人類基因組計(jì)劃的迅速發(fā)展促進(jìn)了核酸分析技術(shù)在突變檢測、分子診斷和疾病預(yù)防以及治療評估中的應(yīng)用,尋找快速、易定量、自動(dòng)化和高通量的核酸檢測分析方法至關(guān)重要。毛細(xì)管電泳（Capillary electrophoresis,CE）具有分離效率高、操作模式多、試樣消耗少等優(yōu)點(diǎn),已成為蛋白質(zhì)和核酸等生物大分子分離分析中不可或缺的工具。毛細(xì)管凝膠電泳（Capillary gel electrophoresis,CGE）和毛細(xì)管無膠篩分電泳（Non-gel capillary electrophoresis,NGCE）是兩種常用的操作模式。CGE可有效分離分子量范圍為50²000 bp的較小DNA片段,具有較高分辨率。但是其凝膠黏度較大,制備和運(yùn)行過程中容易產(chǎn)生氣泡,使體系的穩(wěn)定性和重現(xiàn)性變差,對于較寬分子量范圍的DNA片段分辨率較低。NGCE以低粘度的線性高分子溶液為篩分介質(zhì),溶液中高分子之間相互交纏形成網(wǎng)孔,可起到篩分作用。這些低粘度的高分子溶液可提供更快速,更穩(wěn)定的分離,允許更大的靈活性和壓力注射,也更容易實(shí)現(xiàn)自動(dòng)化。NGCE可以提供更大孔隙的篩分介質(zhì),有利于分離較寬分子... 

【文章來源】：河北大學(xué)河北省

【文章頁數(shù)】：62 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
abstract
第一章 緒論
    1.1 引言
    1.2 毛細(xì)管凝膠電泳
    1.3 毛細(xì)管無膠篩分電泳
        1.3.1 線性聚丙烯酰胺
        1.3.2 纖維素及其衍生物
        1.3.3 PEG
        1.3.4 PVP和 PEO
        1.3.5 混合高分子聚合物
    1.4 本論文的選題思路
第二章 毛細(xì)管凝膠電泳法分離分析PCR擴(kuò)增產(chǎn)物中的DNA片段
    2.1 前言
    2.2 實(shí)驗(yàn)部分
        2.2.1 儀器與試劑
        2.2.2 溶液的配制
        2.2.3 毛細(xì)管凝膠柱的制備
        2.2.4 CGE分離條件
        2.2.5 參數(shù)計(jì)算
    2.3 結(jié)果與討論
        2.3.1 分離電壓的選擇
        2.3.2 進(jìn)樣電壓的選擇
        2.3.3 進(jìn)樣時(shí)間的選擇
        2.3.4 CGE最佳分離條件的確定
        2.3.5 DNA片段分子量和遷移時(shí)間的關(guān)系
        2.3.6 PCR擴(kuò)增產(chǎn)物中DNA片段分子量的確定
        2.3.7 方法學(xué)研究
    2.4 本章小結(jié)
第三章 毛細(xì)管無膠篩分電泳分離檢測寬分子量范圍DNA片段
    3.1 前言
    3.2 實(shí)驗(yàn)部分
        3.2.1 儀器與試劑
        3.2.2 溶液的配制
        3.2.3 篩分介質(zhì)的配制
        3.2.4 LPA涂層毛細(xì)管柱的制備
        3.2.5 NGCE分離條件
    3.3 結(jié)果與討論
        3.3.1 NGCE的分離條件和篩分機(jī)理
        3.3.2 方法學(xué)驗(yàn)證
        3.3.3 討論
    3.4 本章小結(jié)
第四章 LPA涂層毛細(xì)管柱的優(yōu)化制備及其在NGCE分離分析寬分子量范圍DNA片段中的應(yīng)用
    4.1 前言
    4.2 實(shí)驗(yàn)部分
        4.2.1 儀器與試劑
        4.2.2 溶液的配制
        4.2.3 篩分介質(zhì)的配制
        4.2.4 LPA涂層毛細(xì)管柱的制備
        4.2.5 NGCE分離條件
    4.3 結(jié)果與討論
        4.3.1 AA單體濃度對涂層柱性能的影響
        4.3.2 5%LPA涂層毛細(xì)管柱重現(xiàn)性評價(jià)
    4.4 本章小結(jié)
第五章 結(jié)論與展望
    5.1 結(jié)論
    5.2 展望
參考文獻(xiàn)
附錄
致謝
攻讀學(xué)位期間取得的研究成果


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
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[3]毛細(xì)管電泳紫外檢測條件下單堿基分離DNA片段[J]. 王前,許旭.  化學(xué)學(xué)報(bào). 2004(01)
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本文編號(hào)：3013671