【摘要】：目的:通過系統(tǒng)化的方式將脂肪組織進(jìn)行脫細(xì)胞處理,提取細(xì)胞外基質(zhì)成分,制備脫細(xì)胞基質(zhì)材料,通過組織學(xué)、細(xì)胞學(xué)及動(dòng)物學(xué)檢查,證實(shí)人脂肪脫細(xì)胞基質(zhì)材料有利于促進(jìn)體細(xì)胞及干細(xì)胞的粘附、增殖、遷移及干細(xì)胞的分化,有利于促進(jìn)SD大鼠全層皮膚缺損的創(chuàng)面愈合,可作為理想的組織修復(fù)材料之一。方法:通過乳糜化處理、胰酶消化、異丙醇萃取等相關(guān)處理進(jìn)行脂肪組織脫細(xì)胞化,提取細(xì)胞外基質(zhì)成分,凍干制成脂肪脫細(xì)胞基質(zhì)材料。通過HE染色、DAPI染色、油紅O染色、掃描電鏡觀察評(píng)價(jià)脫細(xì)胞基質(zhì)材料內(nèi)細(xì)胞及細(xì)胞成分清除情況。通過病理切片染色進(jìn)行細(xì)胞外基質(zhì)主要成分膠原蛋白的定性檢測。通過體外條件下在脫細(xì)胞基質(zhì)材料上接種人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞,觀察不同時(shí)間段人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞與細(xì)胞基質(zhì)材料的粘附及增殖情況。通過誘導(dǎo)接種到脫細(xì)胞基質(zhì)材料上的人脂肪干細(xì)胞向脂肪細(xì)胞分化,觀察脫細(xì)胞基質(zhì)材料促進(jìn)脂肪干細(xì)胞分化功能。建立SD大鼠全層皮膚缺損模型,設(shè)立自愈組、脂肪脫細(xì)胞基質(zhì)材料組、人脂肪干細(xì)胞組,比較不同組間創(chuàng)面愈合時(shí)間及病理學(xué)改變,觀察脂肪脫細(xì)胞基質(zhì)材料在促進(jìn)創(chuàng)面愈合的作用。結(jié)果:通過乳糜化處理、胰酶消化、異丙醇萃取后制備的脂肪脫細(xì)胞基質(zhì)材料脫細(xì)胞徹底,無細(xì)胞及細(xì)胞成分殘留,細(xì)胞外基質(zhì)的主要成分膠原蛋白保存較好,具有適宜細(xì)胞良好生長的孔徑,有利于促進(jìn)體細(xì)胞及干細(xì)胞的粘附、遷移、增殖及干細(xì)胞分化的能力,并具有促進(jìn)血管內(nèi)皮細(xì)胞呈現(xiàn)“管腔”樣分布。脫細(xì)胞基質(zhì)材料能夠有效的促進(jìn)SD大鼠全層皮膚缺損的創(chuàng)面愈合,并能較好的改善創(chuàng)面愈合的質(zhì)量。結(jié)論:研究結(jié)果表明脂肪脫細(xì)胞基質(zhì)支架材料脫細(xì)胞徹底,有效成分保留良好,具有良好的生物相容性,有利于促進(jìn)體細(xì)胞及干細(xì)胞的粘附、遷移、增殖及干細(xì)胞分化的能力,并可以有效的促進(jìn)SD大鼠全層皮膚缺損創(chuàng)面愈合,并能較好的改善創(chuàng)面愈合的質(zhì)量,可作為創(chuàng)面修復(fù)良好的生物支架材料。
【學(xué)位授予單位】：大連醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2018
【分類號(hào)】：R318.08
【圖文】：

指標(biāo)28 天每組各隨機(jī)取材 3 只，麻醉后拍照，im據(jù)公式計(jì)算殘余創(chuàng)面所占原創(chuàng)面的百分比。性福爾馬林固定 36 小時(shí)，脫水，石蠟包埋比=殘余創(chuàng)面面積×100%原始創(chuàng)面面積數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差表示。應(yīng)用 SPSS 17.0 軟件處理，采用獨(dú)立樣本 t-檢驗(yàn)比較不同時(shí)間段基質(zhì)P<0.05 為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。的制備及鏡下觀

電鏡下可見基質(zhì)材料為疏松多孔狀結(jié)構(gòu)，孔徑大小為80-200μm

17 3 PBS 浸泡后，脫細(xì)胞基質(zhì)材料仍保持其原有形態(tài)，未見分解及分散，光鏡下為大小不的多孔狀結(jié)構(gòu)。脂肪顆粒組織經(jīng)納米脂肪切割器處理，離心后可除去大部分油脂成分，經(jīng)/EDTA 消化后可去除大部分細(xì)胞成分，異丙醇萃取剩余油脂城后，可獲得色膠樣細(xì)胞外基質(zhì)成分，經(jīng)凍干處理后可獲得脫細(xì)胞基質(zhì)支架材料，并可制不同形狀及大小的脫細(xì)胞基質(zhì)材料（圖 1）。掃描電鏡下可見凍干的脂肪脫基質(zhì)材料為疏松的多孔狀結(jié)構(gòu)，孔徑大小為 80-200μm（圖 2）。PBS 浸泡，仍保持其原有形態(tài)，未見分解及分散，光鏡下為大小不一的多孔狀結(jié)構(gòu)（

【參考文獻(xiàn)】

相關(guān)期刊論文 前2條

1 高娜;劉韶;吳明一;趙金華;;糖胺聚糖的結(jié)構(gòu)修飾及其衍生物應(yīng)用的研究進(jìn)展[J];中國生化藥物雜志;2012年03期

2 Kwan-Joong Joo;Byung-Soo Kim;Jeong-Ho Han;Chang-Ju Kim;Chil-HunKwon;Heung-JaePark;;Porcine vesical acellular matrix graft of tunica albuginea for penile reconstruction[J];Asian Journal of Andrology;2006年05期

本文編號(hào)：2763816