【摘要】：目的:本研究旨在探究表面帶有精氨酸-甘氨酸-天冬氨酸三肽復(fù)合體(RGD)及鎂離子(Mg+)的生物活性氧化鋯涂層對MC3T3-E1前成骨細胞黏附、增殖及礦化的影響。實驗方法:首先通過掃描電子顯微鏡(SEM)觀察了 RGD及Mg+修飾的氧化鋯材料的表面形貌,并檢測了材料的粗糙度及潤濕性。將MC3T3-E1細胞接種在氧化鋯材料表面,采用免疫熒光觀察法檢測細胞骨架的伸展情況及黏著斑表達水平,并且在細胞接種24、48、72小時后分別進行細胞核的染色,通過細胞計數(shù)的方法來檢測細胞的增殖水平。將細胞在材料表面培養(yǎng)5天后提取RNA,RT-PCR檢測細胞整合素表達水平。成骨誘導(dǎo)7、14、21天后分別提取蛋白,通過Western blot檢測細胞ALP及0CN的表達水平,并且掃描電鏡觀察成骨誘導(dǎo)10天后氧化鋯材料表面礦化結(jié)節(jié),以評估細胞的礦化水平。結(jié)果:經(jīng)過Mg+注入的氧化鋯試件掃描電鏡下可見納米級別表面結(jié)構(gòu),粗糙度(1.76±0.18μm)略高于普通氧化鋯(1.73±0.15μm)(P0.05)。表面帶有RGD修飾的氧化鋯表面接觸角為(26.4±1.64°),明顯低于普通氧化鋯(65.3±2.32°)(p0.05)。細胞在RGD及Mg+修飾的氧化鋯材料表面伸展充分,黏著斑較多并且增殖活性高于普通氧化鋯組(p0.05)。通過RT-PCR檢測發(fā)現(xiàn)帶有RGD修飾的材料表面細胞整合素ITGA5及ITGAv表達明顯提高(p0.05),并且?guī)в蠱g+的氧化鋯材料整合素ITGA1及ITGA2的表達水平明顯高于無Mg+的氧化鋯材料(p0.05)。Western blot結(jié)果顯示Mg+的加入提高了 OCN的表達,并且電鏡下可見Mg+及RGD修飾的氧化鋯材料表面的礦化結(jié)節(jié)較多,并且可見大量小礦化結(jié)節(jié)融合而成的較大礦化結(jié)節(jié)。結(jié)論:與普通氧化鋯材料相比,RGD及Mg+修飾的氧化鋯材料表面潤濕性更好,并且具有納米級別表面結(jié)構(gòu)。材料表面的RGD有利于成骨細胞的黏附、伸展及增殖,而Mg+的加入可以促進組織礦化,并且RGD及Mg+對于成骨細胞生物學(xué)行為的促進具有一定的協(xié)同作用。
【學(xué)位授予單位】：山東大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2018
【分類號】：R783.1
【圖文】：

圖１．氧化鋯試件及純鈦試件，Ａ氧化鋯試件，Ｂ純鈦試件逡逑

MC3T3-El細胞鏡下觀(x40>

圖３．掃描電鏡下各組試件的表面形貌逡逑

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本文編號：2761350