【摘要】：皮膚作為人體最大的器官,是保護機體的第一道屏障,極易受到損傷,很多因素均可導致皮膚損傷。由此造成的醫(yī)療負擔已經(jīng)成為日趨嚴重的衛(wèi)生問題。隨著再生醫(yī)學近年來的深入發(fā)展,皮膚誘導再生材料成為現(xiàn)階段皮膚創(chuàng)傷修復領(lǐng)域的研究熱點之一,但是目前我國對于皮膚誘導再生材料的研究大多處在實驗階段,并沒有商品化的產(chǎn)品問世。本課題選擇三種市面上常用的材料(膠原、羧甲基殼聚糖、生物玻璃)作為皮膚誘導再生材料,初步探究三者的生物相容性以及三者作為皮膚誘導再生材料的有效性,為皮膚誘導再生材料的深入研究提供理論支持。通過羥脯氨酸含量測定實驗、傅里葉變換紅外光譜實驗、生物玻璃含量測定實驗,確定了廠家提供的三種樣品是本課題所需的膠原、羧甲基殼聚糖和生物玻璃材料,為三種材料的進一步評價提供了基礎(chǔ)。評價三種皮膚誘導再生材料的生物相容性:通過細胞毒性實驗可知,三種材料均無潛在細胞毒性;通過細菌回復突變實驗可知,三種材料無明顯的致突變性;通過染色體畸變實驗可知,三種材料均無潛在的致畸變性;通過全身急性毒性實驗可知,三種材料均不會導致小鼠出現(xiàn)急性全身毒性反應;通過遲發(fā)型超敏反應實驗可知,三種材料均不會導致豚鼠出現(xiàn)過敏反應的跡象。三種材料均表現(xiàn)出了良好的生物相容性。建立糖尿病大鼠皮膚損傷動物模型:通過腹腔一次性大劑量注射鏈脲佐菌素(STZ,75mg/kg),可成功構(gòu)建穩(wěn)定的I型糖尿病大鼠動物模型;接著通過除去動物背部一塊全層皮膚(2cm×2cm),即可成功建立I型糖尿病大鼠皮膚損傷動物模型,為評價三種皮膚誘導再生材料的有效性提供了模型基礎(chǔ)。評價三種材料的有效性:將三種材料應用于動物模型,評價三者的效果。通過大體觀察,膠原組、羧甲基殼聚糖組和生物玻璃組動物皮膚的愈合情況均優(yōu)于對照組;通過愈合率的比較,膠原組和生物玻璃組術(shù)后第3、7、14、21天的愈合率均高于空白對照組,促進皮膚愈合效果明顯,而羧甲基殼聚糖組術(shù)后第7、14、21天的愈合率均低于空白對照組,未能有效地促進皮膚愈合;HE染色結(jié)果顯示,術(shù)后第14天,膠原組和生物玻璃組已出現(xiàn)層次分明的表皮、真皮結(jié)構(gòu),皮膚附屬器清晰可見,皮膚愈合程度明顯優(yōu)于對照組,羧甲基殼聚糖組仍未形成層次分明的表皮、真皮結(jié)構(gòu),未見皮膚附屬器,愈合效果不佳;術(shù)后第21天,各組動物皮膚均已基本愈合。通過本課題的研究,發(fā)現(xiàn)膠原、羧甲基殼聚糖、生物玻璃材料均表現(xiàn)出良好的生物相容性,其中膠原和生物玻璃可以一定程度上促進糖尿病大鼠皮膚損傷的愈合,而羧甲基殼聚糖的效果并不明顯。
【圖文】：

V : 稀釋體積，單位為 mLA1：樣品中羥脯氨酸峰面積An：氨基酸對照品中 L-羥脯氨酸峰面積m：樣品質(zhì)量，單位為 g1.4 實驗結(jié)果由氨基酸標準品的保留時間可知，待測樣品的酸水解產(chǎn)物含有 15 種氨基酸（見圖 1.1～1.4），分別為天門冬氨酸（Asp），絲氨酸（Ser），蘇氨酸（Thr），谷氨酸（Glu），甘氨酸（Gly），丙氨酸（Ala），纈氨酸（Val），異亮氨酸（Ile），亮氨酸（Leu），苯丙氨酸（Phe），賴氨酸（Lys）,組氨酸（His），精氨酸（Arg），羥脯氨酸（Hypro），脯氨酸（Pro）；經(jīng)計算得出，供試液中羥脯氨酸含量是9.20%，與文獻報道的膠原中羥脯氨酸含量[45]較接近（約為 10%）。

V : 稀釋體積，單位為 mLA1：樣品中羥脯氨酸峰面積An：氨基酸對照品中 L-羥脯氨酸峰面積m：樣品質(zhì)量，單位為 g1.4 實驗結(jié)果由氨基酸標準品的保留時間可知，待測樣品的酸水解產(chǎn)物含有 15 種氨基酸（見圖 1.1～1.4），分別為天門冬氨酸（Asp），絲氨酸（Ser），，蘇氨酸（Thr），谷氨酸（Glu），甘氨酸（Gly），丙氨酸（Ala），纈氨酸（Val），異亮氨酸（Ile），亮氨酸（Leu），苯丙氨酸（Phe），賴氨酸（Lys）,組氨酸（His），精氨酸（Arg），羥脯氨酸（Hypro），脯氨酸（Pro）；經(jīng)計算得出，供試液中羥脯氨酸含量是9.20%，與文獻報道的膠原中羥脯氨酸含量[45]較接近（約為 10%）。
【學位授予單位】：中國食品藥品檢定研究院
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2019
【分類號】：R318.08

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本文編號：2700275