝過程等。在生物樣品中,磷酸化蛋白/肽與多種疾病的發(fā)生和發(fā)展有著密切的聯(lián)系,并且可以作為臨床檢測的重要的生物標志物。質(zhì)譜因其高的靈敏度和準確性已經(jīng)成為了一種鑒定蛋白質(zhì)磷酸化的重要技術(shù),但是蛋白質(zhì)磷酸化因其低豐度,弱離子化效率以及存在非磷酸化肽的干擾,在質(zhì)譜分析時存在巨大的挑戰(zhàn),在質(zhì)譜鑒定前對磷酸化蛋白/肽進行預(yù)富集尤其必要。目前,可以開發(fā)出來許多富集磷酸化肽的策略,但是大部分策略一般傾向于優(yōu)先檢測出單磷酸化肽段,往往會忽略掉多磷酸化肽包含的有價值的關(guān)鍵信息。在磷酸化過程中,酪氨酸磷酸化雖然占比最低,但由于其在整個磷酸化過程的上游,對細胞信號的轉(zhuǎn)導(dǎo)起著重要的作用,對癌癥的發(fā)生發(fā)展也有著重要的調(diào)節(jié)功能,并且目前常用的磷酸化多肽富集方法無法區(qū)分不同的磷酸化形態(tài),對酪氨酸磷酸化的富集主要還是依靠抗體的策略。因此,開發(fā)出對酸磷酸化肽的選擇性富集有著重要的應(yīng)用意義。分子印跡技術(shù)是一種重要的模擬酶與抗體的仿生技術(shù),利用分子印跡技術(shù)制備的材料能夠特異性識別目標分子,但是一般情況下存在傳質(zhì)慢... 

【文章來源】：吉林大學(xué)吉林省 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校

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【學(xué)位級別】：碩士

【部分圖文】：

圖1.1分子印跡過程

第1章緒論4除去柔性分子模板后可以得到介觀結(jié)構(gòu)的介孔材料（圖1.2a）。目前，軟模板法可以通過三種路徑合成方法來制備介孔材料：直接沉淀；準液晶模板和溶劑揮發(fā)誘導(dǎo)自組裝[13]（圖1.3）。圖1.3（a）直接沉淀和（b）準液晶模板（c）溶劑揮發(fā)誘導(dǎo)自組裝法制備介孔材料示意圖對于軟模板法的合成機理有電荷匹配[14]（chargedensitymatching）、層褶皺[15]（layerpuckering）、液晶模板機理[16]（liquid-crystaltemplatingmechanism）、層折疊[17]（foldingsheets）和棒狀膠束機理[18]（rodassembly），但是這些機理只能用來對一些特殊的情況進行闡釋。目前，Stucky課題組提出的協(xié)同作用機理（coorperativeformationmechanism）得到了大家的廣泛認可，這個機理基本含義是無機前驅(qū)體和表面活性劑二者之間通過協(xié)同合作形成了介觀結(jié)構(gòu)的無機-有機結(jié)合體，在界面層由于無機前驅(qū)體的聚合導(dǎo)致無機層電荷密度的改變，表面活性劑的疏水鏈相互靠近，進而導(dǎo)致了無機-有機結(jié)合體形成了膠束狀態(tài)。重新排列的膠束能夠使有機物的縮聚過程得以提高，進而導(dǎo)致了“交聯(lián)-排列”相互促進作用。兩相界面存在的相互作用（配位鍵、靜電引力或氫鍵等）導(dǎo)致了膠束加速了無機物縮聚過程，使得無機物能夠在界面處發(fā)生縮聚[8,19]。這個機理使得非離子表面活性劑合成介孔材料中的很多實驗現(xiàn)象得到合理的解釋。

第1章緒論8日益關(guān)注的問題。合成蛋白質(zhì)分子印跡材料的傳統(tǒng)方法包括：整體印跡，表面印跡和基于表位的印跡。蛋白質(zhì)分子印跡的發(fā)展相對較慢，其原因主要包括：（1）蛋白質(zhì)分子的大小較大，極大地限制了模板分子在聚合物中的自由擴散；（2）蛋白質(zhì)的構(gòu)象易于改變，導(dǎo)致分子印跡材料的選擇性差；（3）蛋白質(zhì)容易變性。這些因素直接限制了蛋白質(zhì)分子印跡研究的發(fā)展。Yan等人[38]使用介孔SiO2納米材料作為基質(zhì)并利用具有較強抗性的磷光量子點（QD），開發(fā)了具有高特異性和強抗干擾性的磷光介孔印跡微球，實現(xiàn)了對實際生物樣品中轉(zhuǎn)鐵蛋白的高效識別（圖1.4）。以往CTAB為模板形成的介孔材料孔徑較小，不利于蛋白的吸附性能，Guan等人[39]使用兩親性離子液體作為結(jié)構(gòu)模板制備了分子印跡介孔材料用于選擇性識別細胞色素C。圖1.4磷光介孔微球的制備及其識別轉(zhuǎn)鐵蛋白過程蛋白質(zhì)磷酸化是參與各種細胞過程調(diào)控的最重要的翻譯后修飾之一，在上游過程的細胞信號傳導(dǎo)過程中扮演著重要的角色。人類的基因組大概有三分之一的蛋白質(zhì)可以被磷酸化，并且人類的疾病有時候與體內(nèi)的異常磷酸化相關(guān)。蛋白質(zhì)磷酸化在體內(nèi)的占比較少，并且在存在大量的非磷酸化肽的干擾。因此，在蛋白質(zhì)磷酸化的質(zhì)譜（MS）分析之前，從復(fù)雜的生物樣品中選擇性捕獲磷酸肽是必不可少的。Liu等人[40]利用磷酸鹽印跡的介孔二氧化硅納米顆粒選擇性富集磷酸化肽。最近，Zhang等人[41]合成了由磁性Fe3O4核和焦磷酸鹽印跡的介孔二氧化硅殼組成的焦磷酸鹽印跡磁性親和微球用于選擇性富集磷酸化肽。此外，Ding等人[42]通過兩親性離子液體作為表面活性劑，通過一步結(jié)合固定


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