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蜂巢型多孔人工骨支架材料的制備和改性研究

發(fā)布時(shí)間:2020-06-18 20:05
【摘要】:人工骨支架材料是骨組織工程研究領(lǐng)域的一個(gè)重要內(nèi)容,它在骨缺損修復(fù)中具有極大的應(yīng)用前景。理想的骨組織工程支架材料不僅需要具備優(yōu)良的力學(xué)性能,還要求材料具有相互貫通的三維多孔結(jié)構(gòu)。一直以來(lái),支架材料所必需的多孔結(jié)構(gòu)與材料力學(xué)性能之間的矛盾都是骨組織工程材料領(lǐng)域難以攻破的一大難題。本文利用RP技術(shù)分別仿生構(gòu)建了殼聚糖/羥基磷灰石(Chitosan/Hydroxyapatite,CS/HA)多孔材料及蜂巢型聚乳酸(Polylactic Acid,PLA)多孔材料,并對(duì)制備材料進(jìn)行改性,以期獲得具有優(yōu)良力學(xué)性能及生物相容性的骨組織工程支架材料。本文先利用RP技術(shù)聯(lián)合間接成型造孔方法,經(jīng)CS/HA粉體灌模、冷等靜壓及溶蠟后獲得力學(xué)性能優(yōu)良的蜂巢型CS/HA多孔人工骨支架材料;诖,CS/HA多孔支架經(jīng)明膠(Gelatin,Gel)涂層后獲得涂層支架材料CS/HA-Gel,涂層支架再經(jīng)戊二醛(Glutaraldehyde,Gul)交聯(lián)后獲得交聯(lián)支架材料CS/HA-Gel/Gul。粒徑分析和XRD結(jié)果表明所制粉體粒徑主要為1.09-27.2μm的不規(guī)則短棒狀部分碳酸化的CS/HA復(fù)合材料,同時(shí)多孔支架材料中CS、Gel和Gul的引入均會(huì)使HA的特征峰弱化。SEM結(jié)果顯示多孔支架材料具有類似蜂巢的正六邊形多孔結(jié)構(gòu)。CS/HA支架材料表面粗糙,而CS/HA-Gel支架材料表面光滑,材料表面涂層的明膠膜覆蓋了原有的CS/HA粗糙顆粒,交聯(lián)改性后的支架材料表面的Gel膜出現(xiàn)了少量的溶解,局部暴露出CS/HA顆粒。力學(xué)性能測(cè)定結(jié)果表明涂層及交聯(lián)均能顯著提高支架材料的力學(xué)強(qiáng)度;CS/HA支架經(jīng)1次涂層和3次涂層后的抗壓強(qiáng)度分別是CS/HA支架的5.45和6.03倍,涂層改性大大增強(qiáng)了其抗壓強(qiáng)度。涂層支架材料經(jīng)戊二醛交聯(lián)后,其力學(xué)性能得到進(jìn)一步提升。明膠1次涂層和3次涂層支架經(jīng)交聯(lián)處理后,同比未交聯(lián)支架抗壓強(qiáng)度分別提高了9.72%和73.30%。體外降解實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明三種支架材料均具有良好的降解性能,三種支架材料中CS/HA-Gel/Gul降解速率最為緩慢。MTT實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示這三種蜂巢結(jié)構(gòu)多孔支架材料均符合細(xì)胞毒性要求;細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明這三種支架材料均具有良好的細(xì)胞粘附性,改性后的CS/HA-Gel和CS/HA-Gel/Gul多孔支架材料更有利于細(xì)胞的早期粘附和增殖。本文再依據(jù)計(jì)算機(jī)輔助設(shè)計(jì)的蜂巢型多孔結(jié)構(gòu)數(shù)據(jù)模型,利用3D打印機(jī)直接制備出蜂巢狀PLA多孔支架,并利用涂層及礦化手段對(duì)材料進(jìn)行表面改性。SEM結(jié)果顯示PLA多孔支架材料具有類似蜂巢的正六邊形多孔結(jié)構(gòu)。支架材料表面呈纖維層疊狀,PLA纖維之間存在小縫隙,經(jīng)殼聚糖(Chitosan,CS)涂層處理后支架材料表面形成光滑膜層。支架再經(jīng)礦化修飾后,支架涂層CS膜層表面沉積了礦物質(zhì)顆粒。電子萬(wàn)能試驗(yàn)機(jī)測(cè)壓縮強(qiáng)度表明,涂層及礦化均能提高抗壓強(qiáng)度。體外降解實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明結(jié)構(gòu)完整的純PLA支架材料降解速率過(guò)于緩慢,在前6周內(nèi)無(wú)明顯失重。而涂層及礦化改性后的PLA,其降解速率得到顯著提高,改性支架更適合作為植入式可降解人工骨材料。MTT實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示這三種PLA多孔支架材料均符合細(xì)胞毒性要求;細(xì)胞粘附生長(zhǎng)的熒光照片表明,7d后改性支架材料上細(xì)胞密度更大,活性更好。攻克骨組織工程多孔支架材料力學(xué)強(qiáng)度差這一大難關(guān),對(duì)于人工骨材料實(shí)現(xiàn)臨床應(yīng)用至關(guān)重要。依據(jù)蜂巢質(zhì)量輕、孔隙率高、機(jī)械性能好的結(jié)構(gòu)優(yōu)點(diǎn),本文仿生構(gòu)建的蜂巢狀骨組織工程多孔支架材料及其改性支架材料,既具備生物學(xué)要求的三維多孔結(jié)構(gòu),又具有優(yōu)良的力學(xué)性能及生物相容性,在骨組織工程領(lǐng)域顯示出較好的應(yīng)用前景。
【學(xué)位授予單位】:廣東工業(yè)大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2019
【分類號(hào)】:R318.08;TB383.4
【圖文】:

輔助裝置,濾紙


廣東工業(yè)大學(xué)碩士學(xué)位論文別用去離子水和無(wú)水乙醇沖洗 3 遍,晾干備用。模:如圖 2-1 所示,先用(b)中剪好的濾紙和石英模具組合蠟?zāi)>叻湃肫渲校瑱z查濾紙是否有移位。然后將組合件 入上述制備的簡(jiǎn)易輔助裝置的空槽內(nèi),用去離子水潤(rùn)洗接抽濾瓶和真空水泵。然后將用無(wú)水乙醇分散制備的 10,直至將石蠟?zāi)0逄顫M。將填滿的石蠟?zāi)0暹B同濾紙取,室溫放置晾干。

紅外光譜圖,粉末,支架材料,紅外光譜圖


架材料表面粉末的紅外光譜圖(a)CS/HA 多孔支架材料表面粉末;(b)孔支架材料表面粉末;(c)CS/HA-Gel/Gul 多孔支架材料表面粉末red spectrum of powder on the surface of porous scaffold material (a) surus scaffold material; (b) surface powder of CS/HA-Gel porous scaffold msurface powder of CS/HA-Gel/Gul porous scaffold material 所示為三種蜂巢型多孔支架材料表面粉末的的紅外光譜圖。料均有三個(gè)較為強(qiáng)烈的特征峰分別在 600 cm-1、1200 cm-1和改性后的 b 和 c 比起 a 在 1650 cm-1處特征峰有不同程度增強(qiáng)戊二醛改性后的材料引入了較多的酰胺基和氨基,同時(shí)戊二的 1737 cm-1左右的羰基伸縮振動(dòng)峰有明顯增強(qiáng),這可能一部,另一部原因是戊二醛交聯(lián)后使得明膠或殼聚糖的羰基更易被

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