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納米銀對成年斑馬魚尾鰭再生的毒理學(xué)效應(yīng)研究

發(fā)布時間:2020-04-08 13:38
【摘要】:由于具有優(yōu)良的抗菌性能和獨特的理化性質(zhì),納米銀已成為商業(yè)化程度最高的納米材料之一,被廣泛應(yīng)用于醫(yī)療健康領(lǐng)域。納米銀抗菌敷料可用于燒傷、手術(shù)傷口和慢性潰瘍的治療,是目前最受關(guān)注的一類傷口敷料,但目前對其使用的安全性和有效性判定尚不明晰。體外研究顯示納米銀具有強的細(xì)胞毒性,而動物實驗和臨床上普遍認(rèn)為銀敷料對傷口愈合是有效的。因此,納米銀的傷口使用安全性亟待評價。目前,納米材料對傷口愈合的毒性作用的評估模型主要集中于細(xì)胞和小鼠等,缺少快速、直觀的活體模型。本論文利用成年斑馬魚尾鰭再生模型,構(gòu)建了單獨暴露尾鰭組織的方法。在此基礎(chǔ)上研究了平均直徑10 nm的檸檬酸鈉包被的納米銀暴露對斑馬魚尾鰭傷口愈合和組織再生的毒性影響,研究著重關(guān)注了不同窗口期暴露納米銀對其毒性產(chǎn)生的影響,探討了納米銀對細(xì)胞增殖、細(xì)胞凋亡、免疫細(xì)胞募集、基因表達(dá)和創(chuàng)傷誘導(dǎo)的活性氧(Reactive Oxygen Species,ROS)的影響。本文設(shè)計制作了單獨暴露斑馬魚尾鰭的模具,建立了一套簡單、快速和重復(fù)性好的暴露方法。該方法結(jié)合斑馬魚尾鰭再生模型易于觀察的特點,能夠滿足毒理學(xué)實驗的要求,可有效應(yīng)用于納米材料對傷口愈合的毒理學(xué)研究中。研究顯示,納米銀暴露減慢斑馬魚尾再生速率,對組織再生具有毒性作用。對比不同的暴露窗口期,在傷口上皮化階段(12-24 hours post amputation,hpa)暴露2μg/mL的納米銀5分鐘可顯著抑制斑馬魚尾鰭再生,超過24 hpa暴露則不會產(chǎn)生抑制作用。12 hpa的抑制作用比24 hpa更強且能在1-7天內(nèi)持續(xù)抑制尾再生。而銀離子不產(chǎn)生抑制作用,表明了納米銀的顆粒效應(yīng)是造成尾再生毒性的主要原因。暴露后再生尾鰭增殖細(xì)胞顯著減少、凋亡細(xì)胞增多,中性粒細(xì)胞招募超過正常水平約50%,創(chuàng)傷誘導(dǎo)的ROS產(chǎn)生量降低,最終導(dǎo)致組織再生的毒性作用。綜上,本論文基于斑馬魚尾鰭再生模型的模擬暴露研究,發(fā)現(xiàn)納米銀以暴露的階段依賴性方式抑制斑馬魚尾鰭再生,明顯抑制再生尾鰭的細(xì)胞增殖。這些結(jié)果提示,在傷口處理時應(yīng)該避免在傷口上皮化階段使用納米銀敷料。
【圖文】:

納米銀,抑菌機(jī)制


烯聚合物的磨損[55]。由納米銀涂層聚丙烯制成的網(wǎng)狀織物由于其抗性被認(rèn)為是心臟修補網(wǎng)狀織物的理想材料,用于心臟修補[56]。 抗菌機(jī)制目前認(rèn)為的納米銀的抗菌機(jī)制(圖 1-1)有以下幾種:(1)納米銀有,易于附著在細(xì)胞膜上,直接損傷細(xì)胞膜,并滲透到細(xì)菌內(nèi)部[57]。(含有含硫蛋白質(zhì),納米銀釋放的 Ag+可以與它們以及含磷化合物如 D用,阻止 DNA 復(fù)制,導(dǎo)致細(xì)菌死亡[58]。(3)納米銀或 Ag+可以攻擊中的呼吸鏈并導(dǎo)致細(xì)胞死亡[59]。(4)納米銀可以在細(xì)菌細(xì)胞內(nèi)(在 p境中)持續(xù)釋放 Ag+,使細(xì)菌產(chǎn)生活性氧自由基(ROS)并誘導(dǎo)氧發(fā)揮殺菌作用[58]。

傷口愈合,階段,炎癥


傷口愈合的典型階段[88]。(a)止血和炎癥(b)新組織形成(c階段形成纖維蛋白凝塊,以防止通過血管收縮失血以及避免微階段幾乎與止血同時開始,從受傷幾分鐘到 24 小時,持續(xù)愈合中起著重要作用,不僅保護(hù)傷口免受入侵微生物的侵害,程[90, 91]。在這個階段,需要凝血、炎癥和免疫系統(tǒng)結(jié)合,以防,去除死亡和垂死的組織,,并避免感染[88]。炎癥涉及中性粒
【學(xué)位授予單位】:江漢大學(xué)
【學(xué)位級別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2019
【分類號】:TB383.1;O614.122;R318.08

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本文編號:2619411

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