目的:本課題旨在揭示在常用牙科合金的影響下,口腔黏膜組織、血清及肝、腎組織中不同時(shí)間點(diǎn)自噬信號(hào)分子的表達(dá)情況,進(jìn)一步明確牙科合金對(duì)生物體的影響及其機(jī)制,為臨床上選擇不同生物相容性的牙科合金提供實(shí)驗(yàn)基礎(chǔ)。方法:本課題根據(jù)ISO 10993和YY/T 0127.13-2009標(biāo)準(zhǔn)構(gòu)建金黃地鼠動(dòng)物研究模型,分別采用鎳鉻(Nickel-chromium,Ni-Cr),鈷鉻(Cobalt-chromium,Co-Cr),鈦金屬(Commercially pure titanium,CP-Ti),鈀基(Palladiumbased,Pd-based)和金鉑(Gold-platinum,Au-Pt)合金等常用牙科合金持續(xù)刺激金黃地鼠口腔黏膜12周及24周,并用聚丙烯材料作為陰性對(duì)照,應(yīng)用免疫組織化學(xué)法(IHC)檢測(cè)與試件接觸的口腔黏膜組織中自噬相關(guān)蛋白p62和Beclin1的表達(dá)情況;采用酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(ELISA)檢測(cè)血清中自噬相關(guān)蛋白p62和Beclin1的表達(dá)情況;采用免疫組織化學(xué)法和Western blot法檢測(cè)肝、腎組織中自噬相關(guān)蛋白p62和Beclin1的表達(dá)情況。結(jié)果:1.口腔黏膜組織免疫組化結(jié)果表明,五種牙科合金組口腔黏膜組織12周和24周的p62表達(dá)強(qiáng)度均不同程度低于陰性組,而Beclin1表達(dá)強(qiáng)度則不同程度高于陰性組。其中,12周時(shí)五種牙科合金組口腔黏膜組織的p62表達(dá)強(qiáng)度與陰性組均無明顯差異(P0.05);同期鎳鉻合金和鈷鉻合金B(yǎng)eclin1表達(dá)強(qiáng)度顯著高于陰性組(P0.05),而鈦金屬、鈀基和金鉑合金B(yǎng)eclin1表達(dá)強(qiáng)度與陰性組無顯著性差異(P0.05);在24周時(shí),鎳鉻和鈷鉻合金組口腔黏膜組織中p62表達(dá)強(qiáng)度較陰性組顯著降低(P0.05),Beclin1表達(dá)強(qiáng)度較陰性組顯著升高(P0.05),而鈦金屬、鈀基和金鉑合金組未對(duì)口腔黏膜組織中的p62和Beclin1表達(dá)強(qiáng)度造成明顯影響(P0.05)。2.血清ELISA結(jié)果顯示,五種牙科合金組血清中12周和24周的p62表達(dá)強(qiáng)度均不同程度低于陰性組,而Beclin1表達(dá)程度則不同程度高于陰性組。其中,12周時(shí)五種牙科合金組血清中的p62和Beclin1表達(dá)強(qiáng)度與陰性組均無顯著性差異(P0.05);在24周時(shí),鎳鉻合金組血清中的p62表達(dá)強(qiáng)度較陰性組顯著降低(P0.05),鎳鉻合金組和鈀基合金組血清中的Beclin1表達(dá)強(qiáng)度較陰性組顯著升高(P0.05),而鈷鉻合金組血清中的p62表達(dá)強(qiáng)度及鈦金屬、鈷鉻和金鉑合金組血清中的p62和Beclin1表達(dá)強(qiáng)度與陰性組無明顯差異(P0.05)。3.肝臟免疫組化和Western blot檢測(cè)發(fā)現(xiàn),除鎳鉻合金組外,其余4種牙科合金組肝組織12周和24周的p62表達(dá)強(qiáng)度均不同程度低于陰性組,而Beclin1表達(dá)程度則不同程度高于陰性組。其中,在12周時(shí)鈷鉻和鈀基合金組肝組織中p62和Beclin1表達(dá)強(qiáng)度分別較陰性組顯著降低和升高(P0.05),而鈦金屬、鎳鉻和金鉑合金組肝組織中p62和Beclin1表達(dá)強(qiáng)度與陰性組無明顯差異(P0.05);而在24周時(shí),除了鈷鉻合金組(P0.05)外,其余4種牙科合金組肝組織中p62和Beclin1表達(dá)強(qiáng)度與陰性組無明顯差異(P0.05)。4.腎臟免疫組化和Western blot檢測(cè)顯示,除了鎳鉻和金鉑合金組外,其余3種牙科合金組12周和24周腎組織p62表達(dá)強(qiáng)度低于陰性組,而Beclin1表達(dá)水平則不同程度高于陰性組。其中,只有鈷鉻合金組在12周和24周時(shí)腎組織p62表達(dá)明顯低于陰性組(P0.05),Beclin1表達(dá)強(qiáng)度顯著高于陰性組(P0.05),而鈦金屬、鎳鉻、鈀基和金鉑合金組兩個(gè)時(shí)間點(diǎn)的腎組織中p62和Beclin1的表達(dá)水平與陰性組沒有明顯差異(P0.05)5.在口腔黏膜組織、血清和肝腎組織中,p62和Beclin1表達(dá)水平均呈負(fù)相關(guān)(P0.05)。口腔黏膜組織與血清,以及肝組織與腎組織中的自噬變化呈正相關(guān)(P0.05);然而,口腔黏膜組織和血清與肝腎組織中的自噬相關(guān)蛋白表達(dá)均未見顯著的相關(guān)性(P0.05)。結(jié)論:五種常用牙科合金均會(huì)引起口腔黏膜組織、血清和肝腎不同程度的自噬水平改變。在口腔黏膜組織和血清中,鎳鉻和鈷鉻合金可顯著上調(diào)其24周細(xì)胞自噬水平;此外,鈷鉻合金還可引起肝腎組織細(xì)胞自噬水平明顯升高;而鈦金屬、鈀基和金鉑合金具有較好的生物相容性。
【學(xué)位單位】：福建醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位年份】：2018
【中圖分類】：R783.1
【部分圖文】：

冷凍高速離心機(jī)（Primo R，Heraeus，Germany）；實(shí)驗(yàn)室雪花制冰機(jī)（IMS-25，江蘇常熟市雪科電器有限公司，中國）；組織包埋機(jī)（KEDEE，浙江省金華市科迪儀器設(shè)備有限公司，中國）；半自動(dòng)石蠟切片機(jī)（FINESSE E+，賽默飛世爾科技公司，中國）；熒光正置相差顯微鏡（BX53，Olympus，USA）。1.1.3 實(shí)驗(yàn)方法1.1.3.1 試件的制備[3,31]1)制作圓片蠟型：制作一個(gè)內(nèi)徑尺寸為直徑 5.1 mm，厚度 0.7 mm 的金屬陰模(圖 1-1)，用鑄造蠟制得直徑 5.1 mm，厚度 0.7 mm 的帶柄圓片狀蠟型，柄用于連接鑄道，并在每個(gè)圓片狀蠟型直徑的三等分處穿出 2 個(gè)直徑小于 1 mm 的小孔，便于用縫線固定(圖 1-2)。

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【參考文獻(xiàn)】

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本文編號(hào)：2864141