背景:當(dāng)機(jī)體遭到病原體入侵或自身病變時(shí),抗原遞呈細(xì)胞（Antigen presenting cell,APC）會(huì)攝取加工抗原并將它呈遞到次級(jí)淋巴器官然后激活淋巴細(xì)胞。淋巴細(xì)胞中的CD4⁺T細(xì)胞主要起到募集白細(xì)胞和調(diào)節(jié)免疫反應(yīng)的作用,而CD8⁺T細(xì)胞對(duì)殺傷病原體起到了直接的效應(yīng)功能。細(xì)胞毒性CD8⁺T細(xì)胞（Cytotoxic CD8+T cells,CTLs）是處于激活狀態(tài)的na?ve CD8⁺T細(xì)胞,作為一種特異性T細(xì)胞,它會(huì)分泌多種細(xì)胞因子和細(xì)胞效應(yīng)分子參與免疫作用,在清除細(xì)胞內(nèi)病原體和腫瘤細(xì)胞的過程中起到了重要的作用。氧化鈰納米顆粒（Ceria nanoparticles,CNPs）由于具有多種酶活性而被廣泛應(yīng)用于生物醫(yī)學(xué)領(lǐng)域并在很多系統(tǒng)疾病的治療中起到了重要作用。以往的研究主要將納米顆粒作為藥物遞送或是抗原遞送的載體,因此更多和免疫相關(guān)的研究都集中在了CD4⁺T細(xì)胞或是樹突狀細(xì)胞（Dendritic cell,DC）、巨噬細(xì)胞等抗原遞呈細(xì)胞,忽視了納米顆粒本身對(duì)于機(jī)體的作... 

【文章來源】：中國人民解放軍陸軍軍醫(yī)大學(xué)重慶市

【文章頁數(shù)】：76 頁

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

CNPs的合成與表征

圖 2-3 CNPs 對(duì) CD8+T 細(xì)胞的增殖沒有影響。（A）（B）Ki67 染色 CD8+T 細(xì)胞的點(diǎn)統(tǒng)計(jì)結(jié)果圖；（C）CFSE 染色 CD8+T 細(xì)胞熒光分布圖，數(shù)字代表細(xì)胞分裂代數(shù)。圖中均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差，顯著性差異表示為 ns（p>0.05），每組 n=3。2.2.3 CNPs 促進(jìn)了細(xì)胞因子分泌和細(xì)胞效應(yīng)分子釋放腫瘤壞死因子 TNF-α 可以直接殺傷腫瘤細(xì)胞，也可以促進(jìn) T 細(xì)胞分泌各種炎，具有復(fù)雜的生物學(xué)效能；IL-2 被稱為 T 細(xì)胞生長因子，是趨化因子家族中主要由活化的 T 細(xì)胞產(chǎn)生，在機(jī)體的免疫和抗病毒感染中起到了重要的作用；抗病毒，抗腫瘤和免疫調(diào)節(jié)的作用，也參與到人體的各種免疫調(diào)節(jié)和炎癥反應(yīng)體受到感染時(shí)，CTL 細(xì)胞會(huì)釋放出 perforin 和 granzyme 等具有細(xì)胞溶解作用子，在 perforin 作用下，granzyme 會(huì)進(jìn)入靶細(xì)胞的胞質(zhì)中造成其凋亡。這幾子在 CTL 細(xì)胞清除細(xì)菌病毒和腫瘤細(xì)胞中都起到了重要作用。為了探究 CNPs 對(duì)這些細(xì)胞分子的分泌和效應(yīng)分子的釋放是否有影響，在 胞共培養(yǎng) 4 天后，我們對(duì)其分泌的細(xì)胞因子和效應(yīng)分子進(jìn)行了檢測。結(jié)果顯

2-7 CNPs 降低了 CTL 細(xì)胞內(nèi) ROS 水平并激活了 NF- 通路。（A）胞內(nèi) ROS 水平果；（B）（C）MMP 檢測和定量統(tǒng)計(jì)；（D）NF- 信號(hào)通路相關(guān)蛋白表達(dá)。圖中±標(biāo)準(zhǔn)差，顯著性差異表示為***（P <0.001），**（P<0.01），ns（p>0.05），每組2.2.6 阻斷 NF- 信號(hào)通路后 ROS 水平不會(huì)發(fā)生改變?yōu)榱诉M(jìn)一步探究 CNPs 對(duì) NF- 信號(hào)通路的影響，我們用 IMD-0354（IKK阻斷了 NF-κB 信號(hào)通路中 IκBα 蛋白的磷酸化，然后檢測 CNPs 對(duì) CTL 細(xì)胞用是否發(fā)生變化。經(jīng) IMD-0354 處理后，IKKβ，p-IκBα 的表達(dá)量明顯下降，而達(dá)量上升，說明細(xì)胞內(nèi)的 NF- 信號(hào)通路被明顯抑制，即 IMD-0354 能有信號(hào)通路的激活（圖 2-8 A）。緊接著我們檢測了細(xì)胞內(nèi)的 ROS 水平和，結(jié)果顯示用 CNPs 處理細(xì)胞后加入 IMD-0354 并不能使其恢復(fù)到未處理前說明 NF- 信號(hào)通路對(duì) ROS 水平?jīng)]有影響（圖 2-8 B，C）。


本文編號(hào)：3022936