目的探討一種用于肌腱二級(jí)纖維束及周?chē)靸?nèi)膜形態(tài)觀察的掃描電鏡制樣方法。方法以豬趾淺屈肌腱為例,將肌腱在常溫下橫切為1 cm左右的肌腱段,通過(guò)雙光子熒光顯微鏡觀察組織完整性,行冰凍切片聯(lián)合特殊Masson染色,觀察肌腱二級(jí)纖維束及周?chē)靸?nèi)膜分布情況。另取肌腱段若干經(jīng)10%中性甲醛固定4 h,分為5組,采用不同的掃面電鏡制樣方法:A組,單純梯度脫水; B組,行冰凍切片,再將肌腱切片進(jìn)行梯度脫水; C組,梯度脫水至70%,行冰凍切片,再將肌腱切片進(jìn)行梯度脫水; D組,梯度脫水至80%,行冰凍切片,再將肌腱切片進(jìn)行梯度脫水; E組,梯度脫水至100%,行冰凍切片。各梯度脫水試劑為乙醇配制,梯度脫水終濃度均為100%。冰凍切片厚度均為100μm。經(jīng)臨界點(diǎn)干燥噴金后行體視顯微鏡和掃描電鏡觀察。結(jié)果雙光子二次諧波顯微成像觀察示肌腱結(jié)構(gòu)完整連續(xù)。Masson染色觀察示周?chē)靸?nèi)膜較薄區(qū)域難以辨別獨(dú)立膠原纖維束。體視顯微鏡觀察示肌腱切片電鏡制樣后大體完整,三級(jí)纖維束的周?chē)靸?nèi)膜清晰可見(jiàn)。掃描電鏡觀察示A、D、E組肌腱組織呈現(xiàn)不同程度的過(guò)度收縮,二級(jí)纖維束結(jié)構(gòu)無(wú)法辨別; B組整體呈現(xiàn)無(wú)規(guī)律的冰晶空隙,二級(jí)纖... 

【文章來(lái)源】：組織工程與重建外科雜志. 2020,16(01)

【文章頁(yè)數(shù)】：5 頁(yè)

【部分圖文】：

肌腱光學(xué)顯微鏡觀察

各組掃描電鏡觀察(600×)

各組掃描電鏡觀察(6 000×)

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
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本文編號(hào)：3018389