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聚吡咯—聚多巴胺復(fù)合涂層結(jié)合直流電刺激對細(xì)胞的影響

發(fā)布時間:2020-04-13 23:34
【摘要】:鈦及鈦合金因其優(yōu)異的生物相容性,優(yōu)良的加工性等性能而被廣泛應(yīng)用于金屬骨移植,牙種植體等生物醫(yī)學(xué)領(lǐng)域。由于鈦與骨組織之間僅為機械性骨整合而非骨性結(jié)合,鈦表面的生物活性材料的涂層研究引起了廣泛關(guān)注。導(dǎo)電高分子作為一類有機材料,在生物醫(yī)學(xué)領(lǐng)域具有廣泛的應(yīng)用前景,如應(yīng)用于體外或可植入電極的細(xì)胞記錄和刺激,導(dǎo)電支架的細(xì)胞支持,組織工程等。聚吡咯(PPy)作為導(dǎo)電高分子,具有優(yōu)良導(dǎo)電性,化學(xué)穩(wěn)定性,生物相容性,同時制備簡單,能夠結(jié)合陰離子型生物分子,得到了廣泛的研究,尤其是作為生物涂層材料具有很大應(yīng)用前景。聚多巴胺(PDA)是一種表面修飾材料,具有簡單、安全、有效和節(jié)省成本的特點,滿足骨組織工程的需要。PDA的粘附功能是與骨組織再生相關(guān)的最具優(yōu)勢的特征之一。它可以作為不同骨生物基質(zhì)界面上的修飾劑,改善它們的界面特性,為組織結(jié)構(gòu)提供大量的選擇。理想的骨植入材料在具有良好的生物相容性和骨誘導(dǎo)活性的同時,還能夠響應(yīng)外界刺激,對細(xì)胞的附著、鋪展、增殖以及生物功能表達(dá)起著重要的調(diào)節(jié)作用。細(xì)胞黏附依賴于蛋白的吸附。一層被吸附的蛋白質(zhì)將細(xì)胞粘附在生物材料表面上,由于蛋白質(zhì)的帶電性質(zhì),外部電刺激的作用將會影響蛋白質(zhì)在材料表面的附著。本文研究了以不同方式結(jié)合的聚吡咯與聚多巴胺的復(fù)合涂層與電刺激對細(xì)胞的協(xié)同作用,在兼顧涂層對種植體表面的黏附性的同時,響應(yīng)外部微電流的刺激,提高植入成功率。本論文主要由兩個部分組成,主要研究內(nèi)容和研究結(jié)果如下:1)兩步法制備PPy-PDA納米復(fù)合涂層,探究其與電刺激對小鼠胚胎成骨細(xì)胞前體MC3T3-E1細(xì)胞的協(xié)同作用。通過兩步電化學(xué)沉積的方法,制備PPy納米線形貌的涂層,并探究不同沉積方式對PPy形貌的影響。結(jié)果表明,0.85 V恒電位電化學(xué)沉積250 s條件下能在鈦片上得到覆蓋均勻,尺寸均一的納米線,直徑約50 nm。將制得的PPy納米線材料浸入多巴胺聚合溶液中,利用弱堿性條件下多巴胺的自聚,對PPy納米線進(jìn)行表面修飾。多巴胺溶液聚合時間對材料形貌具有顯著影響,聚合6 h后能得到均勻覆蓋PPy納米線表面的PPy-PDA納米復(fù)合涂層。結(jié)果表明該PPy-PDA涂層材料氧化還原活性顯著,穩(wěn)定性高,附著力強,同時保持一定的導(dǎo)電性。為探究涂層對MC3T3-E1細(xì)胞在電刺激下的作用,自制一種電刺激裝置,培養(yǎng)一段時間后觀察細(xì)胞形態(tài),檢測細(xì)胞在材料表面的黏附與增殖,堿性磷酸酶(ALP)活性,BCA蛋白質(zhì)含量。結(jié)果表明結(jié)合電刺激后,細(xì)胞在測試材料表面得到更好的增殖、鋪展,BCA蛋白質(zhì)含量提高,細(xì)胞新陳代謝能力增強,ALP活性檢測結(jié)果表明,電刺激有助于MC3T3-E1細(xì)胞的礦化成骨。2)一步法制備PPy-PDA共聚涂層,探究其與電刺激對MC3T3-E1細(xì)胞和小鼠成纖維細(xì)胞L929的協(xié)同作用。通過一步電沉積PPy與PDA的混合溶液制備PPy-PDA復(fù)合涂層,并對材料進(jìn)行相應(yīng)的性能表征。實驗結(jié)果表明,該涂層材料具有更粗糙的表面,使得材料能促進(jìn)細(xì)胞的黏附與增殖,提高組織相容性。細(xì)胞實驗表明PPy-PDA共聚涂層具有優(yōu)異的生物相容性。尤其在探究材料與電刺激對L929細(xì)胞的作用時,觀察了細(xì)胞在材料表面的生長狀況,繪制細(xì)胞的生長曲線,結(jié)果表明,結(jié)合電刺激后的PPy-PDA共聚材料能大大促進(jìn)細(xì)胞的黏附、增殖。
【圖文】:

多巴胺,生物材料,表面改性,氧化產(chǎn)物


邐?逡逑i:邋physical邋sclf-a^cmbly邋puthwuys;邋ii:邋covalen!邋oxidutivc邋polymcri/alion逡逑圖1-3聚多巴胺可能的形成機理:⑷多巴胺氧化Hb)氧化產(chǎn)物形成低聚物;(c)低逡逑聚物形成交聯(lián)聚多巴胺;(d)氧化產(chǎn)物通過氫鍵結(jié)合在一起以6)氧化產(chǎn)物通過7T-7T逡逑堆積形成三聚體;(f)氧化產(chǎn)物通過共價鍵形成低聚體;最終形成的聚多巴胺。1971逡逑Fig.1-3邋The邋possible邋formation邋mechanism邋of邋polydopamine:邋(a)邋the邋oxidation邋of逡逑dopamine;邋(b)邋oligomers邋formed邋from邋oxidized邋products;邋(c)邋crosslinked逡逑polydopamine邋formed邋from邋the邋oligomers;邋(d)邋the邋oxidation邋products邋bonded逡逑together邋b

電刺激,多巴胺


邋%逡逑:邐Potydopamio?邐^邋0hJ逡逑圖1-4聚多巴胺在生物材料表面改性中的應(yīng)用l1G1l逡逑Fig.邋1-4邋The邋application邋of邋polydopamine邋in邋surface邋modification邋of逡逑biomaterials逡逑實。對于PDA結(jié)構(gòu)的鍵合方式,有研[側(cè)嗽比銜強殼糠槍布勱岷狹,这旨堘辶x蝦狹Ω秤瑁校模磷愎壞奈榷ㄐ院退蝗芐裕ㄍ跡歟常洌。褐G氐慕峁茍裕模戀難繡義襄程峁┝酥匾鬧傅家庖。真褐G匭緯苫碓誶把繡郴∩轄辛死┏洌,同时辶x隙雜詰ヌ騫布勱岷顯誥酆銑跗詰鬧匾雜枰鄖康鰲#茫酰櫚熱耍郟梗福菀遠(yuǎn)喟桶返難萇镥義希停希牛ㄥ澹玻ㄥ澹矗恚澹簦瑁錚常恚澹簦瑁歟穡瑁澹睿歟╁澹澹簦瑁歟幔恚椋睿澹┳魑P偷ヌ褰芯酆希庵值ュ義咸搴薪仙倩钚暈壞。根据实验结果推测D倌聚合过池濣含觾措s苫酆稀>坼義隙喟桶沸緯曬痰母叢有雜胂鐘屑觳饈侄蔚木窒扌,为各类芯暽机诸l某魷痔峁╁義狹嘶,尚无法定论。辶x獻(xiàn)躍酆蝦途酆蝦蟮那筐じ叫允茍喟桶煩晌τ糜詒礱娓男緣撓叛〔牧希ㄍ煎義希保矗。良好导{鏘噯菪允溝茫校模糧男院蟮牟牧夏艽俳赴釀じ劍校模簾礱駑義戲岣壞陌被Ⅳ腔杷牧系那姿愿納鋪峁┛贍。在PD拡A溉槎锏某懾義瞎竅赴、神经元爹o納鋃拘匝繡呈笛櫓

本文編號:2626583

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